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《現(xiàn)代顯微成像技術(shù)綜述.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、現(xiàn)代顯微成像技術(shù)綜述摘要：概述了光學(xué)寬視場顯微鏡、共聚焦顯微鏡、超分辨率顯微鏡中所應(yīng)用的現(xiàn)代顯微成像技術(shù)，對各種傳統(tǒng)和先進的顯微成像原理進行了總結(jié)。光學(xué)寬視場顯微鏡最常用的顯微技術(shù)有明場成像、暗場成像、相襯成像、偏光成像、微分干涉(DIC)成像、調(diào)制對比成像和熒光成像。相襯成像中根據(jù)不同的成像結(jié)構(gòu)還有切趾相襯成像。微分干涉除了傳統(tǒng)的偏振光照明還有圓偏振光照明(CDIC)和專用于塑料的微分干涉(PlasDIC)o共聚焦顯微鏡隨著計算機技術(shù)和制造技術(shù)的發(fā)展而有了巨人的發(fā)展。除了傳統(tǒng)的共聚焦熒光顯微鏡以外
2、，還有連續(xù)反斯托克斯拉曼散射(CARS)共聚焦、多光子共聚焦和白光共聚焦。超分辨率顯微鏡中主要介紹了受激輻射淬滅(STED)技術(shù)和緊隨基態(tài)淬滅顯微技術(shù)的單分子返回(GSDIM)技術(shù)。關(guān)鍵詞：寬視場顯微鏡；共聚焦顯微鏡；超分辨率；顯微成像技術(shù)中圖分類號：0435文獻標志碼：Adoi:10.3969/j.issn.10055630.2015.06.017Abstract:Theimagingtechnologyinmodernmicroscopeforwidefieldmicroscope,confoc
3、almicroscopeandsuperresolutionmicroscopeisoutlinedhere.Themostfrequentlyusedtechnologyinthewidefieldmicroscopeisbrightfield,darkfield,phasecontrast,polarization,DIC,modulationcontrastandfluorescence.Inphasecontrast,thereisalsoapodizedphasecontrast.Inad
4、dition,DIC,CDICandPlasDICarealsopresented.Confocalmicroscopeisdevelopedgreatlywiththedevelopmentofcomputerandmanufacturetechnology.Besidesconventionalconfocalsystem,thepiincipleofcoherentantiStokesRamanscattering(CARS)confocal,multiphotoconfocal,whitec
5、onfocalarealsoexplainedindetail.Asforsuperresolutionmicroscope,theprincipleofstimulatedemissiondepletion(STED)且ndgroundstatedepletionmicroscopyfollowedbyindividualmoleculereturn(GSDIM)areclarified.Keywords：widefield；confocal；superresolution；microscopei
6、magingtechnology引言顯微鏡根據(jù)成像方式可以分為光學(xué)寬視場顯微鏡、共聚焦顯微鏡、體視顯微鏡[1]O光學(xué)寬視場顯微鏡和共聚焦顯微鏡更多地應(yīng)用于生命科學(xué)研究，對成像的要求更高，而體視顯微鏡更多應(yīng)用于工業(yè)領(lǐng)域，對數(shù)碼化和人性化的要求更高[2]O本文主要闡述用于生命科學(xué)領(lǐng)域的顯微成像技術(shù)，光學(xué)寬視場顯微鏡常用的顯微技術(shù)有明場成像、暗場成像、相襯成像、偏光成像、微分干涉(DIC)成像、調(diào)制對比成像和熒光成像，共聚焦顯微鏡常用的顯微技術(shù)有熒光、全反射、超分辨、多光子和口光共聚焦成像。1光學(xué)寬視場顯
7、微鏡在光學(xué)寬視場顯微鏡中的各種成像技術(shù)中，明場、暗場、偏光和熒光成像是為了使需要觀察的標本結(jié)構(gòu)可見，而相襯、微分干涉、調(diào)制對比成像是將標本結(jié)構(gòu)屮的相位變化顯現(xiàn)出來。很多情況下幾種成像技術(shù)同時使用。1.1明場成像和暗場成像明場成像是最基本的顯微成像技術(shù)，其他所有的成像技術(shù)都是以明場成像為基礎(chǔ)的。明場成像光路如圖1所示，光源通過集光鏡和聚光鏡聚焦到標本上，如果是臨界照明，燈絲的像直接會聚到標本；如果是科勒照明,燈絲像會聚在聚光鏡前焦面，由聚光鏡再照射到標本上。透射過標木的光線由物鏡收集在物鏡后焦面上形成
8、光瞳的像，光瞳的像是相對于空I'可的成像光線角度的分布，現(xiàn)代顯微鏡中多用這個位置進行各種對比方式的變化。經(jīng)過后焦而后，光線進入鏡筒透鏡，鏡筒透鏡將相對于空間的角度分布變換為相對于空間的位置分布，即在鏡筒透鏡的后焦血形成中間像面。現(xiàn)代顯微鏡中，在鏡筒透鏡形成中間像面之前，會利用Cmount鏡頭轉(zhuǎn)接中間像面到攝像頭上，從而實現(xiàn)數(shù)碼成像，便于現(xiàn)代教學(xué)和研究。最后中間像面由目鏡成像到眼睛的視網(wǎng)膜上，從而看到放大的像。暗場成像和明場成像只有照明光路有所區(qū)別。暗場成像是以超出物鏡
