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《花生葉片DNA快速提取方法的優(yōu)化.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、山東農(nóng)業(yè)科學(xué)2014，46(7)：11～14ShandongAgriculturalSciences花生葉片DNA快速提取方法的優(yōu)化王蕾，趙新濤，許夢琦，宿烽，任艷，李雙鈴，石延茂，袁美，王傳堂(1．青島科技大學(xué)化工學(xué)院，山東青島266042；2．山東省花生研究所／農(nóng)業(yè)部花生生物學(xué)與遺傳育種重點實驗室，山東青島266100)摘要：以花生幼葉為試材，對高通量DNA提取法、SDS簡易法、TPS法以及TENP法4種不同的DNA提取方法進行比較和優(yōu)化。結(jié)果表明，與其他3種改良方法比較，改良TPS法具有不需
2、液氮磨樣、提取速度快、試劑種類少、成本低、DNA溶解速度快、質(zhì)量較好的優(yōu)點，提取的DNA可用于花生SSR分析。關(guān)鍵詞：花生；基因組DNA；提取方法；幼葉中圖分類號：$565．201文獻(xiàn)標(biāo)識號：A文章編號：1001—4942(2014)07—0011—04OptimizationofRapidDNAExtractionMethodsfromPeanutLeavesWangLei，ZhaoXintao，XuMengqi，SuFeng，RenYah，LiShuangling，ShiYanmao，Yuan
3、Mei，WangChuantang(1．ChemicalEngineeringCollege，Qi~gaaoUniversityofScienceandTechnology，Qingdao266042，China；2．ShandongPeanutResearchInstitute~KeyLaboratoryofPeanutBiologyandC．enet~Improvement，MinistryofAgriculture，Qingdao266100，China)AbstractWiththeyou
4、ngleavesofpeanutasexperimentmaterial，fourdifferentDNAextractionmeth-ods，thehigh—throughputDNAextractionmethod，thesimpleSDSmethod，TPSmethodandTENPmethod，werecomparedandoptimized．Theresultsshowedthat，comparedwiththeotherimprovedmethods．theim—provedTPSme
5、thodhadtheadvantagesofgrindingsampleswithnoliquidnitrogen，fasterextractionrate，fo-werkindsofreagent，lowercost，rapiderDNAsolutionrateandbetterDNAquality．TheDNAextractedthroughimprovedTPSmethodcouldbeusedforSSRanalysisofpeanut．KeywordsPeanut(Arachishypo
6、gaeaL．)；GenomicDNA；Extractionmethod；YoungleavesDNA是遺傳信息的載體，DNA的提取是分子法。進行改進和創(chuàng)新，力求尋找一種DNA質(zhì)生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。植物總DNA的提取方法主量和純度相對較好、可用于SSR分析的快速簡便要有CTAB法[、高鹽低pH法．3J、SDS法等。的花生DNA提取方法，用于花生的遺傳多樣性分近年來，許多研究人員根據(jù)不同的植物和不同的析、遺傳圖譜構(gòu)建及分子標(biāo)記輔助選擇等研究。試驗要求對傳統(tǒng)的DNA提取方法進行改進和創(chuàng)1材料與方法新，取得
7、了較好的效果J，但這些方法存在步驟繁瑣、有機溶劑殘留導(dǎo)致污染以及對人體造成危1．1試驗材料害等缺點。以花生品種“四粒紅”的葉片為材料，由山東李慶云等研究發(fā)現(xiàn)，從花生不同部位提取省花生研究所提供。DNA時，葉片的DNA產(chǎn)率最高。本研究對花生、1．2DNA提取方法小麥、玉米等植物葉片的4種DNA提取方分別對高通量DNA提取法、SDS簡易收稿日期：2014—03—02基金項目：山東省博士基金(BS2011NY014)；留學(xué)人員科技活動擇優(yōu)資助項目(2011)；國家科技支撐計劃(2011BA35B04)；
8、“863”子課題(2013AA102602)作者簡介：主蕾(1987一)，女，碩士研究生，研究方向為細(xì)胞生物學(xué)。E—mail：271469015@qq．corn通訊作者：袁美(1972一)，女，研究員，主要從事花生生物技術(shù)育種研究。E—mail：yuanbeauty@126．coml2山東農(nóng)業(yè)科學(xué)第46卷法、TPS法以及TENP法m四種簡便的DNA入等體積預(yù)冷的無水乙醇，輕輕上下顛倒混勻，提取方法進行改良及優(yōu)化，方法如下。置一20℃冰箱中10rain，待析出沉淀，120001．2．
