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1、大花蕙蘭莖尖及莖節(jié)組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)研究1.項(xiàng)目背景2.1該植物的生物學(xué)知識、特性。大花蕙蘭又叫虎頭蘭、喜姆比蘭和蟬蘭。蘭科、蘭屬植物。原產(chǎn)于印度、緬甸、泰國、越南和中國南部等地區(qū)的蘭屬(Cymbidium)中的一些附生性較強(qiáng)的大花種和主要以這些原種為親本獲得的人工雜交種。大花蕙蘭，是對蘭屬中通過人工雜交培育出的、色澤艷麗、花朵碩大的品種的一個(gè)統(tǒng)稱。蘭屬植物約48種，目前用來作雜交親本的原生種冇近20種,主耍是大花的附生類以及少量的地生類。常綠多年生附生草本，假鱗莖粗壯，屬合軸性蘭花。假鱗莖上通常冇12?14節(jié)(不同品種冇差異)，
2、每個(gè)節(jié)上均有隱芽。芽的大小因節(jié)位而異，1?4節(jié)的芽較大，第4節(jié)以上的芽比較小，質(zhì)量差。隱芽依據(jù)植株年齡和環(huán)境條件不同可以形成花芽或葉芽。葉片2列，長披針形，葉片長度、寬度不同品種差異很大。葉色受光照強(qiáng)弱影響很大，可由黃綠色至深綠色。大花蕙蘭的根系發(fā)達(dá)，根多為圓柱狀，肉質(zhì)，粗壯肥大。大都呈灰白色，無主根與側(cè)根之分，前端冇明顯的根冠。內(nèi)部結(jié)構(gòu)為典型的單子葉植物構(gòu)造，其皮層較為發(fā)達(dá)，有防止根系干燥的功能。大花蕙蘭花序較長，小花數(shù)一般大于10朵，品種之間有較大差異。花被片6,外輪3枚為萼片，花瓣?duì)睢?nèi)輪為花瓣，下方的花瓣特化為唇瓣。大花蕙蘭
3、果實(shí)為萌果，其形狀、大小等常因親本或原生種不同而冇較大的差異。其種子十分細(xì)小，種子內(nèi)的胚通常發(fā)育不完全，且兒乎無胚乳，在自然條件下很難萌發(fā)。其中綠色品種多帶香味?；ù笮?直徑6厘米?10厘米，花色冇白、黃、綠、紫紅或帶冇紫褐色斑紋。1.2該植物的經(jīng)濟(jì)價(jià)值、生產(chǎn)現(xiàn)狀與市場前景經(jīng)濟(jì)價(jià)值：大花蕙蘭植株挺拔，花莖直立或下垂，花大色艷，主要用作盆栽觀賞。適用于室內(nèi)花架、陽臺、窗臺擺放，更顯典雅豪華，有較高品位和韻味。如多株組合成大型盆栽，適合賓館、商廈、車站和空港廳堂布置，氣派非凡，惹人注目。大花蕙蘭以其植姿雄偉，花朵碩大而為人們所喜愛。生產(chǎn)
4、現(xiàn)狀:由于大花蕙蘭常被稱為“綠色股票”，于是就有人像炒股票一樣瘋狂地炒大花蕙蘭，致使許多人上山掠奪性地挖掘野生蘭花，從而使國蘭野生資源遭受嚴(yán)重破壞，幾近瀕危大花蕙蘭的繁殖傳統(tǒng)上釆用分株方法，一株一年只能繁殖0?8-1.25株，繁殖系數(shù)很低即使采用非傳統(tǒng)栽培技藝，施用新的藥劑和肥料，打破了“株不離母”栽培傳統(tǒng)，也只能將繁殖系數(shù)提高到3倍。因此，運(yùn)用現(xiàn)代的組織培養(yǎng)等技術(shù)手段，進(jìn)行大規(guī)?？焖俜庇蠡ㄞヌm種苗的研究，對保護(hù)我國蘭花資源以及大花蕙蘭產(chǎn)業(yè)化發(fā)展具有十分重耍的意義。市場前景:在近兩年的元旦春節(jié)市場上大花蕙蘭極為旺銷。其售價(jià)在150
5、-280元/盆。但多為一些花卉公司以整盆的方式從韓國、臺灣、日本和荷蘭進(jìn)口在國內(nèi)銷售的，關(guān)稅及運(yùn)輸?shù)馁M(fèi)用極大，售價(jià)十分昂貴，很難使這些美麗的蘭花進(jìn)入普通市民家庭。如果大花蕙蘭能在國內(nèi)大量繁殖并大量生產(chǎn)，其售價(jià)完全可被普通消費(fèi)者接受。故在國內(nèi)進(jìn)行大花蕙蘭的組培快繁和大花蕙蘭栽培生產(chǎn)冇極大的發(fā)展前景。1.3該植物生產(chǎn)中存在的主要問題和解決途徑存在的問題：（1）天然資源遭到破環(huán)，原有山上可采珍稀品種越來越少（2）大花蕙蘭多為雜交品種，種子繁殖無法保持其品種特性，且結(jié)實(shí)率也相對較低。（3）傳統(tǒng)栽培靠分株繁殖，因而周期長，繁殖系數(shù)低，繁殖速度
6、慢，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足商品化生產(chǎn)的要求。解決途徑：用組織培養(yǎng)的方法快速繁殖，包括以下三種：（1）莖尖及莖節(jié)段作為外植體。（2）根作為外植體。（3）其它材料作為外植體，如葉片等。1.4針對存在問題提出本項(xiàng)目的研究必要性因傳統(tǒng)的培養(yǎng)技術(shù)繁殖效率低，不能滿足市場需求。通過組織培養(yǎng),快速培養(yǎng)出所需種苗，減少繁殖吋間。1.本項(xiàng)冃的主耍內(nèi)容和需耍解決的關(guān)鍵問題2.1主要研究的內(nèi)容用莖尖及莖節(jié)段作為外植體，用組織培養(yǎng)的方法，快速繁殖。2.2前人在該領(lǐng)域內(nèi)己經(jīng)取得研究成就和最新進(jìn)展學(xué)者們對莖尖及側(cè)芽的取材時(shí)間、最適取材部位及大小進(jìn)行了深入的研究，一般認(rèn)為
7、帶2個(gè)葉原基的莖圓錐體成活率最高，屮間部位側(cè)芽的成活率及生長率也較高。雖然頂芽和側(cè)芽是極好的外植體，但芽的來源冇限。據(jù)殷麗青報(bào)道莖尖誘導(dǎo)芽的效果優(yōu)于莖節(jié)段，誘導(dǎo)率為71.4%,而莖節(jié)段的誘導(dǎo)率為57.1%02.3項(xiàng)冃的關(guān)鍵技術(shù)或難點(diǎn)通過配置不同的培養(yǎng)基和不同條件處理外植體，將成苗開花率從50提高到80%,增加花朵數(shù)，增大花冠直徑。2.4研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案（1）外植體的選擇取莖尖及莖節(jié)段作為外植體（2）選擇適宜的培養(yǎng)基目前蘭花無菌培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基冇KnudsonC>Vacin&Went>Kyoto>Reinent&Mo
8、nr>Lindeman>MS以及美國Hydroponic公司出品的Hyponex培養(yǎng)基等，據(jù)李杰報(bào)道，不同培養(yǎng)基種類不足以對種子萌發(fā)產(chǎn)生實(shí)質(zhì)性的影響。但以Hyponex培養(yǎng)基操作簡單且為節(jié)儉.（3）選擇適宜的取材時(shí)間由于蘭花酚類物質(zhì)含
