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《大豆活性肽的分離純化和生理活性-論文.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、2013年第04期吉林農(nóng)業(yè)NO．04．2013(總第301期)JILINAGRICULTURE(CumulativetyNO．301)大豆活性肽的分離純化和生理活性樊永華，許輝(永城職業(yè)學(xué)院，河南永城476600)摘要：文章對(duì)大豆肽的分離純化方法和生理活性作了簡(jiǎn)要地總結(jié)。大豆蛋白肽的分離純化方法有反相高效液相色譜(RP—HPLC)、離子交換色譜(IEC)、凝膠過濾色譜(GFC)等。大豆蛋白活性肽具有多種生理功能，如：降血壓、降低膽固醇、維持氮平衡、提高消化率、抗癌、抗氧化等。關(guān)鍵詞：大豆活性肽；分離純化；生理活性中圖分類號(hào)：TS214．2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1674—0432(201
2、3)一04—0280—2大豆蛋白肽是利用酶法或微生物發(fā)酵法將大豆蛋白降解成多分子大豆肽類物質(zhì)的分離和純化尤為重要。肽、短肽和氨基酸的混合物。大豆蛋白肽是一種重要的肽來源。反相高效液相色譜分離和純化大豆活性肽時(shí)多采用增加流動(dòng)大豆蛋白肽與蛋白質(zhì)相比較，多肽具有如下特點(diǎn)：在較寬的pH范相疏水性的線性梯度洗脫法和在窄梯度的條件下延長(zhǎng)洗脫時(shí)間的圍內(nèi)溶解度高，容易在體內(nèi)消化和吸收；滲透壓低，能夠避免高方法。在洗脫的初始階段，洗脫液中有機(jī)成分濃度較低，大豆肽滲透壓導(dǎo)致的腹瀉；不容易導(dǎo)致過敏。Rerat等研究表明，短肽的分子與固定相間的疏水作用較強(qiáng)，幾乎完全被固定相吸附。隨著特點(diǎn)是吸收速度快、消耗能量低
3、、載體不易飽和，不同肽之間運(yùn)洗脫的進(jìn)行，當(dāng)洗脫液中有機(jī)成分濃度增加到能夠使得大豆多肽轉(zhuǎn)沒有競(jìng)爭(zhēng)和抑制。與固定相間作用小于流動(dòng)相與固定相間的作用時(shí)，大豆活性肽分隨著生物技術(shù)與生命科學(xué)的不斷進(jìn)步與發(fā)展，大豆多肽的功子便可從固定相上洗脫下來。洗脫液成分的極微小改變對(duì)大豆肽能越來越多的被人們所發(fā)掘，而某些活性肽的結(jié)構(gòu)與生理功能也的保留行為具有較大的影響，因而對(duì)于疏水特征相近的小分子大逐漸被人們所認(rèn)識(shí)和了解，這對(duì)活性肽的研究起到了推動(dòng)作用，豆肽也能夠完全分離。更有利于人類對(duì)大豆活性肽進(jìn)行研究與開發(fā)。1．2離子交換色譜(IEC)法迄今為止，從大豆蛋白中已分離出降血壓肽、免疫調(diào)節(jié)肽、大豆活性肽的分離純
4、化方法之一就是離子交換色譜法。離子抗氧化肽、降膽固醇肽、抗血栓形成、促進(jìn)鈣磷及微量元素的吸交換色譜法是利用大豆多肽在一定pH值和離子強(qiáng)度條件下帶電荷收等多種純化的大豆蛋白生物活性肽，對(duì)這些大豆活性肽的研究的微弱差異，依靠靜電力與離子交換劑結(jié)合在一起時(shí)，進(jìn)入介質(zhì)情況進(jìn)行了綜述，以期為大豆活性肽的應(yīng)用提供參考。表面的可交換離子與帶相同電荷的蛋白質(zhì)分子就會(huì)發(fā)生交換的差1大豆蛋白活性肽的分離和純化異而分離。1．3凝膠過濾色譜(GFC)法目前，生產(chǎn)大豆活性肽的方法主要三種有：酶解法、微生物GFC也叫凝膠色譜分子篩法，是利用凝膠網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，根據(jù)分子發(fā)酵法和化學(xué)法，最為先進(jìn)的是微生物發(fā)酵法，它不僅能修飾
5、肽大小和形狀的不同進(jìn)行分離的一種方法。當(dāng)樣品進(jìn)入凝膠柱后，的苦味。還能將原料中的KTI和BBI等影響消化和口味的抗?fàn)I養(yǎng)因較大分子不能通過凝膠孔道進(jìn)入柱體內(nèi)，會(huì)先流出層析柱，而小子降解。分子則滲入凝膠柱體內(nèi)，后流出層析柱。凝膠過濾色譜法具有很大豆蛋白肽的活性易受到外界條件的影響，在過強(qiáng)的酸堿、多優(yōu)點(diǎn)，如分離條件溫和，產(chǎn)品得率高，生物活性好，分離面寬較高的溫度與劇烈震蕩等條件下都有可能失活。初始的肽液成分等。因此，凝膠過濾色譜被廣泛用于大豆多肽物質(zhì)的分離純化相對(duì)較復(fù)雜，目標(biāo)產(chǎn)物的濃度也比較低，一般低于5％，含有大量中。雜質(zhì)，某些雜質(zhì)的理化性質(zhì)和目標(biāo)產(chǎn)物有相似之處，這就提高了Ljevakovi
6、c等分離肽聚糖單體衍生物是通過凝膠過濾色譜大豆肽的分離純化的難度。傳統(tǒng)多肽分離工藝，如吸附沉淀、溶SephadexG25~lSP-SepadexC-25離子交換色譜來完成的。媒、萃取和離子交換法等步驟繁多，耗時(shí)，原料消耗量大，耗能1．4聯(lián)用技術(shù)高，得到的產(chǎn)品較少。生物技術(shù)的發(fā)展與人們對(duì)大豆肽結(jié)構(gòu)和功在大豆多肽物質(zhì)分離中，HPLc—cE聯(lián)用技術(shù)具有選擇性和靈能研究的不斷深入，大豆肽分離檢測(cè)技術(shù)也獲得了突飛猛進(jìn)的發(fā)敏度高、時(shí)間花費(fèi)短、操作簡(jiǎn)單，可用于梯度洗脫等具有獨(dú)特的展，出現(xiàn)了反相高效液相色譜法、凝膠過濾色譜法、毛細(xì)管電泳優(yōu)點(diǎn)，尤其適合大豆多肽的分離純化。法、膜分離法、各種技術(shù)手段的聯(lián)用等
7、許多高效的分離純化技術(shù)將高效液相色譜強(qiáng)的分離能力和質(zhì)譜的選擇性高、靈敏度高和手段。和提供相對(duì)分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)有機(jī)的結(jié)合起來的高效液1．1反相高效液相色譜(RP—HPLc)法相色譜一質(zhì)譜(HPLC-MS)聯(lián)用技術(shù)，為大豆活性肽組分的分離分反相高效液相色譜是一種色譜洗脫法，它以非極性的反相析提供基礎(chǔ)。Hoffmann用高效液相色譜一質(zhì)譜分離技術(shù)在3．5min介質(zhì)為固定相，流動(dòng)相是水溶液或甲醇、乙腈等極性有機(jī)溶劑。內(nèi)完成了多肽分離
