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《誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞若干關(guān)鍵問(wèn)題的研究進(jìn)展》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、重慶醫(yī)學(xué)2010年9月第39卷第18期2521·綜述·誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞若干關(guān)鍵問(wèn)題的研究進(jìn)展李家速，趙宜香。綜述，姚忠祥弘審校(1．第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)員旅四隊(duì)，重慶400038；2．第三軍醫(yī)大學(xué)組織胚胎學(xué)教研室，重慶400038；3．中國(guó)藥科大學(xué)中藥學(xué)院09453班，江蘇南京2】1198)關(guān)鍵詞：誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞；誘導(dǎo)；安全性；效率doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2010．18．064中圖分類(lèi)號(hào)：R392．4；R457．7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1671—8348(2010)18—2521—032006年，Takahashi和Yama
2、naka[1研究小組利用逆轉(zhuǎn)錄胞的多潛能性]。但是由于所需外源因子個(gè)數(shù)不確定和重編病毒將Oct3／4、Sox2、c—myc和Klf4四個(gè)轉(zhuǎn)錄因子(fourtran～程目標(biāo)細(xì)胞的異質(zhì)性等原因，重編程潛在的分子機(jī)制還是不完scriptionfactors，4TFs)導(dǎo)入小鼠已分化的成纖維母細(xì)胞，再應(yīng)全明了。用小鼠胚胎干細(xì)胞(embryonicstemcell，ESc)培養(yǎng)條件將其去2低毒性或無(wú)毒性載體的使用分化，重編程為誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(inducedpluripotentstem最早得到的iPS是經(jīng)由原癌基因c—myc或其蛋白產(chǎn)物生cell，iPS)。iPS
3、在形態(tài)結(jié)構(gòu)、表面標(biāo)志物、增殖分化和畸胎瘤形成的，Klf4也牽涉致癌作用，而且是通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒成等方面與ESc極為相似，因此，其在移植免疫排斥、干細(xì)胞及慢病毒來(lái)介導(dǎo)的，易導(dǎo)致外來(lái)因子異位表達(dá)整合人宿主細(xì)胞治療、組織器官再生以及法律倫理學(xué)等方面極具優(yōu)勢(shì)。自此以的基因組，存在變異、自身基因表達(dá)調(diào)節(jié)失調(diào)、移植后腫瘤形成后，iPS便成為多領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，在誘導(dǎo)的因子、載體安全等風(fēng)險(xiǎn)，從而阻礙其未來(lái)的臨床應(yīng)用。最近的研究利用DNA性、效率等方面都取得了舉世矚目的成果。本文將對(duì)iPS誘導(dǎo)轉(zhuǎn)座子、質(zhì)粒及游離載體等，誘導(dǎo)成功后剔除外源性插入物，在重編程的最新研究進(jìn)展
4、進(jìn)行綜述。iPS安全性方面取得了突破性進(jìn)展。1誘導(dǎo)產(chǎn)生iPS的必要因子Kaji等以含有遺傳序列DNA片段的轉(zhuǎn)座子替代病毒Takahashi和Yamanaka[研究小組證實(shí)了4TFs的組合作為多蛋白表達(dá)載體，在CAG增強(qiáng)子的驅(qū)動(dòng)下，將串聯(lián)在2A可以誘導(dǎo)iPS的產(chǎn)生，但誘導(dǎo)的效率較低，安全性方面也存在寡肽序列上的4TFs同時(shí)導(dǎo)入鼠和人多能性標(biāo)記物高表達(dá)的風(fēng)險(xiǎn)，因此這些轉(zhuǎn)錄因子是否具有可替代性，是否均為必要因成纖維細(xì)胞，成功獲得iPS后又利用Cre重組酶瞬時(shí)轉(zhuǎn)染系子等問(wèn)題還有待深入研究。統(tǒng)，將外源性重組因子尤其是c—myc切除，降低了致癌風(fēng)險(xiǎn)，極Yu等_2利用慢
5、病毒載體介導(dǎo)Oct4、Sox2、Nanog和Lin28大地增強(qiáng)了iPS在再生醫(yī)學(xué)、藥物篩選和構(gòu)建疾病模型等方面4種轉(zhuǎn)錄因子，成功誘導(dǎo)胎兒成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為具有人ESc特的應(yīng)用性。此方法的優(yōu)點(diǎn)在于載體擁有自我剪切的能力，可以征的iPS；Zhou等則利用腺病毒介導(dǎo)Ngn3、Pdxl、Mafa3種在移植后被剔除，但此途徑重組效率偏低，還有待進(jìn)一步研究。轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)染成年動(dòng)物的胰腺外分泌細(xì)胞，成功轉(zhuǎn)化為胰島BSoldner等。。利用Cre重組酶在生成iPS后將外源性重組細(xì)胞；而Huangfu等只用Oct4、Sox2就生成了人成纖維細(xì)因子去除，盡管保持了iPS的可塑狀態(tài)
6、，但依舊不能避免殘余胞的iPS，說(shuō)明Oct4、Sox2在誘導(dǎo)重編程的過(guò)程中是必需的。插入物導(dǎo)致的基因突變。Woltjen等采用相似的不依賴病Kim等[利用單個(gè)轉(zhuǎn)錄因子Oct4的異位表達(dá)，即人為操縱外毒的單一化轉(zhuǎn)座子piggyBac表達(dá)載體，介導(dǎo)可誘導(dǎo)的特殊轉(zhuǎn)源基因Oct4的導(dǎo)入和表達(dá)，成功誘導(dǎo)人胎兒神經(jīng)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化錄因子多西環(huán)素(doxycycline)，易化導(dǎo)人宿主細(xì)胞基因組，產(chǎn)為iPS，證實(shí)Oct4在分子水平誘導(dǎo)多潛能性方面不僅是必要生穩(wěn)定的iPS；接著他們利用具有天然屬性的piggyBac系統(tǒng)轉(zhuǎn)的而且是能夠勝任的，實(shí)現(xiàn)單因子誘導(dǎo)iPS的創(chuàng)舉。Oct4座
7、酶的瞬時(shí)表達(dá)，無(wú)痕跡地去除iPS的外源性插入物即致癌基是多能干細(xì)胞的標(biāo)記物，被認(rèn)為是只在多能干細(xì)胞中高水平表因，從而使生成的iPS更安全和高效。達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子，通過(guò)外源性信號(hào)分子介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，與由此可見(jiàn)，2A寡肽序列的應(yīng)用不僅使得誘導(dǎo)所需的轉(zhuǎn)錄內(nèi)源性轉(zhuǎn)錄因子Nanog、Sox2等共同組成基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，以維因子在單一結(jié)構(gòu)上遞送，而且使得外來(lái)結(jié)構(gòu)的完全切除變得更持干細(xì)胞的多能性，因其作用的多樣性和表達(dá)的特異性而被認(rèn)加容易。這項(xiàng)新技術(shù)在加速重編程機(jī)制的深入研究和未來(lái)的為是控制干細(xì)胞多能性的決定性因素]。通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒將細(xì)胞治療方面有重大意義。倘若與micro
8、RNA、基因標(biāo)記等技Oct4導(dǎo)人胎兒神經(jīng)干細(xì)胞，嵌入鼠內(nèi)細(xì)胞群，并
