伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基.doc

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1、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基—*、原理伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(eosirnmethylenebluemedium,簡稱EMBmedium),一-般用于檢測人腸桿菌。停吆「丸醪樣型feL美缺1/堿樣型feL半去腸桿菌分解k糖芳酸吋細(xì)菌帶糸電荷被染成紅色，再與美藍(lán)結(jié)合形成紫黑色菌落，并帶有綠色金屬光澤。而產(chǎn)氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。蛋白腺提供碳源和氮源；乳糖是大腸菌群可發(fā)酵的糖類；磷酸氫二鉀是緩沖劑；瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑；伊紅和美籃是抑菌劑和pH指示劑，可抑制G+,在酸性條件下產(chǎn)生沉淀，形成紫黑色菌落或具黑色屮心的外圍無色透明的菌落。二、鑒定方法%1制作伊紅美藍(lán)培

2、養(yǎng)基，趁熱注入培養(yǎng)皿屮，凝成平板，待用。%1用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水，按1：10稀釋。%1取0.1毫升稀釋液接種于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上。用平板劃線分離法進(jìn)行分離。%1將劃線后的培養(yǎng)皿倒置37°C溫箱中培養(yǎng)18?24小時。培養(yǎng)基屮會出現(xiàn)大腸桿菌菌落，菌落小心呈暗紫黑色，發(fā)金屬光澤。%1將菌落接種于斜面培養(yǎng)基上(由營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基制成)。三、配方蛋白腺log乳糖10g磷酸氫二鉀2g瓊脂15g蒸懈水1000ml2%伊紅水溶液20ml0.5%美藍(lán)水溶液13ml四、儲備培養(yǎng)基的制備先將瓊脂加至900ml蒸倔水，加熱溶解，然后加入磷酸氫二鉀及蛋白豚，

3、混勻使之溶解，再以蒸錨水補足至1000ml,調(diào)整PH為7.2?74。趁熱用脫脂棉或絨布過濾，再加入乳糖，混勻后定量分裝于燒瓶內(nèi)，置高床蒸汽滅菌器內(nèi)以115C滅菌20min,貯存于冷暗處備用。五、制法將蛋白豚、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸鐳水屮，校正PH,分裝于燒瓶內(nèi)，121°C高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂，冷至50?55°C,加入伊紅和美藍(lán)溶液，搖勻，傾注平板。