a我國(guó)現(xiàn)有的3類(lèi)轉(zhuǎn)bt基因抗蟲(chóng)棉品系棉鈴蟲(chóng)抗性的遺傳分析

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1、第44卷第19期科學(xué)通報(bào)1999年10月簡(jiǎn)報(bào)270~27712MislerS,FalkeLC,GillisK,etal.Ametabolite-regulatedpotassiumchannelinratpancreaticB-cells.ProcNatlAcadSciUSA,1986,83:7119~712313BersD.Excitation-contractioncouplingandcardiaccontractileforce.Dordrecht:KluwerAcademicPress,1991.1~25814HerringtonJ,ParkYB,BabcockD

2、F,etal.DominantroleofmitochondrialinclearanceoflargeCaloadsfromratadrenalchromaffincells.Neuron,1996,16:219~22815徐濤,瞿安連,康華光,等.SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)鈣庫(kù)特性研究.生物物理學(xué)報(bào),1995,12:234~23816RoeMW,LancasterME,MertzRJ,etal.Voltage-dependentintracellularcalciumreleasefrommouseisletsstimulatedbyglucose.JBiolChem,199

3、3,268:9953~9956(1998-12-10收稿,1999-04-29收修改稿)我國(guó)現(xiàn)有的3類(lèi)轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)棉品系棉鈴蟲(chóng)抗性的遺傳分析11111*唐燦明孫敬朱協(xié)飛郭旺珍張?zhí)煺鎜oo??沈晉良高叢芬周威君陳志賢郭三堆(1南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)系,農(nóng)業(yè)部農(nóng)作物種質(zhì)資源與育種重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室,南京210095;o南京農(nóng)業(yè)大學(xué)物植物保護(hù)系,南京210095;?山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所,運(yùn)城044000;?中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究中心,北京100081.*聯(lián)系人.E-mail:cgbrlnau@public1.ptt.js.cn)摘要我國(guó)主要有3類(lèi)轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)棉,都已培育出品種

4、或雜交種并在生產(chǎn)上推廣利用.遺傳分析表明,山西94-24、中心94和R193類(lèi)轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)棉親本品系對(duì)棉鈴蟲(chóng)的抗性各由一對(duì)顯性主基因控制,它們的抗蟲(chóng)基因非等位.山西94-24與R19的Bt基因可能整合在陸地棉品種的同一染色體上,表現(xiàn)為連鎖遺傳.山西94-24、中心94、R193個(gè)抗蟲(chóng)棉品系間互交雜種抗蟲(chóng)性與親本類(lèi)似,表明抗蟲(chóng)基因在雜合狀態(tài)下無(wú)共抑制現(xiàn)象存在.該研究結(jié)果為轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的培育及抗蟲(chóng)雜交棉雜種優(yōu)勢(shì)利用提供了基本依據(jù).關(guān)鍵詞陸地棉轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)性棉鈴蟲(chóng)遺傳蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)產(chǎn)生的Bt殺蟲(chóng)晶體蛋白對(duì)鱗翅目、鞘翅目及雙翅目的多

5、種害蟲(chóng)具有毒殺作用.將Bt基因轉(zhuǎn)入棉花培育轉(zhuǎn)基因的抗蟲(chóng)棉,是近年來(lái)生物技術(shù)取得[1]的重大突破之一.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究中心于1992年在國(guó)內(nèi)首先合成了Bt基[2]因,并和山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所、江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所合作,通過(guò)根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法和花粉管通道法,成功地將這一Bt基因?qū)腙懙孛尥茝V品種中,從而獲得轉(zhuǎn)基[3,4]因抗蟲(chóng)棉品種.生物學(xué)測(cè)定和田間鑒定結(jié)果表明,它們對(duì)棉鈴蟲(chóng)表現(xiàn)有顯著的抗蟲(chóng)性.本文報(bào)道這些品種(系)對(duì)棉鈴蟲(chóng)抗性的遺傳方式.1材料與方法轉(zhuǎn)Bt抗蟲(chóng)棉品系山西94-24、中心94和R19分別由山西省棉花研究所、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)中心、中國(guó)

6、農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所提供.引入后進(jìn)行連續(xù)4代的自交純化和棉鈴蟲(chóng)2064第44卷第19期科學(xué)通報(bào)1999年10月簡(jiǎn)報(bào)抗性測(cè)定,將農(nóng)藝性狀和抗蟲(chóng)性純合的品系用于遺傳研究.山西94-24和中心94是Bt基因分[3,4]別導(dǎo)入晉棉7號(hào)和泗棉3號(hào)中培育而成的,兩者導(dǎo)入的基因相同,但導(dǎo)入的方法不一樣.山西94-24是通過(guò)根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法培育而成,而后者則是通過(guò)花粉管通道法培育的.用這3類(lèi)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的種質(zhì)都已經(jīng)培育出抗蟲(chóng)棉的品種,并在生產(chǎn)上推廣利用.采用棉鈴蟲(chóng)敏感品系SuS2的初孵幼蟲(chóng)喂養(yǎng)山西94-24、中心94親本以及各雜種分離群體的葉片進(jìn)行抗蟲(chóng)性檢測(cè).植株受害程度劃分標(biāo)準(zhǔn)、抗蟲(chóng)性的

7、遺傳分析方法等見(jiàn)文獻(xiàn)[5].采用人工合成引物對(duì)各個(gè)轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)棉品系及各F1群體進(jìn)行PCR擴(kuò)增跟蹤,確認(rèn)用于遺傳分析的材料有Bt整合基因,蘇棉12號(hào)作為陰性或感蟲(chóng)對(duì)照.2結(jié)果與分析2.1山西94-24的遺傳方式山西94-24與陸地棉常規(guī)品種(系)無(wú)系272、鹽8054、川109、中棉所23等雜交的F1群體植株幼苗(2~3片真葉時(shí))的抗蟲(chóng)性測(cè)定表明(表l),處理5d后,棉鈴蟲(chóng)初孵幼蟲(chóng)的死亡率為91.7%~100%,存活幼蟲(chóng)中基本為l齡蟲(chóng)和2齡蟲(chóng),植株受害程度為1級(jí).而喂養(yǎng)對(duì)照蘇棉12葉片的棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)死亡率僅6.2%

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