部分放射免疫藥盒

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1、部分放射免疫藥盒說(shuō)明書(shū)北京普爾偉業(yè)生物科技有限公司中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心135核準(zhǔn)日期:2001年12月28日修改日期:2006年12月12日碘[125I]血栓烷B2放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)【藥品名稱(chēng)】通用名稱(chēng)：碘[125I]血栓烷B2放射免疫分析藥盒英文名稱(chēng)：Iodine[125I]ThromboxaneB2RadioimmunoassayKit漢語(yǔ)拼音：Dian[125I]XueshuanwanB2FangshemianyifenxiYaohe【適應(yīng)癥】概述及臨床意義：血栓烷A2（TXA2）主要是由血小板微粒

2、體合成并釋放的一種強(qiáng)烈促進(jìn)血管收縮和血小板聚集的生物活性物質(zhì)。其生物半衰期約30分鐘，而迅速代謝為無(wú)活性的血栓烷B2（TXB2）。在正常生理狀態(tài)下血漿或組織中TXA2和PGI2平衡失調(diào)是造成血小板聚集，血管痙攣收縮或血栓形成的原因之一。因此，測(cè)定這兩種化合物在血漿、組織及其它體液中的濃度，在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)理論研究，臨床血栓形成病的發(fā)病預(yù)測(cè)，療效判斷具有十分重要的意義。測(cè)定原理：利用液相競(jìng)爭(zhēng)抑制原理，采用平衡法對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定。待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)與限量的抗血清及標(biāo)記抗原加在一起進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)，反應(yīng)完全后，加入免疫分離劑，分離出抗原

3、-抗體復(fù)合物，測(cè)定復(fù)合物的放射性（B），計(jì)算各標(biāo)準(zhǔn)管的結(jié)合率（B/B0﹪）。作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，查出樣品濃度?！境煞荨克幒薪M成及配制1、緩沖液A：1瓶（液體），10ml，搖勻后直接使用。2、緩沖液B：1瓶（藍(lán)色，液體），30ml，搖勻后直接使用。3、TXB2標(biāo)準(zhǔn)品：1支（白色，凍干粉）。臨用前加緩沖液Aml溶解（如不填寫(xiě)，加緩沖液A2ml溶液），濃度為800pg/ml，作為S7，另取試管6支編號(hào)S6–S1。各加緩沖液A1ml，從S7中取1ml加到S6，依次倍比稀釋至S1，濃度為12.5，25，50，100，200，400，80

4、0pg/ml。4、TXB2抗血清：1瓶（白色，凍干粉），用緩沖液Bml溶解，（如不填寫(xiě)，100T藥盒加緩沖液B10.5ml溶解，50T藥盒加緩沖液B5.5ml溶解）。5、125I-TXB2：1瓶（白色，凍干粉），用緩沖液Bml溶解，（如不填寫(xiě)，100T藥盒加緩沖液B10.5ml溶解，50T藥盒加緩沖液B5.5ml溶解）。6、PR分離劑：1瓶（液體），100T藥盒60ml，50T藥盒30ml，使用前充分混勻，直接使用。樣品收集1、血漿：取一次性5ml空針吸取消炎痛-EDTA.Na2液約0.2ml，快速靜脈穿刺取血3ml，即

5、刻在空針內(nèi)顛倒混勻，注入試管內(nèi)（可按比例增加或減少取血量），4℃離心3500rpm，15min，分離血漿，放-20℃保存。注：測(cè)定大鼠血漿時(shí)，最好做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定是否需要稀釋以及稀釋倍數(shù)。注:消炎痛-EDTA.Na2需用戶(hù)自備,如自備困難我公司可提供.100元/瓶/10ml.測(cè)定兔血漿時(shí)，應(yīng)進(jìn)行提取。取血漿0.5ml，加入1NHCL50μl，再加入2.5ml乙酸乙酯放玻璃管中充分混勻，離心15min，吸取上清放一青霉素瓶中，將所剩沉淀再用2.5ml乙酸乙酯離心一次，吸取上清置于同一瓶?jī)?nèi)，將瓶中液體吹干，放-20℃保存。使

6、用前加生理鹽水0.5ml復(fù)溶，混勻后即可作樣品使用。分析純乙酸乙脂需用戶(hù)自備。*2、組織：取新鮮活組織即刻置液氮中保存?；蚩焖俜Q(chēng)取一定重量（依組織不同可稱(chēng)取5～20mg）置微型勻漿器中，加無(wú)水乙醇0.1ml研磨，再加生理鹽水0.9ml充分研磨制成勻漿，4℃離心（3500rpm，15min）取上清，-20℃以下保存。測(cè)定前最好做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定樣品稀釋度。3、尿液：尿液收集12小時(shí)，晚7時(shí)排尿棄去，向容器內(nèi)加冰醋酸或甲苯4ml防腐，至次日早7時(shí)留取12小時(shí)內(nèi)尿液收集在瓶中，混勻，量總ml數(shù)，留5ml放-20℃以下保存。測(cè)定前調(diào)至

7、PH7.0。測(cè)定方法本實(shí)驗(yàn)采用平衡法，取聚苯乙烯試管編號(hào)，按下表操作：TXB2RIA加液程序（μl）TNSBS0S1–S7樣品緩沖液A–200200––緩沖液B–100–––標(biāo)準(zhǔn)液–––200–135待測(cè)樣品––––200抗血清––100100100125I-TXB2100100100100100充分混勻，放置4℃24hPR分離劑–500500500500充分混勻，室溫放置20min，4℃3500rpm離心25min，吸棄上清，測(cè)各管沉淀cpm數(shù)結(jié)果計(jì)算1、以B/T計(jì)算NSB、S0結(jié)合百分率，以B/BO計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)及待測(cè)樣品

8、結(jié)合百分率，在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并查出樣品值?；蛴勺詣?dòng)γ計(jì)數(shù)器預(yù)先編制程序，直接給出有關(guān)參數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品濃度。NSB％＝（NSB管的cpm數(shù)÷T管的cpm數(shù)）×100％Bo％＝（Bo管的cpm數(shù)－NSB管的cpm數(shù)）÷T管的cpm數(shù)×100％B／Bo％＝（標(biāo)準(zhǔn)或樣品管的cpm數(shù)－NSB管的cpm數(shù)）÷（