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《生殖支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白誘導胎盤滋養(yǎng)層細胞表達血紅素氧合酶1從而負調(diào)控細胞因子分泌.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、194ChinJCellMolImmuno1)2015，31(2·論著·文章編號：1007—8738(2015)02—0194—05生殖支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白誘導胎盤滋養(yǎng)層細胞表達血紅素氧合酶1從而負調(diào)控細胞因子分泌何璐一，游曉星，李國華。，曾焱華，李冉輝，朱翠明，余敏君，吳移(南華大學附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，南華大學醫(yī)學院病原生物學研究所，特殊病原體防控湖南省重點實驗室，南華大學心血管病研究所，湖南衡陽421001)[摘要]目的觀察生殖支原體脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白(LAMP)能否誘導胎盤滋養(yǎng)層細胞表達血紅素氧合酶1(HO一1)，從而影響細胞因子的產(chǎn)生。方法體外培
2、養(yǎng)胎盤滋養(yǎng)層細胞，用0．5—5mLLAMP作用4～12h。實時定量PCR和Westernblot法分別檢測HO一1mRNA和蛋白的表達以及核因子相關(guān)因子2(Nr￡2)的核轉(zhuǎn)位；2，7一二氯二氫熒光黃二乙酸酯(H：DCFDA)檢測活性氧(ROS)產(chǎn)生；采用N．乙酰半胱氨酸(NAC)或Nrf2siRNA處理滋養(yǎng)層細胞，觀察其對HO·1表達的影響。采用HO一1的激動劑鈷原卟啉(CoPP)，抑制劑鋅原卟啉(ZnPP)或HO一1siRNA處理細胞，ELISA檢測處理前后LAMP對誘導腫瘤壞死因子(TNF．oL)和白細胞介素1p(IL．1p)分泌的影響。結(jié)果LA
3、MP能誘導滋養(yǎng)層細胞HO·1mRNA和蛋白表達，并能誘導其產(chǎn)生ROS以及促進Nrf2核轉(zhuǎn)位。ROS抑制劑NAC預(yù)處理后，可明顯降低HO一1的表達水平以及細胞核內(nèi)Nd2含量。同時，Nrf2siRNA轉(zhuǎn)染后，HO．1表達顯著減少。采用ZnPP處理滋養(yǎng)層細胞，或RNA干擾HO一1表達后，可促進LAMP誘導滋養(yǎng)層細胞分泌TNF—ot和IL．1B，而CoPP處理能進一步降低TNF—ot和IL-1B水平。結(jié)論LAMP能通過ROS／Nrf2誘導滋養(yǎng)層細胞表達HO一1，從而抑制細胞因子的過度分泌。[關(guān)鍵詞]生殖支原體；脂質(zhì)相關(guān)膜蛋白；血紅素氧合酶-1；滋養(yǎng)層細胞【中
4、圖分類號]R518．9，R392-33，R711．32【文獻標志碼]AMycoplasmagenitalium·-derivedlipid--associatedmembraneproteinsnegativelyregulatecytokinesecretionbyinducingHO·1expressioninplacentaltrophoblastcellsHELu一，YOUXiaoxing，LIGuohua。，ZENGYanhua，LIRanhui，ZHUCuiming，YUMi~un，WUYimouDepartmentsofGynecolo
5、gyandObstetrics，F(xiàn)irstAffiliatedHospital，。InstituteofPathogenicBiologyMedicalCollege，HunanProvincial，KeyLaboratoryforSpecialPathogensPreventionandControl，InstituteofCardiovascularDisease，UniversityofSouthChina，Hengyang421001，ChinalAbstractJobjectlveToobservetheexpressionofhemeox
6、ygenase-1(HO一1)inregulationofcytokinesresponseinducedbyMycoplasma9enitalium-derivedlipid—associatedmembraneproteins(LAMPs)inplacentaltrophoblastcells．MethodsPlacentaltrophoblastcellswerecultured／nvitroandstimulatedby0．5—5．g／mLLAMPsfor4to12hours．ExpressionofHO-1mRNAandprotein，an
7、dnucleartranslocationofnuclearfactorerythroid-2relatedfactor2(Nrf2)weredetectedbyreal-timequantitativePCRandWesternblotting，respectively．Theintracelularformationofreactiveoxygenspecies(ROS)wasdetectedbythefluorescentprobeH2DCFDA．N-acetyl-cysteine(NAC)andnuclearfactorerythroid-2
8、relatedfactor2(Nrf2)siRNAwererespectivelyusedtoanalyze
