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《奶牛乳汁中白細胞介素-6與體細胞凋亡的相關性分析.pdf》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、動物醫(yī)學進展。2014,35(10):61-65ProgressinVeterinaryMedicine奶牛乳汁中白細胞介素一6與體細胞凋亡的相關性分析智宇,丁玉林,吳建美,畢艷楠,王一,王鳳龍(內蒙古農業(yè)大學獸醫(yī)學院,農業(yè)部動物疾病臨床診療技術重點實驗室,內蒙古呼和浩特O10018)摘要:為了解奶牛乳腺炎病例乳汁中白細胞介素一6(IL一6)與體細胞凋亡的相關性,探討了患有不同程度乳腺炎的奶牛乳汁中IL一6水平變化,并研究了IL一6與乳汁體細胞凋亡的相關性。利用無菌消毒法對某奶牛飼養(yǎng)場的82頭奶
2、牛采集乳樣,采用放射免疫分析法測定乳清IL一6,應用流式細胞儀檢測乳汁體細胞凋亡率。結果表明,隱性乳腺炎乳汁中IL一6水平極顯著高于無乳腺炎乳汁中IL一6水平(P<0.O1),臨床乳腺炎乳汁中IL一6水平極顯著高于無乳腺炎乳汁和隱性乳腺炎乳汁中IL一6水平(P<0.01);奶牛乳腺炎病例乳汁中IL-6水平與上皮細胞、巨噬細胞、淋巴細胞和中性粒細胞凋亡呈明顯負相關(P<0.01),其中IL-6與中性粒細胞的相關系數(shù)接近1或達到1,二者的相關性最明顯,IL一6對中性粒細胞凋亡抑制最明顯。奶牛乳汁中I
3、L一6水平與奶牛乳腺炎的發(fā)病程度密切相關,IL一6不同程度的抑制牛乳汁中體細胞的凋亡過程,IL一6對中性粒細胞的凋亡過程的明顯抑制與奶牛乳腺炎有重要關系。關鍵詞:奶牛;乳腺炎;白細胞介素一6;體細胞;凋亡中圖分類號:$852.33文獻標識碼:A文章編號:1007—5038(2014)10—0061—05乳腺分泌物中的細胞成分主要有淋巴細胞、中顯著抑制中性粒細胞的自然凋亡。YonishRouach性粒細胞、巨噬細胞和上皮細胞,這些細胞統(tǒng)稱為體E等[8]發(fā)現(xiàn)IL一6可抑制野生型P53表達和P53誘細
4、胞[1]。當動物發(fā)生乳腺炎時,乳汁中體細胞總數(shù)導的骨髓白血病細胞的APO;近年來,許多學者對急劇上升_2]。一般認為,牛處于健康狀態(tài)時,體細胞不同細胞因子誘導或抑制不同細胞凋亡的作用做了數(shù)低于2O萬個/mL;當?;加须[性乳房炎時,乳汁大量研究,然而,關于奶牛乳腺炎乳汁中IL一6水平體細胞數(shù)介于2O萬個/mL~50萬個/mL;而大于與乳汁中體細胞凋亡相關性的研究報道較少見。50萬個/mL時,牛可能患有臨床乳房炎]。1材料與方法奶牛乳腺炎是奶牛養(yǎng)殖業(yè)中發(fā)病率很高的一種1.1材料疾病,多年來一直給奶牛
5、業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失,乳1.1.1乳汁樣品奶牛乳汁,采于呼和浩特某奶牛腺炎發(fā)病受多種因素影響,而病原微生物的感染是飼養(yǎng)場。將采集的82例牛乳汁樣品分為3組:無乳主要原因,機體被病原微生物感染后,釋放細胞因腺炎組(乳汁體細胞在2O×10/mL以下,乳腺無病子,同時參與機體的免疫反應,對局部的炎癥反應有變,乳汁未分離到細菌)27例;隱性乳腺炎組(乳汁體重要的調節(jié)作用。細胞凋亡是在生理或病理情況下細胞在2O×10/mL~50×10/mL,乳汁分離到細菌)細胞由基因控制的自主性死亡過程,不同的細胞因31
6、例;臨床型乳腺炎組(乳汁體細胞在5O×1O子對于不同的細胞具有不同的作用,可表現(xiàn)為誘導細胞凋亡或抑制細胞凋亡。細胞因子與細胞凋亡相個/mL以上,且有乳腺炎臨床癥狀,乳汁分離到細菌)關性研究在奶牛乳腺炎的診斷、預防和治療乳腺炎24例。中有至關重要的作用。1.1.2主要試劑和儀器碘[I]白細胞介素一6放已有研究發(fā)現(xiàn),在奶牛乳腺炎模型中,乳腺組織射免疫分析藥盒,北京普爾偉業(yè)生物科技有限公司和乳汁中可檢測到細胞凋亡因子水平升高[4]。IL一6產(chǎn)品;細胞凋亡與壞死檢測試劑盒(CLO56),碧云天的含量與奶
7、牛乳腺炎的炎癥程度密切相關,隨著乳生物技術研究所產(chǎn)品;離心機(3-30K),Sigma公司腺炎程度的加劇,乳中IL一6含量是顯著增加的[5]。產(chǎn)品;生物安全柜(AC2—4S1),ESCO公司產(chǎn)品;流式OttonelloL等與FanningNF等[]發(fā)現(xiàn)IL一6可細胞儀(Epics—profileⅡ),BeckmanCoulter公司產(chǎn)收稿日期:2014—03—24基金項目:內蒙古自治區(qū)自然基金項目(2012MS0419)作者簡介:智宇(1987一),男,內蒙古鳥蘭察布人,碩士研究生,主要從事動物
8、傳染病與免疫病理學研究。*通訊作者62動物醫(yī)學進展2014年第35卷第1O期(總第256期)品;聚苯乙烯試管等。析,再用D檢驗進行組間比較。IL-6水平與體細胞凋1.2方法亡的相關性檢驗采用單因素直線相關分析進行處理。1.2.1牛乳汁體細胞的制備將采集的牛乳汁2結果1OmL置于的離心管中,加入EDTA使其終濃度為2.13個組牛乳汁樣品中IL一6水平比較0.5mmol/L(防止酪蛋白沉淀),在4℃條件下3個組之間先進行確實數(shù)據(jù)的方差分析,再用D1500r/min離心15min(離心后乳樣分3層,上