中國(guó)植物源農(nóng)藥的進(jìn)展ppt課件.ppt

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1、第十章農(nóng)藥生物測(cè)定與田間藥效試驗(yàn)KeyLaboratoryofNaturalPesticide&ChemicalBiology,MinistryofEducation,SouthChinaAgriculturalUniversity第一節(jié)農(nóng)藥的生物測(cè)定一、概述二、生物測(cè)定試驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則三、供試材料四、室內(nèi)毒力測(cè)定的方法五、殺菌劑的毒力測(cè)定方法六、除草劑的毒力測(cè)定方法七、殺線蟲(chóng)劑的毒力測(cè)定方法八、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)與分析一、概述農(nóng)藥生物測(cè)定的概念:生物活體或者離體組織、細(xì)胞以及細(xì)胞中的活性物質(zhì)化合物試驗(yàn)設(shè)計(jì)、生物統(tǒng)計(jì)死亡率抑制率等效應(yīng)生物測(cè)定的應(yīng)用活性篩選的常規(guī)測(cè)定農(nóng)藥殘留

2、的微量生物分析抗性毒力測(cè)定藥害毒性測(cè)定二、生物測(cè)定試驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則相對(duì)的控制環(huán)境條件必須設(shè)立對(duì)照處理必須設(shè)重復(fù)運(yùn)用生物統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)結(jié)果三、供試材料應(yīng)參考的原則1、在室內(nèi)認(rèn)為環(huán)境條件下,應(yīng)用較簡(jiǎn)便、快速的繁殖技術(shù),可保證全年定時(shí)大量供應(yīng),不受季節(jié)限制;2、應(yīng)是廣泛發(fā)生危害的主要農(nóng)林有害生物,具有重要的經(jīng)濟(jì)意義,而且在分類地位上有一定代表性;3、對(duì)藥劑的敏感性符合要求,試驗(yàn)時(shí)易操作。我國(guó)常采用的生物種類昆蟲(chóng)和螨類:家蠅和庫(kù)蚊等棉鈴蟲(chóng)玉米螟小菜蛾褐飛虱家蠅庫(kù)蚊病原菌:稻瘟病菌、水稻紋枯菌、小麥條銹病菌、馬鈴薯晚疫病菌等雜草:野燕麥、看麥娘、莧、薺菜、播娘蒿和藜等野燕麥看麥娘稻

3、瘟病菌莧薺四、室內(nèi)毒力測(cè)定的方法(一)殺蟲(chóng)劑的毒力測(cè)定方法1、常規(guī)活體生物測(cè)定(1)觸殺作用噴霧法、噴粉法、浸液法、點(diǎn)滴法、注射法和藥膜法庫(kù)蚊(2)胃毒作用飼喂法——飼喂葉片法和飼喂毒餌法飼飲法——適用于蠅類、蝽類等有吸食習(xí)性的昆蟲(chóng),自由飼飲法和強(qiáng)制飼飲法。飼喂葉片法飼喂毒餌法(3)熏蒸作用:氣態(tài)的形式與昆蟲(chóng)接觸密閉環(huán)境(4)內(nèi)吸作用:直接測(cè)定法和間接測(cè)定法基本原理——將藥劑通過(guò)處理植物的某一特定部位后,藥劑能被植物吸收,并通過(guò)傳導(dǎo),到達(dá)其他部位,讓昆蟲(chóng)取食未直接用藥的部位后觀察昆蟲(chóng)是否中毒死亡,以判定藥劑是否具此特性。(直接測(cè)定法)(5)拒食作用:依據(jù)是昆蟲(chóng)的取食量或昆

4、蟲(chóng)對(duì)食物的所食部位和昆蟲(chóng)體重的變化葉碟法拒食率(%)=(對(duì)照組取食葉面積-處理組取食葉面積)處理組取食葉面積×100(6)引誘作用(7)趨避作用(8)生長(zhǎng)發(fā)育和生育干擾作用腦激素、保幼激素、蛻皮激素和幾丁質(zhì)受干擾生長(zhǎng)、變態(tài)、滯育等生理現(xiàn)象發(fā)生改變藥劑效果2、細(xì)胞水平及分子水平的生物測(cè)定預(yù)期作用靶標(biāo)抑制活性的測(cè)定MTT法生物傳感器生物芯片3、高通量篩選(highthroughputscreening,HTS)微量化,快速,高效等特點(diǎn)(二)殺螨劑的毒力測(cè)定方法1、玻片浸漬法2、葉片殘毒法3、葉碟浸漬法五、殺菌劑的毒力測(cè)定方法(一)基于離體平板培養(yǎng)的毒力測(cè)定方法特點(diǎn):常用方法:

