原位雜交實(shí)驗(yàn)方法.ppt

《原位雜交實(shí)驗(yàn)方法.ppt》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、原位雜交實(shí)驗(yàn)方法1mRNA原位雜交前實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1，無RNA酶水的處理2，無RNA酶載玻片的處理3，標(biāo)本的防RNA酶的固定4，探針的稀釋和保存5，DNA探針需變性2原位雜交溶液的配制1，預(yù)雜交液和雜交液的配制2，20Xssc，2Xssc，0.2Xssc緩沖液的配制3，0.1molPBS緩沖液的配制4，0.1mol枸櫞酸緩沖液的配制5，0.1molTBS緩沖液的配制6，復(fù)合消化液的配制7，組織細(xì)胞打孔液的配制8，雜交漂洗液9，過氧化氫封閉液3探針設(shè)計(jì)方案1，探針名稱：2，適用種屬：3，標(biāo)記方式：3ˋDIG5ˋFAM4，模板序列：5，探針序列：4探針雜交原理1，

2、組織細(xì)胞的通透2，探針長度3,探針濃度和雜交時(shí)間4，雜交中的Tm值和雜交溫度5，雜交嚴(yán)格度6，預(yù)雜交原理7，雜交后處理5A-石蠟切片mRNA原位雜交步驟一，過氧化物酶顯色系統(tǒng)二，堿性磷酸酶顯色系統(tǒng)三，熒光顯色方法6B-冰凍切片mRNA原位雜交步驟一，過氧化物酶顯色系統(tǒng)二，堿性磷酸酶顯色系統(tǒng)三，熒光顯色方法7C-細(xì)胞爬片或涂片mRNA原位雜交步驟一，過氧化物酶顯色系統(tǒng)二，堿性磷酸酶顯色系統(tǒng)三，熒光顯色方法8附錄1，DAB的配制和使用方法2NBT/BCIP的配制和使用方法3，蘇木素的配制和使用方法4，核固紅的配制和使用方法9流式細(xì)胞儀D-懸浮細(xì)胞的mRNA原

3、位雜交細(xì)胞流式細(xì)胞儀步驟10