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1、·l54·中國中醫(yī)藥科技2014年3月第21卷第2期Mar．2014Vo1．21No．2華蟾素對荷瘤小鼠肝癌生長及HGF／c—Met信號通路的影響張永偉翟昌林魯廣(浙江蕭山醫(yī)院·杭州311201)摘要目的：觀察華蟾素對荷瘤小鼠肝癌生長的影響，并探討華蟾素對HGF／e～Met信號通路的影響。方法：利用小鼠肝癌細胞實體瘤模型，設(shè)立3個處理組，即荷瘤模型組、5一Fu組和華蟾素組。分別在不同時間切除腫瘤，計量腫瘤的體積，進而觀察華蟾素對小鼠腫瘤生長的影響。采用3種不同的處理方法分別處理肝癌細胞，通過Westernblot檢測細胞中HGF和e
2、—Met蛋白的表達情況；ELISA檢測荷瘤小鼠血清中HGF表達。結(jié)果：5一Fu組和華蟾素組小鼠腫瘤生長緩慢，腫瘤體積均明顯低于荷瘤模型組(P<0．05)；5一Fu和華蟾素處理的肝癌細胞HGF和e—Met蛋白表達水平均明顯降低(P<0．05)；與荷瘤模型組比較，5一Fu組和華蟾素組小鼠血清HGF的表達水平分別降低75％和65％(P<0．05)。結(jié)論：華蟾素可以抑制HGWc—Met通路蛋白的表達，抑制荷瘤小鼠肝癌的生長。關(guān)鍵詞華蟾素肝癌HGF／C—Met信號通路小鼠EfectsofCinobufotalinonTumorGrowthof
3、Hepatocarcinoma——bearingMiceandHGF／c——MetSignalingPathwayZHANGYong—wei，ZHAIChang—lin，LUGuang(XiaoshanHospitalinZhejiangProvince，Hangzhou311201)ABSTRACTObjective：ToinvestigatetherolesofCinobufotalinonthetumorgrowthofhepatocarcinoma—bearingmice，andexploretheeffectofCinob
4、ufotalinonHGF／c—Metsignalingpathway．Methods：Themicewithhepatocareinomaweredevidedintothreegroups，thetumormodelgroup，5一FutreatedgroupandCinobu—fotalintreatedgroup．Themiceweresaefifiedindifferenttimepointsaftertreatment，andtumorvolumewasmeasured．Thehepatocarcinomacellswe
5、recuhuredby3kindsofmethods，andWesternblotwasperformedtodetecttheproteinlevelsofHGFande—Met，theserumHGFexpressionWasdetenminedbyELISA．Results：Tocomparewithmodelgroup，tumorinmicewith5一FuandCinobufotalintreatmentgrowedslowly，andthetumorvolumesweresmaller(P<0．05)，theexpres
6、sionofHGFande—Metinhepatocarcinomcellsculturedwith5一FuandCinobufotalinwasloweredsignificantly。theexpressionofserumHGFin5一Fuandcinobufotalingroupsrespectivelydecreased75％and65％．Conclusion：CinobufotalincaninhibitHGFande—Metexpression，in—hibittumorgrowth．Keywords：cinobufo
7、talinlivercancerHGF／c—Metsignalingpathwaymice華蟾素(einobufotalin)為蟾蜍科動物中華大蟾蜍或黑眶1．1材料荷瘤小鼠肝癌模型：肝癌移植瘤小鼠由浙江大蟾蜍等的全皮提取制劑，是我國自行研制的二類新藥，已列學提供，8周齡，體重20克左右，雌雄兼用。為國家級中藥保護品種并已廣泛應(yīng)用于臨床。在淋巴瘤和華蟾素口服液：安徽金蟾生化股份有限公司，批號：宮頸癌細胞中，華蟾素具有促進細胞凋亡作用J。另外，華02050；5一氟尿嘧啶注射液(5一Fu)：上海旭東海普藥業(yè)有蟾索可能通過抑制核糖核苷酸還原
8、酶亞基M2(RRM2)的表限公司，批號：980412。達而抑制子宮內(nèi)膜癌移植瘤的生長；然而，關(guān)于華蟾素對肝癌細胞(HepG)：由浙江大學提供，細胞培養(yǎng)液為含荷瘤小鼠肝癌的生長影響及其作用機制的報道甚少。本研有10％血清的MEMct，購
