響應(yīng)曲面法優(yōu)化金絲桃素提取工藝的研究-論文.pdf

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1、江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)2014年第42卷第4期一221一薛曉麗，費(fèi)洋，楊麗娟．響應(yīng)曲面法優(yōu)化金絲桃素提取工藝的研究[J]．江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42(4)：221—223響應(yīng)曲面法優(yōu)化金絲桃素提取工藝的研究薛曉麗，費(fèi)洋，楊麗娟(1．長(zhǎng)白山動(dòng)植物利用與保護(hù)吉林省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林吉林132101；2．吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心，吉林吉林132101；3．吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院中藥學(xué)院，吉林吉林132101；4．吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院文理學(xué)院，吉林吉林132101)摘要：優(yōu)化從貫葉連翹粗提取物中提取金絲桃素的工藝條件。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)曲面法

2、，以金絲桃素的提取率為響應(yīng)值，通過(guò)回歸分析各工藝參數(shù)與響應(yīng)值之間的關(guān)系，預(yù)測(cè)最佳提取工藝條件。結(jié)果表明：金絲桃素最佳提取條件為：浸提溫度80℃，浸提時(shí)間105min，液料比75mL：1g，甲醇體積分?jǐn)?shù)85％，比條件下提取率為3．72％。驗(yàn)證試驗(yàn)證明此法合理高效，預(yù)測(cè)準(zhǔn)確，方便可行。關(guān)鍵詞：響應(yīng)曲面法；金絲桃素；提取；工藝條件優(yōu)化中圖分類號(hào)：R284．2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002—1302(2014)04—0221—03金絲桃素屬駢苯二蒽酮類物質(zhì)，分子式CH，0。，廣泛分限公司。材料陰干至恒重，備用。金絲桃素對(duì)照品，購(gòu)于上海

3、布于貫葉金絲桃(Hypericumperforatum)、烏腺金絲桃(H融禾醫(yī)藥科技有限公司，純度>98％。attenuatum)、長(zhǎng)柱金絲桃(It．a(chǎn)scyron)等植物中。近年來(lái)，金試劑包括甲醇、石油醚，均購(gòu)于天津永大化學(xué)試劑有限公絲桃素在抗腫瘤的光化學(xué)治療、抗病毒(包括HIV)、抗抑郁司，去離子水由實(shí)驗(yàn)室自制。機(jī)制研究等方面十分活躍。已有研究表明，金絲桃素作為有1．2儀器效的光敏劑，通過(guò)光動(dòng)力學(xué)治療可以有效地誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋紫外分光光度計(jì)(島津uV一2450)；恒溫水浴鍋(金壇醫(yī)亡，臨床上已用于治療基體細(xì)胞癌、胰腺癌、膀胱癌

4、甚至腦瘤療儀器廠HH—S4)；分析天平(梅特勒AL204)；超純水機(jī)(密等。另外，近年來(lái)大量試驗(yàn)已證明，金絲桃素為廣譜抗病理博一Q3)等。毒的中草藥活性單體，對(duì)多種畜禽傳染病有良好防治效果。1．3方法已有不少文獻(xiàn)報(bào)道了用金絲桃素防治豬高熱病、雞新城疫、鴨1．3．1金絲桃素提取將貫葉連翹粗粉陰干樣品過(guò)20目病毒性肝炎等的事例，使其成為繼紅豆杉、人參和銀杏葉篩，用石油醚在55℃脫脂3次，干燥備用。精確稱取一定量之后，國(guó)內(nèi)外研究的又一個(gè)熱點(diǎn)，在新藥開發(fā)上具有重大意樣品，加入到一定量、一定體積分?jǐn)?shù)的甲醇溶液中。置于一定義u。金絲桃素具有

5、特殊理化性質(zhì)及其在光和熱的作用下溫度的水浴鍋中，浸提一定時(shí)間后，離心，定容。將提取液稀易分解、易氧化變質(zhì)的特性，故其提取率和產(chǎn)品純度都較低，釋10倍后，置紫外分光光度計(jì)中590nm下檢測(cè)吸光度。每制約了其深入研究和制藥工藝的發(fā)展。本試驗(yàn)以甲醇為溶個(gè)試驗(yàn)3次平行，取平均值，結(jié)果以提取率(E)表示。E=劑，采用易于工業(yè)化生產(chǎn)的熱浸提取方法，以金絲桃素提取率[(C×V)／m]×／×100％，式中：c為金絲桃素的質(zhì)量濃度為考察指標(biāo)，以提取時(shí)間、液固比、提取溫度、甲醇體積分?jǐn)?shù)為(txg／mL)；V為加入溶劑的體積(mL)；m為樣品的質(zhì)量(

6、g)；提取工藝的主要影響因素，通過(guò)單因素試驗(yàn)確定影響較大的，為稀釋倍數(shù)。3個(gè)因素，采用響應(yīng)曲面法(responsesurfacemethodology)進(jìn)行1．3．2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精確稱取金絲桃素對(duì)照品5．1mg，優(yōu)化，確定從貫葉連翹粗提物中提取金絲桃素的最佳工藝。加入到甲醇定容至25mL的容量瓶中，搖勻，配成質(zhì)量濃度為響應(yīng)曲面法是目前廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物中有效化學(xué)成分提取0．204mg／mL的對(duì)照品溶液，將此溶液稀釋10倍后做為標(biāo)準(zhǔn)工藝優(yōu)化的一種數(shù)據(jù)處理方法”，具有簡(jiǎn)便、試驗(yàn)精度高母液。準(zhǔn)確量取適量標(biāo)準(zhǔn)母液，定容至10mL容量瓶中

7、，配成的優(yōu)點(diǎn)，使用該方法優(yōu)化后的的金絲桃素提取率有明顯的提濃度為1．280—2O．40I~g／mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。置紫外分光光度高，為金絲桃素提取的工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的理論依據(jù)。計(jì)中590llln下檢測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸曲線Y=0．5992x+0．2487，r2=01材料與方法．9999。2結(jié)果與分析1．1材料與試劑供試材料為貫葉連翹粗粉，購(gòu)于西安康培基生物科技有2．1單因素試驗(yàn)2．1．1液固比對(duì)金絲桃素提取率的影響在溫度80℃、甲醇體積分?jǐn)?shù)85％、提取時(shí)間110min的條件下，考察液固比收稿日期：2013—08—27基金

8、項(xiàng)目：長(zhǎng)白山動(dòng)植物資源利用與保護(hù)吉林省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室25：1～125：1．(mL／g)對(duì)提取率的影響，結(jié)果如圖1所示。2012年一般基金(編號(hào)：吉農(nóng)院合字[2012]第706號(hào))。由圖1可知，液固比從25mL：1g到75mL：1g遞增作者簡(jiǎn)介：薛曉麗(197O一