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《順鉑誘導(dǎo)的自噬在口腔鱗癌Tca83細胞中的作用-論文.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、566JournalofOralScienceResearch，Jun．2012，Vo1．28，No．6順鉑誘導(dǎo)的自噬在口腔鱗癌Tca83細胞中的作用白宇全海英張桐菲趙軒一張澤兵(吉林大學(xué)口腔醫(yī)院病理科吉林長春130021)[摘要]目的：探討順鉑誘導(dǎo)的自噬在口腔鱗癌Tca83細胞中的作用。方法：利用順鉑作用于口腔鱗癌Tca83細胞，不同時間后MTT法檢測細胞生存率的變化，激光共聚焦顯微鏡觀察細胞胞漿中自噬體的形成情況，AnnexinV—FITC流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率的變化。結(jié)果：順鉑作用于Tca83細胞2h即可出現(xiàn)明顯的自噬性變化。細胞凋亡率隨順鉑作用時間的延長而逐漸增加。結(jié)論：順鉑可
2、以誘導(dǎo)口腔鱗癌Tca83細胞發(fā)生自噬，過度激活的自噬作為細胞的一種死亡程序，可以與凋亡一起促進細胞死亡。[關(guān)鍵詞]自噬順鉑口腔鱗癌細胞細胞死亡凋亡[中圖分類號]R739．8[文獻標(biāo)識碼]A[文章編號]1671—7651(2012)o6一O566一O4TheRoleofAutophagyInducedbyCisplatininOralSquamousCellCarcinomaTca83CellLine．BAIYu，QUANHai—ying，ZHANGTong一，eta1．DepartmentofPathology，StomatologyHospital，JilinUniversity，Ch
3、ang—chun130021[Abstract]Objective：ToinvestigatetheroleofautophagyinducedbycisplatininoralsquamouscellcarcinomaTca83cellline．Methods：Beingtreatedwithcisplatinatdifferenttime，Tca83cellssurvivalratewasexaminedbytetrazoliumbromide(MTT)colorimetry．AutophagosomeformationwasdetectedbyLaserscanningconfoc
4、aImicro—scope．Apoptosisratewascheckedbyfloweytometry．Results：Intheearly(2h)，autophagywasevidentafterthecellsweretreatedwithCisplatin．Apoptosisrateincreasedwiththeextendtimeofcisplatintreatment．Conclusion：CisplatincaninduceautophagyinTca83cellline，andoverativationautophagyasadeathprocedurecanpromo
5、tecelldeath．[-Keywords]AutophagyCisplatinOralsquamouscellcarcinomacellsCelldeathApoptosis自噬是廣泛存在于真核細胞中的生命現(xiàn)象口]，取對數(shù)生長期細胞進行實驗。順鉑(DDP，齊魯制藥隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)自噬與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有限公司)用細胞培養(yǎng)液配置成100mg／I儲存液關(guān)系密切，除了具有維持腫瘤細胞代謝平衡和內(nèi)環(huán)一20℃保存，使用前稀釋成所需濃度。MAP—LC3境穩(wěn)定的作用，自噬還被稱為Ⅱ型程序性細胞死亡一Ⅱ多克隆抗體購自美國Santacruse公司，F(xiàn)ITC方式L2]。本實驗為了研究自噬與口腔鱗
6、癌發(fā)生、標(biāo)記的IgG和PI購自中杉金橋公司。發(fā)展的的關(guān)系，利用順鉑作用于口腔鱗癌Tca83細1．2細胞增殖活性檢測(MTT法)取對數(shù)生長胞誘導(dǎo)產(chǎn)生自噬現(xiàn)象，探討自噬在口腔鱗癌Tca83期的Tca83細胞，按每孔1×10個細胞接種于96細胞中的作用?？准毎囵B(yǎng)板，每孔加入200L細胞懸液，培養(yǎng)241材料與方法h后棄去上清液，每孔分別加入濃度為0．1、1、10、1．1細胞培養(yǎng)口腔鱗癌Tea83細胞(北京大學(xué)100rng／L的DDP溶液200L，每個濃度設(shè)3個復(fù)口腔醫(yī)院惠贈)在含10％小牛血清的RPMI一1640孔，對照組加入等量的培養(yǎng)液，置37℃，5CO。孵培養(yǎng)基(含100U／mL青霉素和1
7、00mg／L鏈霉素)箱中，分別培養(yǎng)6、12、24、48h后每孑L加入2OL中，在37℃，59／6CO的飽和濕度的孵箱中培養(yǎng)。MTT(5mg／L)溶液，培養(yǎng)4h。棄上清，每孔加入每2d換液傳代1次，使其保持對數(shù)生長狀態(tài)，150肚L二甲基亞砜(DMS0)，室溫下恒溫水浴箱內(nèi)振蕩10min，于酶標(biāo)儀檢測各孔在波長490nm處基金項目吉林省科技廳科技引導(dǎo)項目資助課題(編號：201105101)的A值，計算細胞生存率。細胞生存率一實驗組A作者
