自制蝎毒提取儀對(duì)蝎毒提取和蝎毒蛋白含量的測(cè)定.pdf

《自制蝎毒提取儀對(duì)蝎毒提取和蝎毒蛋白含量的測(cè)定.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。

1、陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)2014，60(2)：33—35ShaanxiJournalofAgriculturMSciences自制蝎毒提取儀對(duì)蝎毒提取和蝎毒蛋白含量的測(cè)定何鳳琴，尹偉。馬海濤(西安文理學(xué)院生物技術(shù)學(xué)院，陜西西安710065)摘要：用自制蝎毒提取儀提取蝎毒，以蝎毒蛋白的含量為指標(biāo)，用紫外分光光度法測(cè)定其含量，將測(cè)量出的結(jié)果與傳統(tǒng)的凱氏定氮法測(cè)出的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，其結(jié)果極為相近。說(shuō)明自制蝎毒提取儀可用，分光光度法測(cè)量蝎毒蛋白，操作簡(jiǎn)單，實(shí)用性強(qiáng)。關(guān)鍵詞：蝎毒；蝎毒蛋白；蝎毒提取儀；分光光度法；電激取毒法蝎子的主要功效在于蝎毒，蝎毒的功效是全1材料與方法蝎煎劑的18倍。研究表明，蝎毒主要由非蛋

2、白質(zhì)部分和蛋白質(zhì)部分組成。而蝎毒中的主要成份，1．1實(shí)驗(yàn)儀器自制蝎毒提取儀(已申請(qǐng)專利)、wFZ一800是具有藥理學(xué)活性的蛋白質(zhì)，其中包括一些具有特異功能細(xì)胞因子、神經(jīng)因子、細(xì)胞毒蛋白和一些一DZ型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、三角燒瓶、容量瓶、小燒杯、移液管、膠頭滴管、精密電子稱(精確到工具酶。蝎毒對(duì)冠心病、心肌梗塞、腦梗塞、動(dòng)脈毫克以下)、大頭針。硬化、風(fēng)濕、肝病、高血粘稠、心腦血管疾病都有很1．2試劑好的治療效果J。氯化氨(基準(zhǔn))，奈氏試劑(35g碘化鉀和1．3成年活蝎在遇到激惹的狀況下，出于防護(hù)或g氯化汞溶解于70mL水中，再加入30mL氫氧攻擊的天性，會(huì)從毒囊中排出毒液。采集蝎毒就化鉀溶液

3、)，聚乙二醇。是根據(jù)這個(gè)機(jī)理進(jìn)行的。當(dāng)前，常用的辦法有剪1．3實(shí)驗(yàn)方法尾法、人工刺激法和電刺激法。剪尾法是直接剪1．3．1蝎毒的提取將盛有生理鹽水的燒杯放下活蝎的尾節(jié)，采下整個(gè)毒腺。此法雖然簡(jiǎn)便、快在電子秤上放置數(shù)根大頭針，然后電子秤歸零；用速、采毒量大，但只能采毒1次，造成浪費(fèi)；人工刺蝎毒提取儀刺激蝎子，用大頭針刮取毒液放進(jìn)食激法雖然克服了剪尾法的缺點(diǎn)，可以反復(fù)進(jìn)行刺鹽水中，讀數(shù)。激，讓蝎子不斷產(chǎn)毒、排毒，也不損害蝎體的完整1．3．2標(biāo)準(zhǔn)曲線制備分別吸取氯化按溶液性，但工效低，安全性小，適于小規(guī)模養(yǎng)蝎；電刺激(80．0mg·L)0．0，0．2，0．4，0．6，0．8，1．0，1．2，1．

4、4mL置于25mL容量瓶中，先后加20mL聚乙法是在總結(jié)上述兩種取毒方法的優(yōu)缺點(diǎn)的基礎(chǔ)二醇(0．1g·L)和1．0mL奈氏試劑，再用聚上，運(yùn)用現(xiàn)代電子技術(shù)生產(chǎn)的一種既快速，又有較乙二醇稀釋至25mL，搖勻。在460nm波長(zhǎng)處測(cè)高采毒量的，且不影響取毒后全蝎加工的新的技定吸光度，不同體積的氯化按溶液分別測(cè)五次吸術(shù)生產(chǎn)的提取儀J。但目前市場(chǎng)上的提取儀主光度，取平均值。要應(yīng)用電生理儀進(jìn)行改造而成，成本高，價(jià)格較貴。我們實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)研究、探索研制了一套操作2結(jié)果簡(jiǎn)便，提毒效率高，成本較低的提取儀。用自制蝎2．1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制毒提取儀提取蝎毒，以蝎毒蛋白的含量為指標(biāo)，用2．1．1實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)因氯化銨中含有

5、氮元素，蛋白紫外分光光度法測(cè)定其含量，將測(cè)量出的結(jié)果與質(zhì)中氮元素含量穩(wěn)定，故氯化銨溶液吸光度可作傳統(tǒng)的凱氏定氮法測(cè)出的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，以檢測(cè)為蛋白質(zhì)溶液吸光度對(duì)照。參考相關(guān)文獻(xiàn)標(biāo)提取儀的提毒功效。準(zhǔn)氯化銨溶液0．0，0．2，0．4，0．6，0．8，1．0，1．2，收稿日期：2013—1O-22修回日期：2013一l1—2O基金項(xiàng)目：西安市科技計(jì)劃項(xiàng)目一西安文理學(xué)院科研創(chuàng)新基金專項(xiàng)項(xiàng)目(CXY1134WL22)。第一作者簡(jiǎn)介：何鳳琴(1968一)，女，西安人，西安文理學(xué)院生物技術(shù)學(xué)院副教授，主要從事動(dòng)物養(yǎng)殖技術(shù)研究。陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)2014年第60卷第2期1．4mL會(huì)相當(dāng)于含蛋白質(zhì)0．0，0．1，

6、0．2，0．3，0．4，0．5，0．6，0．7mg，故得出表2。00OOOO表1分光光度法測(cè)氯化銨標(biāo)準(zhǔn)溶液65432l(m0L)2．1．2回歸分析蛋白含量(mg)為橫座標(biāo)(蛋表4分光光度法測(cè)蝎毒吸光度白含量測(cè)定由一下公式計(jì)算)，吸光光度值(A)為縱座標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并進(jìn)行回歸分析?！は盗?一線性(系歹91)2．3．2蝎毒蛋白計(jì)算帶入線性方程圖1蝎毒標(biāo)準(zhǔn)溶液回歸圖y=0．7776x+0．0043得出：得出線性方程為：一只蝎子蛋白量X=0．0721Y：0．7776x+0．0043r=0．9880兩只蝎子蛋白量X，=0．1874式中：y——吸光度值三只蝎子蛋白量X=0．2735x——蝎毒蛋白質(zhì)

7、量蝎毒提取液中蛋白質(zhì)所占百分比，代入公式W=X／G×100％r——相關(guān)系數(shù)式中：w——蝎毒提取液中蛋白質(zhì)所占百分比；2．2測(cè)定蝎毒排毒量x㈤——測(cè)出蝎毒蛋白質(zhì)量；每只蝎子取毒平均質(zhì)量(表3)：(0．9+2．1+G——蝎毒提取液質(zhì)量。2．9+4．3+5．2)÷(1+2+3+4+5)≈1．03mg得出：W=8．011％表3蝎毒質(zhì)量W2=8．923％W3=9．431％三者結(jié)果進(jìn)行對(duì)比發(fā)現(xiàn)極為接近，求其平均數(shù)W=8．788％3討