診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)課件:實(shí)驗(yàn)三 紅細(xì)胞壓積.ppt

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1、實(shí)驗(yàn)三紅細(xì)胞壓積測(cè)定網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞沉降率(血沉)的測(cè)定1一、紅細(xì)胞壓積測(cè)定2概念一定量的抗凝全血,經(jīng)規(guī)定速度和時(shí)間離心沉淀,沉下的紅細(xì)胞體積與全血體積之比,即為紅細(xì)胞壓積。3器材紅細(xì)胞壓積管(溫氏管)為平底厚壁玻璃管。管上刻有0-10cm刻度,其讀數(shù)一邊由下而上供測(cè)紅細(xì)胞壓積用;另一邊由上而下,供紅細(xì)胞沉降率測(cè)定用。4靜脈血采集方法抽取病人靜脈血2ml,于EDTA二鉀抗凝的真空采血管中(1.5mgEDTA-K2/ML)24小時(shí)室溫保存。5操作步驟⑴用細(xì)長(zhǎng)毛細(xì)滴管吸取混均的抗凝血,插入溫氏管底部,然后將血液緩慢

2、注入至刻度“10”處,注意防止氣泡產(chǎn)生。⑵用水平離心機(jī)以3000r/min離心30min,讀取暗紅細(xì)胞層,再離心10分鐘。6判讀結(jié)果可見血液被分離成五個(gè)層次,自上至下為:淡黃色(血漿層)乳白層(血小板層)灰紅層(有核細(xì)胞層,含白細(xì)胞及有核紅細(xì)胞)暗紅層(含二氧化碳血紅蛋白的紅細(xì)胞)最底層為鮮紅層(含氧合血紅蛋白的紅細(xì)胞層)。讀取紅細(xì)胞層的柱高的毫米數(shù),乘以1%,即為每升血液中紅細(xì)胞體積的升數(shù)。7正常參考范圍男:0.40~0.50L/L(40~50vol%)女:0.37~0.48L/L(37~48vol%)8臨床意義

3、脫水、燒傷、大手術(shù)后,通過測(cè)定壓積以決定是否靜脈輸液及輸液量。血細(xì)胞比容增高:見于各種原因引起的血液濃縮;及各種原因所致的紅細(xì)胞絕對(duì)性增多,如真性紅細(xì)胞增多癥。血細(xì)胞比容降低:見于各種貧血,但必須結(jié)合紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白量。9二、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)10概念網(wǎng)織紅細(xì)胞是未完全成熟的紅細(xì)胞。紅細(xì)胞由骨髓進(jìn)入外周血,需24-48h合成最后20%的血紅蛋白,殘余的嗜堿性物質(zhì)才能完全消失,成為成熟的紅細(xì)胞。將其分為五型:花冠型、絲球型、網(wǎng)型、破網(wǎng)型、點(diǎn)粒型。11靜脈血采血方法抽取病人靜脈血2ml,于EDTA二鉀抗凝的真空采血管中(

4、1.5mgEDTA-K2/ML)24小時(shí)室溫保存。12細(xì)胞受色原理網(wǎng)織紅細(xì)胞較成熟的紅細(xì)胞稍大,胞漿中殘存多少不等的嗜堿性物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍(lán)活體染色呈淺藍(lán)或深藍(lán)色的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。13試劑10g/L煌焦油藍(lán)等滲鹽水溶液:煌焦油藍(lán)1g枸櫞酸鈉0.4g氯化鈉0.85g蒸餾水加至100ml14操作步驟⑴于玻片的一端加10g/L煌焦油藍(lán)等滲鹽水溶液一滴,任其自然干燥備用。⑵取末梢血一滴于干燥染料上,用推片攪動(dòng)混勻后,將兩玻片蓋合,待3min以上時(shí)間,才推制血片。⑶油鏡下,計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織細(xì)胞數(shù)。15正常參考值成人:0.

5、5~1.5%絕對(duì)值:24x109/L~84x109/L兒童:3~6%1617臨床意義網(wǎng)織紅細(xì)胞顯著增加:表示骨髓紅細(xì)胞生成旺盛,常見于溶血性貧血(可高達(dá)70%)。其次急性失血性貧血,急性失血后5-10天達(dá)到高峰,2周后恢復(fù)正常。營(yíng)養(yǎng)性巨幼紅細(xì)胞性貧血和缺鐵性貧血可因缺乏造血物質(zhì),僅輕度增加(也可正?;驕p少)。網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)量持續(xù)上升,常提出慢性失血,如消化道潰瘍等。網(wǎng)織紅細(xì)胞顯著降低,表示骨髓增生低下,見于再生障礙性貧血。18貧血治療效果觀察,如缺鐵性貧血和營(yíng)養(yǎng)性巨幼紅細(xì)胞性貧血,經(jīng)相應(yīng)治療后1-2日開始增多,1周左

6、右達(dá)到最高峰,因此觀察網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)量的反應(yīng),是貧血療效的評(píng)價(jià)指標(biāo)。骨髓受白血病、腫瘤等浸潤(rùn)時(shí),血中網(wǎng)織紅細(xì)胞也可呈不規(guī)則的病理性輕度增多,此系病理刺激所至,它不反應(yīng)造血旺盛。臨床意義19三、紅細(xì)胞沉降率的測(cè)定20目的了解紅細(xì)胞沉降率及掌握其測(cè)定方法。掌握血沉測(cè)定的正常值及臨床意義。21原理將加有抗凝劑的血液置于一特制的具有刻度的玻管內(nèi),置于血沉架上,紅細(xì)胞因重力作用而逐漸下沉,上層留下一層黃色透明的血漿。經(jīng)一定時(shí)間,沉降的紅細(xì)胞上面的血漿柱的高度,既表示紅細(xì)胞的沉降率。22材料及用具血沉管血沉管架肝素溶液注射器等。

7、23方法及步驟取0.13mol/L枸櫞酸鈉0.4ml放入試管中;抽取病人靜脈血1.6ml,注入枸櫞酸鈉液中充分混勻;用魏氏血沉管吸血到0刻度,并直立于血沉架上1小時(shí),觀察紅細(xì)胞下沉的毫米數(shù),即為紅細(xì)胞沉降率。24注意事項(xiàng)采血后實(shí)驗(yàn)應(yīng)在3小時(shí)內(nèi)完畢,否則血液放置過久,會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。沉降管應(yīng)垂直豎立,不能有傾斜。沉降率隨溫度升高而加快,故應(yīng)在室溫22-27℃時(shí)進(jìn)行。在吸血之前,須將血液充分搖均(但不可過分震蕩以免紅細(xì)胞破壞)。吸血時(shí),要絕對(duì)避免產(chǎn)生氣泡。25方法及參考值魏氏自然沉降法:男性<15mm/h女性<

8、20mm/h26臨床意義1.增快見于:(1)生理性:運(yùn)動(dòng)、月經(jīng)期、妊娠3月以上直至分娩后3周、60歲以上高齡者及年幼小兒。27臨床意義(2)病理性:①各種炎癥:急性細(xì)菌性炎癥后2~3天,血沉可增快;風(fēng)濕熱活動(dòng)期、結(jié)核活動(dòng)期,血沉亦可增快。②組織損傷及壞死持續(xù)2~3周,心肌梗死發(fā)病1周左右血沉增快。③惡性腫瘤。④其他各種高球蛋白血癥、貧血、高膽固醇血癥。28臨

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