貓棒束孢多糖對(duì)小鼠S180肉瘤和H22肝癌的抑制作用.pdf

《貓棒束孢多糖對(duì)小鼠S180肉瘤和H22肝癌的抑制作用.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。

1、中國(guó)藥物與臨床2015年2月第15卷第2期ChineseRemedies&Clinics，F(xiàn)ebruary2015,Vo1．15,No．2·185·——貓棒束孢多糖對(duì)小鼠S180肉瘤和H22肝癌的抑制作用楊喜花張蕻任連生陳麗霞白喜花貓棒束孢(Isariafelina)是從天然冬蟲(chóng)夏草蟲(chóng)草體中經(jīng)菌棒束孢多糖(IFP)。種分離后培養(yǎng)得到的一株真菌，經(jīng)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所1．2．2腫瘤動(dòng)物模型的建立：將生長(zhǎng)良好的小鼠S180肉瘤、郭英蘭教授鑒定為Isariafelina(DC．：Fr．)Fr．，是一種新的冬蟲(chóng)小

2、鼠H22肝癌組織瘤塊，在無(wú)菌條件下加生理鹽水，用消毒夏草菌種，已被中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物的玻璃研磨器制成所需濃度的細(xì)胞懸液濃度為lxlOT／ml，過(guò)中心保藏(保藏號(hào)：CGMCCNO．0706)。大量的研究報(bào)道，許濾后分別接種于小鼠右腋下皮下，每只小鼠接種0．2ml瘤多真菌多糖均具有抗腫瘤生物活性，為驗(yàn)證貓棒束孢真菌多液。糖是否也具有抗腫瘤生物活性[1_5]．我們開(kāi)展了貓棒束孢多糖1．2．3動(dòng)物分組及給藥：接種瘤液次日按體質(zhì)量將動(dòng)物隨機(jī)對(duì)移植性$180肉瘤及H22肝癌的抑制作用研究，分為5組，

3、分別為陰性對(duì)照組、絲裂霉素西藥陽(yáng)性對(duì)照組、鴉1材料與方法膽子油中藥陽(yáng)性對(duì)照組、IFP高劑量組、IFP中劑量組、IFP低1．1材料劑量組，每組9只動(dòng)物。于接種24h后開(kāi)始給藥，陰性對(duì)照1．1．1動(dòng)物：無(wú)特定病原菌(SPF)級(jí)昆明小鼠108只，體質(zhì)量組動(dòng)物每天灌胃給予蒸餾水0．2ml，鴉膽子油組動(dòng)物每天灌2022g，雄性，由山西省腫瘤研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室繁殖，實(shí)驗(yàn)動(dòng)胃給予鴉膽子油8ml／kg，IFP高劑量組動(dòng)物每天灌胃IFP物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(晉)2012．0001；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證200mg&g，IFP中

4、劑量組動(dòng)物每天灌胃IFP100mg&g，IFP低號(hào)：SYXK(晉)2012．0001。飼養(yǎng)溫度為20～26℃，濕度40％～劑量組動(dòng)物每天灌胃IFP50mg／kg；絲裂霉素組小鼠腹腔注60％，12h／12h照明，自由飲水，飼喂無(wú)菌全價(jià)營(yíng)養(yǎng)顆粒飼料射絲裂霉素1mg／kg。分別于實(shí)驗(yàn)第2天、第6天各注射1(北京科澳協(xié)力飼料有限公司)。次，共注射2次。I．1．2試劑：注射用絲裂霉素由浙江海正藥業(yè)股份有限公司接種S180細(xì)胞和H22細(xì)胞的昆明小鼠連續(xù)灌胃給藥生產(chǎn)，產(chǎn)品批號(hào)為110601；鴉膽子油口服乳液由沈陽(yáng)藥大藥1

5、0d，于末次給藥次日稱(chēng)質(zhì)量并處死動(dòng)物。剝離瘤塊稱(chēng)濕質(zhì)業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)為1103112。量，所得數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)算瘤質(zhì)量抑制率(％)。1．1．3瘤株：小鼠S180肉瘤細(xì)胞：購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法定所，小鼠H22肝癌細(xì)胞：河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心饋贈(zèng)。采用SPSS17．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。采用單因素1．2實(shí)驗(yàn)方法方差分析，組間比較采用最小顯著差異法(ISD)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以1．2．I貓棒束孢多糖的制備：貓棒束孢是從天然冬蟲(chóng)夏草蟲(chóng)蜘表示，以P

6、中經(jīng)菌種分離后培養(yǎng)得到。培養(yǎng)方法：每瓶裝將500ml2結(jié)果培養(yǎng)基(蛋白胨0．6％，酵母膏1．2％，蔗糖2．4％，MgSO2．1IFP對(duì)移植性S180肉瘤的抑制作用：IFP對(duì)小鼠移植性0．05％，用0．1％KH2PO4調(diào)整pH為6．5～7．0)裝于3000ml三S180肉癌的抑制作用見(jiàn)表1，由表1可見(jiàn)．IFP對(duì)小鼠移植性角瓶中，牛皮紙封口，125℃高壓滅菌40min，冷卻至室溫，接S180肉瘤具有顯著的抑制作用，其抑瘤效果呈現(xiàn)一定的劑量入菌種，置于180r／min搖床上，于23～27℃條件下旋轉(zhuǎn)發(fā)酵依賴(lài)性，其

7、中，IFP高劑量和IFP中劑量的抑瘤效果與陰性對(duì)培養(yǎng)72h，收集發(fā)酵液，將發(fā)酵液于2000r／min離心5min，照組相比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。收集菌絲體，將菌絲體于80C烘干后粉碎，過(guò)100目篩。2．2IFP對(duì)移植性H22肝癌的抑制作用：IFP對(duì)小鼠移植性取300g菌絲粉。加入1200ml蒸餾水。沸水浴提取90H22肝癌的抑制作用見(jiàn)表2，由表2可見(jiàn)，IFP對(duì)小鼠移植性min，3000r／min離心5rain；重復(fù)提取2次；合并3次提取的H22肝癌具有顯著的抑制作用，其中，IFP高劑量組瘤重

8、與陰上清液，將上清液水浴濃縮至900ml；加入濃縮液3．75倍的性對(duì)照組相比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0．05)，隨著IFP劑95％乙醇，充分混勻，沉淀過(guò)夜；取沉淀，于7O烘干，即得貓量的降低，抑瘤率明顯下降，因此，IFP對(duì)H22肝癌的抑制效DOI：10．11655~gywylc2015．02．013果呈現(xiàn)一定的劑量依賴(lài)性。作者單位：030013太原，山西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)3討論部(楊喜花、任連生、陳麗