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1、培養(yǎng)基母液配制培養(yǎng)基配制通常先根據各組分性質，配制成較濃的母液（母液濃度為培養(yǎng)基濃度的若干倍如50或100倍），貯存在冰箱中備用，以后配制培養(yǎng)基時根據用量量取。由于培養(yǎng)基成分較多，如果每配制一次即進行多次稱量（不少成分用量較微），不僅會造成較大的誤差，而且會增加工作量，因而配制母液可使培養(yǎng)基配制方便準確。配制大量成分母液通常為原培養(yǎng)基濃度的20、50或100倍，倍數(shù)不宜過高。MS培養(yǎng)基母液及培養(yǎng)基配方法參考表2。大量成分母液經常將CaCl2·2H2O單獨配制保存，以免長期貯存發(fā)生沉淀。若將全部大量成分配在一起時，為防止在混合時發(fā)生沉淀，須在各藥品充分溶解后，按表1.2中化合物出現(xiàn)順
2、序混合，氯化鈣最后加入，以免與硫酸鎂形成沉淀.大量成分稱量溶解后，在1000ml容量瓶中定容，然后移入磨口瓶中，貼上標簽，置于普通冰箱（4℃）貯存。微量元素母液配制時，由于培養(yǎng)基中微量元素用量甚微，濃度為0.l~0.0001mg/l，所以母液濃度宜為原培養(yǎng)基配方中用量的100倍。一般將微量元素分別稱量溶解，定容在1000ml容量瓶中后貯存在一個細口瓶中，但也有將KI分別配制，單獨貯存在棕色瓶中。配好后，貼上標簽，貯存于4℃冰箱。培養(yǎng)基中的鐵鹽母液一般單獨配制。目前常用的鐵鹽為硫酸亞鐵和乙二胺四乙酸二納的螯合物。稱取Na2-EDTA3.73g，F(xiàn)eSO4·2H2O2.78g，分別溶解
3、（可加熱），然后混合定溶于1000ml容量瓶中。轉入細口瓶，貼上標簽，4℃冰箱中保存。氨基酸和維生素等有機成分母液可配制時，母液濃度通常為原培養(yǎng)基配方的50倍（或100）。常用氨基酸和維生素為水溶性物質，可用蒸餾水溶解，但葉酸要先用少量稀堿或稀氨水溶解，然后用重蒸餾水定容。配制好后，轉入細口瓶，貼上標簽，-20℃（或4℃）冰箱中保存。?植物生長調節(jié)物質如生長素類和細胞分裂素類可以根據需要，靈活設計其濃度，一般為0.01、0.1、0.2、0.5或1mg/l。如配0.5mg/lNAA母液，稱25mgNAA溶于50ml重蒸餾水，或50mg的NAA定溶于100ml重蒸餾水中。IAA要用棕色
4、瓶暗中貯存，以免光照分解。常用植物生長調節(jié)物質和維生素特征見表3。生長素為醇溶性物質，配制時，應用少量95%酒精或稀堿溶解，然后用重蒸餾水溶解定容；細胞分裂素應先用少量1NNaOH或HCl溶解，然后用重蒸餾水定容。配制好的母液放置在4℃普通冰箱中備用。這些母液保存時間不宜過長，當出現(xiàn)沉淀、渾濁及霉菌團時，應重新配制。椰乳中因含有許多種細胞分裂素物質，如KT類似物（9-β-D-ribofuranosylzeatin）、玉米素及玉米素核糖甙等，有時可與細胞分裂素相互代替。采集到椰子時，應檢查其汁液（保證沒有變質），煮沸，濾紙過濾掉蛋白，高溫高壓消毒，貯存在-20℃下備用。有時可直接加入
5、培養(yǎng)基。酵母提取液也一般也現(xiàn)用現(xiàn)配，稱量酵母粉后，加熱至沸騰30分鐘，過濾去渣。?四、實驗步驟1、大量元素母液的配制各成分按照表1培養(yǎng)基濃度含量擴大10倍用天平稱取，用蒸餾水分別溶解，按順序逐步混合。后用蒸餾水定容到1000ml的容量瓶中，即為10倍的大量元素母液。到入細口瓶，貼好標簽保存于冰箱中。配制培養(yǎng)基時，每配1L培養(yǎng)基取此液100ml。表1?MS培養(yǎng)基大量元素母液制備?序號藥品名稱培養(yǎng)基濃度（mg/L）擴大10稱量(mg)1NH4NO31650165002KNO31900190003CaCl2·2H2O?44044004MgSO4·7H2O37037005KH2PO4170
6、1700?注意：(1)配制大量元素母液時，某些無機成分如Ca2+、SO42－、Mg2+和H2PO4一等在一起可能發(fā)生化學反應，產生沉淀物。為避免此現(xiàn)象發(fā)生，母液配制時要用純度高的重蒸餾水溶解，藥品采用等級較高的分析純，各種化學藥品必須先以少量重蒸餾水使其充分溶解后才能混合，混合時應注意先后順序。特別應將Ca2+、SO42一、Mg2十和H2PO4一等離子錯開混合，速度宜慢，邊攪拌邊混合。(2)CaCl2·2H2O要在最后單獨加入，在溶解CaCl2·2H2O時，蒸餾水需加熱沸騰，除去水中的CO2，以防沉淀。另外，CaCl2·2H2O放入沸水中易沸騰，操作時要防止其溢出。２、微量元素母液
7、的配制MS培養(yǎng)基的微量元素無機鹽由7種化合物（除Fe）組成。微量元素用量較少，特別是?CuSO4·5H2O、?CoCl2·6H2O?，因此在配制中分微量Ⅰ、Ⅱ配制。按照表2，表3配方，用電光天平稱量，其它同大量元素。配制培養(yǎng)基時，每配制1L培養(yǎng)基，取微量Ⅰ10ml，微量Ⅱ0.1ml。表2??MS培養(yǎng)基微量Ⅰ的配制?序號化合物名稱培養(yǎng)基濃度（mg/L）擴大100倍稱量(mg)1MnSO4·4H2O22.322302ZnSO4·7H2O8.68603H3BO36.2620
