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《高良姜葉枯病病原菌的分離和鑒定-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，JournalofAnhuiAS6．Sci．2014，42(16)：5031—5032責(zé)任編輯李占東責(zé)任校對李巖高良姜葉枯病病原菌的分離和鑒定陳旭玉，甘炳春，馮錦東(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院＆北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，藥用植物研究所海南分所，海南省南藥資源保護(hù)與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室海南萬寧571533)摘要[目的]明確高良姜葉枯病病原茵。[方法]病原菌從高良姜感病組織上分離并依據(jù)柯赫氏法則進(jìn)行致病性測定，病原菌的鑒定主要通過形態(tài)鑒定和ITS序列分析。[結(jié)果]高良姜葉枯病病原茵確定為可可毛色二孢(Lasiodiplodiatheobromae)，屬子囊菌門(Ascomy—cota)，
2、座囊菌綱(Dothideomycetes)，葡萄座腔菌目(Botryosphaeriales)，葡萄座腔菌科(Botryosphaeriaceae)，毛色二孢屬(Lasiodiplodia)。[結(jié)論]首次報(bào)道高良姜葉枯病病原茵為可可毛色二孢。關(guān)鍵詞高良姜；葉斑病；可可毛色二孢中圖分類號S573文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號0517—6611(2014)16—05031一【)2IsolationandIdentificationofthePathogenofLeafBlightofAl~niaofficinarunHanceCHENXu-yu，F(xiàn)ENGJin-dongetal(Ha
3、inanProvincialKeyLaboratoryofResourcesConservationandDevelopmentofSouthernMedi-cine，HainanBranchInstituteofMedicinalPlant，ChineseAcademyofMedicalSciences＆PekingUnionMedicalCollege，Wanning，Hainan571533)Abstract[Objective]InordertoidentifythepathogencausingtheA．officinarunleafblightdisease
4、．[Method]ThepathogenwasisolatedandpurifiedfromtheinfectedA．officinarunaccordingtokochRule，anditspathogenicitytothehostwastested．ThepathogenwasidentifiedaccordingtoitscharactersandrDNAITSsequencesanalysis．[Result]ThepathogenwasidentifiedasLasiodiplodiatheobromae，belongedtoAscomycota，Dothi
5、deomyeetes，Botryosphaeriales，Botryosphaeriaeeae，Lasiodiplodia．【Conclusion]FirstreposedleafblightdiseaseonA．officinarunisL．theobromae．KeywordsAlpiniaoficinarun：IJeafblightdisease：Lasiodiplodiatheobromae高良姜(AlpiniaofficinarumHance)屬姜科山姜屬多年供測定。生草本植物，以根莖人藥，是一種常見的南藥?。其性熱、1．2．2病原菌致病性測定。將菌株的菌絲塊
6、分別接種于健味辛，具有溫中、散寒、理氣、止痛的功效。高良姜主產(chǎn)于康無病的葉片，采用刺傷的接種方法，接種后保濕。以接種廣東、廣西、福建、臺(tái)灣、海南、云南等地，在海南陵水、萬寧、無菌的瓊脂塊作為對照，逐日觀察并記錄其發(fā)病情況。儋州等都有栽培J。海南種植的幾塊高良姜基地都發(fā)現(xiàn)1．2．3病原菌形態(tài)學(xué)觀察。將柯赫法則驗(yàn)證后的菌株在葉枯病，嚴(yán)重影響了高良姜的發(fā)展。發(fā)病的葉片多從葉尖PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)30d，觀察菌落的顏色和形狀，用顯微鏡葉緣開始發(fā)病，病斑近圓形或不規(guī)則形，灰褐色，干斑病斑觀察分生孢子梗、分生孢子的形態(tài)。黃褐色，中央有灰白色，病健交界處有明顯的黃色暈圈和較1．2．4病
7、原菌分子鑒定。使用TIANGEN生化科技有限公寬的褐色分界線。嚴(yán)重者整個(gè)葉片變黃干枯(圖1)。目前司植物基因組試劑盒(DP320-02)進(jìn)行真菌DNA提取，具體國內(nèi)外尚未見對高良姜葉枯病的研究，為了明確葉枯病的步驟參照其說明書。以真菌DNA為模板，ITS1／ITS4為引物病原菌和有效控制葉枯病的蔓延，筆者對高良姜葉枯病病進(jìn)行PCR擴(kuò)增。其序列為：ITS1：5TCCGTAGGTGAACCT—原菌進(jìn)行研究，旨在為高良姜葉枯病的防治提供理論依據(jù)。GCGG一3；ITS4：5TCCTCCGCTFATI"GATATGC一3。擴(kuò)增反1材料與方法應(yīng)體系為
