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《A 型肉毒毒素 ELISA 鑒別試驗方法的建立.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、微生物學免疫學進展２０１５年８月第４３卷第４期ＰｒｏｇｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌＩｍｍｕｎｏｌ，Ａｕｇ．２０１５，Ｖｏｌ．４３Ｎｏ．４·３１··論著·Ａ型肉毒毒素ＥＬＩＳＡ鑒別試驗方法的建立１１２１２１２蕭在瀾，王媛，顧磊，楊雨生，趙建榮，徐永浩，張華捷１．蘭州生物制品研究所有限責任公司甘肅省疫苗工程技術研究中心，甘肅蘭州７３００４６；２．中國食品藥品檢定研究院，北京１０００５０摘要：目的建立鑒定Ａ型肉毒毒素的ＥＬＩＳＡ鑒別試驗方法以替代傳統(tǒng)的動物試驗法。方法采用現(xiàn)代免疫學技術，制備馬源性和兔源性抗Ａ型肉毒毒素多克隆抗體，建立了雙抗體夾心ＥＬＩＳＡ，
2、并就此初步進行方法學驗證。結果所建立的ＥＬＩＳＡ具有良好的特異性、靈敏度、精密度和耐用性，具有替代動物試驗方法的良好前景。結論在進一步驗證和確認之后，該方法有望正式成為可用于鑒定Ａ型肉毒毒素的試驗方法以替代動物試驗法。關鍵詞：注射用Ａ型肉毒毒素；鑒別試驗；酶聯(lián)免疫吸附分析；替代；動物試驗法＋中圖分類號：Ｒ３７８．８３文獻標志碼：Ａ文章編號：１００５-５６７３（２０１５）０４-００３１-０３DOI：１０．１３３０９／ｊ．ｃｎｋｉ．ｐｍｉ．２０１５．０４．００５EstablishmentofanELISAidentificationforbotuli
3、numtoxintypeA倡ＸＩＡＯＺａｉ-ｌａｎ，ＷＡＮＧＹｕａｎ，ＧＵＬｅｉ，ＹＡＮＧＹｕ-ｓｈｅｎｇ，ＺＨＡＯＪｉａｎ-ｒｕｎ，ＸＵＹｏｎｇ-ｈａｏ，ＺＨＡＮＧＨｕａ-ｊｉｅ倡LanzhouInstituteofBiologicalProductsCo．，Ltd．，CenterforGansuProvincialVaccineEngineeringResearch，Lanzhou730046，GansuProvince，ChinaCorrespondingauthor：ZHANGHua-jie，E-mail：zhjhz1979＠163．co
4、mAbstract：ObjectiveＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎｅｗｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｂｏｔｕｌｉｎｕｍｔｏｘｉｎｔｙｐｅＡ（ｂｏｔＡ）ｔｏｒｅｐｌａｃｅｔｈｅｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｉｍａｌｔｅｓｔ．MethodsＡｄｏｕｂｌｅａｎｔｉｂｏｄｙｓａｎｄｗｉｃｈＥＬＩＳＡｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｍｏｄｅｒｎｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｔｅｃｈｎｏｌｏ-ｇｙ，ｂｙｕｓｉｎｇｐｒｅｐａｒｅｄｔｗｏｋｉｎｄｓｏｆａｎｔｉ-ｂｏｔＡｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｅｑｕｉｎ
5、ｅａｎｄｒａｂｂｉｔｏｒｉｇｉｎ，ａｎｄａｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｔｅｓｔｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎＥＬＩＳＡｃｏｕｌｄｂｅａｐｏｔｅｎｔｉａｌａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｉｎｒｅ-ｐｌａｃｅｍｅｎｔｏｆａｎｉｍａｌｔｅｓｔ，ｉｔｉｓｏｆｇｏｏｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ｐｒｅｃｉｓｉｏｎａｎｄｒｏｂｕｓｔｎｅｓｓ．ConclusionＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｍｅｔｈｏｄｗｉｌｌｂｅｅｘｐｅｃｔｅｄｔｏｂｅａｐｐｒｏｖｅｄｆ
6、ｏｒｔｈｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｔｅｓｔｏｆｂｏｔｕｌｉｎｕｍｔｏｘｉｎｔｙｐｅＡａｓｔｈｅｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｉｍａｌｔｅｓｔｂｙａｆｕｒｔｈｅｒｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｖａｌｉｄａｔｉｏｎ．Keywords：ＢｏｔｕｌｉｎｕｍｔｏｘｉｎｔｙｐｅＡｆｏｒｉｎｊｅｃｔｉｏｎ；Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｔｅｓｔ；ＥＬＩＳＡ；Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ；Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｉｍａｌｔｅｓｔ注射用Ａ型肉毒毒素是一種以Ａ型肉毒毒素實驗動物，已不符合當前對實驗動物“３Ｒ”原則的要為有效成分的注射
7、劑，主要用于治療和緩解肌肉痙求。英國動物學家Ｗｉｌｌｉａｍ和Ｒｅｘ曾于１９５９年提出攣性疾病，如眼瞼痙攣、斜視等，也可用于除皺等醫(yī)“３Ｒ”原則，即對于動物試驗的替代（Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）、［３］學美容領域。由于肉毒毒素有Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、減少（Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ）和優(yōu)化（Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ）的原則。隨［１］Ｈ８種血清型，因此在對注射用Ａ型肉毒毒素的著社會經濟的發(fā)展和人們對動物福利認識的不斷提質量控制中，鑒別試驗尤為重要。高，開發(fā)動物替代試驗方法以減少實驗動物的使用現(xiàn)行Ａ型肉毒毒素鑒別試驗采用動物中和試已成為當今實驗室檢測技術發(fā)展的
8、一大趨勢。在此［２］驗法，通過將待檢品與不同型別的肉毒抗毒素中背景下，研究擬通過建立可用于快速鑒別Ａ型肉毒和后注射小鼠，根據(jù)動物發(fā)病和死