5、抑菌圈法、生長(zhǎng)速率法、孢子萌發(fā)測(cè)定法、對(duì)峙培養(yǎng)法和高通量篩選法。高通量篩選法——活體篩選法和離體篩選方法生長(zhǎng)速率抑制法效果圖抑菌圈法效果圖(二)組織篩選測(cè)定法離體毒力測(cè)定脫離了植物本身,無(wú)法檢測(cè)出藥劑是否具有化學(xué)保護(hù)或化學(xué)免疫等活性。組織篩選測(cè)定法(介于活體與離體):適用于稻瘟病的剝離葉鞘法;適用于細(xì)菌病害的塊根法;適用于大麥白粉病的芽鞘表皮法和適用于水稻紋枯病的蠶豆葉片法等。六、除草劑的毒力測(cè)定方法(一)對(duì)種子萌發(fā)的測(cè)定方法培養(yǎng)皿法黃瓜幼苗形態(tài)法瓊脂測(cè)定法(二)植株生長(zhǎng)量的測(cè)定方法去胚乳小麥幼苗法蘿卜子葉法(三)生理指標(biāo)的測(cè)定方法浮萍法單細(xì)胞藻類法希爾反應(yīng)酶水平測(cè)定方法

6、(四)高通量篩選(1)活體篩選代表性植物為測(cè)試對(duì)象種子處理生長(zhǎng)測(cè)試法(2)離體篩選對(duì)靶標(biāo)酶抑制活性的測(cè)定方法測(cè)定過(guò)氧化氫的方法測(cè)定熒光變化的方法七、殺線蟲(chóng)劑的毒力測(cè)定方法(一)供試線蟲(chóng)的選擇(二)線蟲(chóng)的純培養(yǎng)(三)供試藥劑活性測(cè)定1、離體篩選觸殺法熏蒸法2、盆栽試驗(yàn)土壤淋浴法葉面噴霧法八、試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)與分析LD50/LC50或ED50/EC50及其標(biāo)準(zhǔn)誤差和95%置信區(qū)間、藥劑的毒力曲線、顯著性檢驗(yàn)。第二節(jié)農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)1、以藥劑為主體的系統(tǒng)田間試驗(yàn)田間藥效篩選田間藥效評(píng)價(jià)特定因子試驗(yàn)2、以防治對(duì)象為主體的試驗(yàn)田間藥效試驗(yàn)包括小區(qū)試驗(yàn)、大區(qū)試驗(yàn)和大面積示范試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)

7、果用“藥效”表示。二、田間藥效試驗(yàn)的基本要求與影響因素1、試驗(yàn)地的選擇2、試驗(yàn)小區(qū)的設(shè)計(jì)3、影響藥效的因素農(nóng)藥制劑防治對(duì)象環(huán)境條件三、田間藥效試驗(yàn)的調(diào)查內(nèi)容與方法基本記錄:農(nóng)藥試驗(yàn)批準(zhǔn)號(hào),農(nóng)藥生產(chǎn)單位,農(nóng)藥種類,農(nóng)藥名稱,有效成分含量,劑型及試驗(yàn)范圍與使用方法。必調(diào)查內(nèi)容:期間的氣象資料(降水類型,日降水量,溫度),土壤資料(土壤類型,費(fèi)力狀況及雜草覆蓋情況等,水田施藥還要記錄水層深度)和藥效?;镜乃幮д{(diào)查與計(jì)算方法1.殺蟲(chóng)劑——通常采用隨機(jī)抽樣法對(duì)角線法大五點(diǎn)法棋盤式法平行線法分行法殺蟲(chóng)劑藥效一般采用校正死亡率與作物被害程

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