全基因組表達(dá)譜分析七氟烷麻醉對(duì)大鼠海馬基因表達(dá)的影響

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1、全基因組表達(dá)譜分析七氟烷麻醉對(duì)大鼠海馬基因表達(dá)的影響潘志強(qiáng)魯顯福楊俊霞張勵(lì)才曹君利徐州醫(yī)學(xué)院江蘇省麻醉學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,221002江蘇徐州目的：采用大鼠全基因組表達(dá)譜芯片結(jié)合RT-PCR定量驗(yàn)證，分析七氟烷麻醉下大鼠海馬基因表達(dá)變化。方法：用2.5%七氟烷麻醉6周齡SPF級(jí)SD雄性大鼠(n=6)4小時(shí)，（對(duì)照組為同周齡未麻醉SPF級(jí)雄性大鼠)；48小時(shí)后取材，然后抽提海馬總RNA(用Invitrogen的TRIzol法提取)。經(jīng)液氮研磨、氯仿抽提、異丙醇沉淀、30ul溶水后，采用Nanodrop檢測(cè)樣本總RNA濃度及凝膠電泳檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)樣

2、本總RNA提取質(zhì)檢合格后，用于基因表達(dá)譜分析，并用RT-PCR定量驗(yàn)證其全基因組表達(dá)譜差異分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。結(jié)果：同對(duì)照組(未麻醉SPF級(jí)SD雄性大鼠)相比，417個(gè)基因(包括67個(gè)上調(diào)基因和350個(gè)下調(diào)基因)出現(xiàn)了明顯差異表達(dá)(＞2.0或＜-2.0倍，P＜0.05)。這些差異表達(dá)基因中，有45個(gè)已知名稱基因與細(xì)胞代謝、機(jī)體發(fā)育、生物合成、生命相關(guān)物質(zhì)結(jié)合、定位、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和通訊有關(guān)。為驗(yàn)證基因芯片分析結(jié)果，我們隨機(jī)抽取6個(gè)差異基因來驗(yàn)證該結(jié)果；我們還選取了7個(gè)表達(dá)差異較大基因，包括3個(gè)上調(diào)基因(RMCP-1,Slc6a3,和Pitx2

3、)和4個(gè)下調(diào)基因(VN7,AVP,IP10和OT)，來調(diào)查基因表達(dá)差異是否有藥物劑量。結(jié)果表明基因芯片表達(dá)譜結(jié)果準(zhǔn)確可靠；且基因表達(dá)變化沒有明顯的藥物劑量依賴性。結(jié)論：七氟烷作為一種廣泛用于臨床的吸入性麻醉劑，越來越多證據(jù)提示，七氟烷因能改變大鼠海馬基因表達(dá)導(dǎo)致學(xué)習(xí)基因損傷。然而，七氟烷誘導(dǎo)海馬全基因組表達(dá)變化仍知之甚少。本研究中，我們通過全基因組表達(dá)譜芯片分析了大鼠海馬基因表達(dá)變化。得出如下結(jié)論：SD雄性大鼠經(jīng)七氟烷麻醉4小時(shí)，能夠誘導(dǎo)海馬較多基因表達(dá)的長(zhǎng)期變化(至少2天)，這些差異性表達(dá)變化可能與學(xué)習(xí)記憶受損的細(xì)胞機(jī)制或吸入麻醉藥

4、麻醉后的其他神經(jīng)生物學(xué)功能紊亂有一定關(guān)系。通訊地址：江蘇省徐州市淮海西路84號(hào)江蘇省麻醉學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室電話：0516-85582561E-mail:zhiqiangp2002@yahoo.com.cn