新生兒溶血卡式游離放散試驗(yàn)及判定表.doc

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1、游離和放散試驗(yàn)操作程序（微柱凝膠法）一、被撿者紅細(xì)胞懸液的制備：取被檢者壓積紅細(xì)胞400微升，加入5毫升生理鹽水，離心1分鐘，棄去上清液，再入5毫升生理鹽水，離心，反復(fù)4次，第4次棄去上清液后，再離心然后棄去上清液。取洗滌后的壓積紅細(xì)胞與350微升生理鹽水混勻，即為紅細(xì)胞懸液。二、放散液制備：將紅細(xì)胞懸液置于56℃水溫箱，孵育10分鐘，期間不斷搖動(dòng)，以離心力1000g，離心2－3分鐘，取上清即紅細(xì)胞放散液。三、操作步驟：（一）反定型紅細(xì)胞懸液的制備。取反定型紅細(xì)胞A、B、O各1滴（約50微升）于標(biāo)記好的試管中，加生理鹽水250微升。（二）取抗人球蛋白試劑卡，寫(xiě)上姓名，1、2、3孔分別加入5

2、0微升新生兒血漿（游離試驗(yàn)），4、5、6孔分別加入50微升紅細(xì)胞放散液（放散試驗(yàn)）。（三）在第1、4孔分別加入新配制的A型紅細(xì)胞懸液各50微升；在第2、5孔分別加入新配制的B型紅細(xì)胞懸液各50微升；在第3、6孔分別加入新配制的0型紅細(xì)胞懸液各50微升。（四）將檢測(cè)卡置于37℃孵育器孵育15分鐘。（五）使用專用離心機(jī)離心5分鐘（900rpm2分鐘，1500rpm3分鐘），取出檢測(cè)卡，根據(jù)表格判讀結(jié)果：陽(yáng)性結(jié)果：紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在微柱凝膠中形成的特異性抗原抗體復(fù)合物浮在凝膠表面或懸于膠中，表明被檢者血清中含有對(duì)應(yīng)其抗原的抗體或紅細(xì)胞被致敏。用”+”表示。陰性結(jié)果：紅細(xì)胞完全沉降到微柱管尖底

3、部，表明血清中無(wú)相應(yīng)抗原免疫的抗體或紅細(xì)胞沒(méi)有被致敏。用”0”表示。新生兒溶血病游離放散試驗(yàn)判定表新生兒血型A細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞結(jié)果A型+00陽(yáng)性++0陽(yáng)性00+陽(yáng)性(ABO血型以外的抗體引起的溶血)0+0陰性新生兒血型A細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞結(jié)果B型+00陰性++0陽(yáng)性00+陽(yáng)性(ABO血型以外的抗體引起的溶血)0+0陽(yáng)性新生兒血型A細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞結(jié)果AB型+00陽(yáng)性++0陽(yáng)性00+陽(yáng)性(ABO血型以外的抗體引起的溶血)0+0陽(yáng)性新生兒血型A細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞結(jié)果O型+00陰性++0陰性00+陽(yáng)性(ABO血型以外的抗體引起的溶血)0+0陰性