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1、植物組織培養(yǎng)小結(jié)第一章緒論1.植物組織培養(yǎng)：是指在無菌條件下，將離體的植物器官(如根、莖、葉、花、果、莖尖等)、組織(如形成層、表皮、皮層、髓部細胞、胚乳等)、細胞(如大孢子、小孢子及體細胞)以及原生質(zhì)體，培養(yǎng)在人工培養(yǎng)基上和人工控制的環(huán)境中，使其生長、分化、增殖，甚至長出新的植株的過程和技術。2.植物組織培養(yǎng)分類：可分為植株培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、組織或愈傷組織培養(yǎng)、細胞或原生質(zhì)體培養(yǎng)5類：根據(jù)培養(yǎng)目的分為試管嫁接、試管受精、試管加倍、試管育種等。3.植物組織培養(yǎng)的特點:①植物基礎學科研究的良好系統(tǒng)②生物技術的基礎③經(jīng)濟高效，管理方便，利于自動化④技術含量高、實驗誤差小、
2、人工控制能力強⑤生長周期短、生長速度快、試驗重復性好⑥試驗材料經(jīng)濟、來源單一⑦缺點需要設備復雜，投入資金多，電能消耗大：對人員技術水平要求高，對試驗場所要求也較高，不能代替田間試驗。4.外植體:無菌條件下，離體培養(yǎng)于人工培養(yǎng)基上的，用于達到某種培養(yǎng)目的的原始植物材料。5.植物細胞的全能性:是指植物體的每個細胞都含有該植物全部的遺傳信息，在適合的條件下，具有形成完整植株的能力。6.脫分化:是指一個成熟細胞回復到分生狀態(tài)或胚性細胞狀態(tài)的現(xiàn)象，即失去已分化細胞的典型特征。第二章植物組織培養(yǎng)的設備與培養(yǎng)條件1．實驗室的基本組成及功能，要求??(1)無菌操作窒:是進行植物材料的分離及培
3、養(yǎng)體轉(zhuǎn)移的一個重要場所。無菌操作室要求：干凈無菌、密閉、光線好。閉、光線好。一般安裝滑動門，使空氣不致流動，以防外界菌及塵埃的侵入，墻壁光滑平整，地面平坦無縫，便于清潔工作，室內(nèi)應安裝紫外燈，以便滅菌，還要有照明裝置及燈座，以備臨時增加設備之用，室內(nèi)有超凈工作臺、移動式載物臺、廣口瓶、試管、三角瓶、接種工具等。無菌操作室一般一間5-7平米。無菌室外最好設置預備室作為緩沖間，以防工作人員進入時帶進雜菌。預備室與無菌操作室之間最好用玻璃相隔，便于參觀和觀察。在預備室可放置工作服、鞋、帽等，也需要裝自來水和紫外燈。超凈工作臺:是無菌操作最常用的裝置。為保證整個無菌室的良好條件，可在
4、前一天預先用福爾馬林和高錳酸鉀熏蒸，工作臺用70％的酒精藥棉擦拭。在打開紫外燈滅菌之前把所有工作需要物品放入。(2)化學實驗室；是預先配制培養(yǎng)基的場所，一般有以下幾個部分組成；a、洗滌室，這里需要有工作臺面，上水管和下水管，水池，落水架，電源，干燥箱等b、藥品室，c、稱量室，d、培養(yǎng)基配制室，e、滅菌室。(3)培養(yǎng)室：是將接種到試管等的培養(yǎng)材料進行培養(yǎng)生長的場所。需配備有固定式培養(yǎng)架，旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)架，轉(zhuǎn)床和搖床，控溫，控光設備。(4)細胞學觀察室(5)暗室。用于試驗材料的攝影記錄。(6)馴化移栽室，用于試管移栽。2．植物組織培養(yǎng)的基本儀器及設備：(1)恒溫箱、生化培養(yǎng)箱、光照培
5、養(yǎng)箱、人工氣候箱和植物生長箱(2)烘箱(3)空調(diào)，加熱器(4)滅菌設備(5)冰箱和冰柜(6)振蕩和旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)機(7)天平(8)酸度計(9)顯微鏡(10)水溶鍋(11)蒸餾水制造裝置(12)超凈工作臺3．植物組織培養(yǎng)所需環(huán)境條件：(1)溫度，一般植物生長的適宜溫度在25+2攝氏度之間(2)光照(3)濕度，一般要求70％-80％。(4)氣體(5)培養(yǎng)基的滲透壓(6)培養(yǎng)基PH值，PH值>6．5變硬，PH值<5．0不易凝固。4．滅菌方法，高壓蒸汽滅菌應注意的問題?滅菌方法有高壓蒸氣滅菌和過濾滅菌.高壓蒸氣滅菌應注意:(1)徹底排除鍋內(nèi)冷空氣，有2種方法，一是打開放氣閥(安全閥門關閉)
6、，煮沸至大量熱蒸氣噴出后，再關閉放氣閥，二是先關閉放氣閥，待壓力上升到0．03-0．04Mpa時，打開放氣閥放出空氣，壓力降為零是再關閉放氣閥。(2)高壓蒸氣鍋不可裝的過滿，(3)使用高壓鍋必須嚴格按要求操作(4)嚴格遵守滅菌時間。高溫下易分解的培養(yǎng)基要用過濾滅菌，，某些生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及有機物如GA、CM、ZT、IAA、ABA及維生索等，遇熱是容易分解，不宜進行高壓蒸氣滅菌處理，應采用過濾滅菌。5.接種前的準備??(1)接種室消毒：定期用甲醛和高錳酸鉀混合物進行熏蒸滅菌，接種前清潔地面，打開紫外燈照射15-20分鐘，并用70％的酒精噴霧塵降空氣中的灰塵(2)超凈工作抬滅菌：用紫
7、外燈照射或用70％的酒精噴霧滅菌，用70％的酒精擦洗臺面，然后使工作臺面正常通風半小時(3)操作人員消毒，先用肥皂水洗凈雙手，操作前用70％的酒精擦洗雙手，把接種器械以70％的酒精灼燒滅菌，操作時盡量不要講話，以免噴沫造成污染。第三章培養(yǎng)基及其配置1.活性炭的作用?在培養(yǎng)基中加入活性炭只要是為了吸附培養(yǎng)基及培養(yǎng)物分泌物中的抑制物質(zhì)，還可以抑制植體褐變，防止玻璃苗的產(chǎn)生，促進培養(yǎng)物生長和分化，促進生根有一定作用。2．組織培養(yǎng)中常用的生長素有哪些?有：IAA(吲哚乙酸)，IBA(吲哚-3．丁酸)，NAb,(
