微生物的生長(zhǎng)繁殖及其控制ppt課件.ppt

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1、Chapter7微生物的生長(zhǎng)繁殖及其控制生物個(gè)體由小到大的增長(zhǎng)，即表現(xiàn)為細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加。生長(zhǎng)指生物個(gè)體數(shù)目的增加。繁殖在單細(xì)胞微生物中，生長(zhǎng)繁殖的速度很快，而且兩者始終交替進(jìn)行，個(gè)體生長(zhǎng)與繁殖的界限難以劃清，因此實(shí)際上常用群體生長(zhǎng)作為衡量微生物生長(zhǎng)的指標(biāo)。群體生長(zhǎng)的實(shí)質(zhì)是包含著個(gè)體細(xì)胞生長(zhǎng)與繁殖交替進(jìn)行的過(guò)程7.1.1微生物純培養(yǎng)的獲得1.平板劃線分離法2.稀釋倒平板法3.單孢子或單細(xì)胞分離法4.利用選擇性培養(yǎng)基分離法7.1純培養(yǎng)微生物群體生長(zhǎng)1.平板劃線分離法用接種環(huán)無(wú)菌操作沾取少許待分離的材料，在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃

2、線或其他形式的連續(xù)劃線，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。2.稀釋倒平板法3.單孢子或單細(xì)胞分離法采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)。在顯微鏡下使用單孢子分離器進(jìn)行機(jī)械操作，挑取單孢子或單細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。也可以采用特制的毛細(xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來(lái)，然后移到合適的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。4.選擇性培養(yǎng)基分離法各種微生物對(duì)不同的化學(xué)試劑、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用這些特性可配制適合某種微生物而限制其它微生物生長(zhǎng)的選擇培養(yǎng)基，用它來(lái)培養(yǎng)微生物以獲得純培養(yǎng)。微

3、生物純培養(yǎng)分離方法的比較分離方法應(yīng)用范圍平皿劃線法方法簡(jiǎn)便，多用于分離細(xì)菌稀釋倒平皿法既可定性，又可定量，用途廣泛?jiǎn)渭?xì)胞挑取法局限于高度專業(yè)化的科學(xué)研究利用選擇培養(yǎng)基法適用于分離某些生理類型較特殊的7.1.2微生物生長(zhǎng)的測(cè)定評(píng)價(jià)不同的抗菌物質(zhì)對(duì)微生物產(chǎn)生抑制(或殺死)作用的效果；客觀地反映微生物生長(zhǎng)的規(guī)律；評(píng)價(jià)培養(yǎng)條件、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響；微生物生長(zhǎng)微生物生長(zhǎng)測(cè)量方法個(gè)體計(jì)數(shù)法重量法生理指標(biāo)法7.1.2.1個(gè)體計(jì)數(shù)法1.直接法利用血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)；需

4、要相對(duì)高的細(xì)菌濃度；個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察；2.間接法原理是每個(gè)活細(xì)菌在適宜的培養(yǎng)基和良好的生長(zhǎng)條件下可以通過(guò)生長(zhǎng)形成菌落。7.1.2.2細(xì)胞生物量的測(cè)定測(cè)定多細(xì)胞及絲狀真菌生長(zhǎng)情況的有效方法以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量；方法：菌體分離→烘干→稱重1.重量法DNA可與DABA一HCl(3.5二氨基苯甲酸一鹽酸)溶液反應(yīng)顯示特殊的熒光。根據(jù)這種熒光反應(yīng)強(qiáng)度求得DNA含量。2.DNA含量測(cè)定法3.ATP含量測(cè)定法微生物細(xì)胞中都含有相對(duì)恒定量的ATP,而ATP與生物量之間有一定的比例關(guān)系。用適當(dāng)?shù)脑噭呐囵B(yǎng)物中提取出ATP,以分光光度

5、計(jì)測(cè)定它的熒光素一熒光素酶反應(yīng)強(qiáng)度,經(jīng)換算即可求得生物量。4.代謝活性法如微生物對(duì)糖類發(fā)酵產(chǎn)生酸的多少，均與原生質(zhì)的含量有關(guān)系，可以推測(cè)細(xì)菌數(shù)的多少。該法是通過(guò)測(cè)定生活細(xì)胞的代謝活性強(qiáng)度來(lái)估算其生物量。微生物代謝作用所消耗或產(chǎn)生的物質(zhì)量可以代表微生物的生長(zhǎng)量。5.蛋白質(zhì)量測(cè)定法蛋白質(zhì)是細(xì)胞的主要組分，而蛋白質(zhì)的含量是比較穩(wěn)定的。可以從蛋白質(zhì)量的測(cè)定求出細(xì)胞物質(zhì)量，或以測(cè)定芳香氨基酸量求蛋白質(zhì)量?？梢詼y(cè)定全氮量來(lái)求蛋白質(zhì)量：蛋白質(zhì)量=氮量×6.25方法：菌體分離→洗滌→凱氏微量定氮法測(cè)定總氮含量7.2.3生理指標(biāo)測(cè)定法樣品中微生物數(shù)量多或生長(zhǎng)旺盛，

6、這些指標(biāo)愈明顯，因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱計(jì)等設(shè)備來(lái)測(cè)定相應(yīng)的指標(biāo)。常用于對(duì)微生物的快速鑒定與檢測(cè)微生物的生理指標(biāo)，如呼吸強(qiáng)度，耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。7.1.3微生物的生長(zhǎng)規(guī)律7.1.3.1細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律在不補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或移去培養(yǎng)物，保持整個(gè)培養(yǎng)液體積不變條件下，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以菌數(shù)為縱坐標(biāo)，根據(jù)不同培養(yǎng)時(shí)間時(shí)細(xì)菌數(shù)量的變化，可以作出一條反映細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。生長(zhǎng)曲線生長(zhǎng)曲線可分：延滯期對(duì)數(shù)期衰亡期穩(wěn)定期221.延滯期將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后，在開(kāi)始一段時(shí)間內(nèi)菌數(shù)不立即增加，

7、或增加很少，生長(zhǎng)速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。遲緩期的特點(diǎn)：分裂遲緩、代謝活躍①通過(guò)遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；②利用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞作為“種子”；③盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；④適當(dāng)擴(kuò)大接種量等方式縮短遲緩期，克服不良的影響。在工業(yè)發(fā)酵和科研中通常采取一定的措施縮短延滯期：應(yīng)用：延緩期菌體的生理特征是對(duì)外界因素敏感，因此，殺滅有害微生物宜在此時(shí)進(jìn)行；與此同時(shí)，菌體遺傳保守性很差，在不良因素下菌體易發(fā)生變異，故可利用此期的菌體進(jìn)行誘變育種。172.對(duì)數(shù)期對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)菌個(gè)體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致，代謝

8、旺盛、生長(zhǎng)迅速、代時(shí)穩(wěn)定，所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產(chǎn)上用作種子，使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短，提高經(jīng)濟(jì)效益。以最大的速