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《人纖維蛋白凝膠及其復(fù)合支架的制備與性能》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、浙江大學碩士學位論文人纖維蛋白凝膠及其復(fù)合支架的制備與性能姓名：趙海光申請學位級別：碩士專業(yè)：材料科學與工程指導教師：沈家驄;高長有20070501巍江太學碩士學位論文(2007)人纖維蛋白凝膠及其復(fù)合支架的制備與性能摘要本文構(gòu)建纖維蛋白凝膠和聚乳酸(PLLA)多孔支架或聚(乳酸一乙醇酸)(PLGA)微載體的復(fù)合支架。采用冷凍一凍干的方法從人血漿中提取了纖維蛋白原，在凝血酶的作用下形成纖維蛋白凝膠。采用熱致相分離的方法制各了多孔的PLLA支架。采用乳液揮發(fā)的方法制備了PLGA微球，并用纖維蛋白原對微球進行表面修飾。將纖維蛋白凝膠和PLLA多孔支架、PLGA微載體復(fù)合，分別制備了纖維蛋
2、白凝膠填充的PLLA多孔支架和纖維蛋白凝膠與PLGA微載體的復(fù)合支架。采用冷凍一凍干的方法從人血漿中提取了纖維蛋白原。將等體積的纖維蛋白原溶液與凝血酶溶液混合，制備了纖維蛋白凝膠。采用紫外光譜跟蹤了凝膠的形成過程，發(fā)現(xiàn)凝血酶濃度、反應(yīng)溫度對凝膠時間有決定性影響，而纖維蛋白原濃度對凝膠時間的影響較小。經(jīng)二氧化碳臨界點干燥后，采用掃描電鏡觀察了不同條件下形成的纖維蛋白凝膠的微觀結(jié)構(gòu)。熱穩(wěn)定分析顯示纖維蛋白原形成凝膠后，熱分解溫度提高到2880C，比纖維蛋白原的熱分解溫度提高了30℃左右。在三蒸水中平衡11小時后，纖維蛋白凝膠的吸水率從最初的50倍下降到30～40倍。通過紫外光譜跟蹤檢測，
3、測定了纖維蛋白凝膠在不同溶液中的失重。體外細胞培養(yǎng)表明，成纖維細胞可以在凝膠中很好地鋪展和增值。纖維蛋白凝膠的長期穩(wěn)定性，對所修復(fù)組織的重建和再生至關(guān)重要。為了減緩纖維蛋白凝膠的降解和流失，我們進一步構(gòu)建了纖維蛋白凝膠填充的PLLA多浙江大學硬士學位論文(2007)孔支架的復(fù)臺支架。首先利用熱致相分離的力法制備了PLLA多孔支架，將纖維蛋白凝膠填充到PLLA支架中，制備了纖維蛋白凝膠填充的PLLA復(fù)合支架。測定了不同填充條件形成復(fù)合支架的填充率和凝膠釋放。分別測定了PLLA支架和填充的復(fù)合支架的力學性能，發(fā)現(xiàn)復(fù)合支架比PLLA支架具有更好的力學性能。體外軟骨細胞培養(yǎng)實驗表明，與未填充
4、的PLLA多孔支架相比較，纖維蛋白凝膠填充的PLLA支架能有效的負載細胞，同時維持細胞的球狀形態(tài)，有效地促進細胞的生長和活性物質(zhì)的分泌。采用乳化溶劑揮發(fā)法制備了PLGA微球。采用氨解和接枝技術(shù)相結(jié)合的方法，在PLGA微球表面固定了纖維蛋白原分子，以提高PLGA微球的細胞相容性。氨解過程中，微球重量隨氨解時間線性下降，而微球表面的自由氨基隨氨解時間的延長，先增加后恒定在一穩(wěn)定值。采用戊二醛為偶聯(lián)劑，將纖維蛋白原接枝在PLGA微球表面。纖維蛋白原的固定量隨自由氨基含量的增加而增大。將纖維蛋白原與PLGA微載體均勻混合，在凝血酶的作用下形成纖維蛋白凝膠／PL(3A微載體復(fù)合支架。通過激光共
5、聚焦顯微鏡原位觀測了復(fù)合支架的結(jié)構(gòu)，并進一步利用掃描電鏡觀察了凍干處理后支架的形貌。通過調(diào)節(jié)凝血酶的濃度可以有效地阻止微載體的沉降。微載體／凝膠復(fù)合物的彈性模量隨著微載體加入量的增加而增大，但總體模量值較低。體外軟骨細胞培養(yǎng)表明細胞在微載體／凝膠復(fù)合支架中能夠生長和增殖。細胞活性隨著培養(yǎng)時間的延長而增加，而后保持不變。軟骨細胞在凝膠內(nèi)為圓形，而在微載體表面呈鋪展的多邊形。凝膠中軟骨細胞會隨著纖維蛋白凝膠的降解后向PLGA微載體表面遷移，鋪展和增殖。關(guān)鍵訶：纖維蛋白凝膠，聚乳酸，聚(乳酸一乙醇酸)，微載體，復(fù)合支架，軟骨細胞玎瀨江大學硬士學位論文(2007)Preparationand
6、PropertiesofHumanFibrinGelanditsCompositeScaffoldAbstractCompositescaffoldsconsistingoffibringelandpoly·L-laetide(PLLA)porousspongesandpoly(1一lactic-co-glycolicacid)(PLGA)mierocarriersWgTefabricated．Fibrinogenwasisolatedfromhumanplasmabyafreeze-thawcircle．(}elationofthefibrinogenwasaccomplished
7、bymixingwiththrombin．PLLAporousspongeswerefabricatedbythermallyinducedphaseseperation(TIPS)．PLGAmicmsphereswerefabricatedbyemulsion-solventevaporation．TheirsurfaceswerefurthermodifiedbyfibrinogemThefibringelandPLLAporousspongesorP
