離子交換層析分離純化漆酶開題報告

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1、學(xué)院本科生畢業(yè)設(shè)計開題報告畢業(yè)論文題目離子交換層析分離純化漆酶題目類型實驗題目來源指導(dǎo)教師擬定院(系)生命科學(xué)系專業(yè)生物工程指導(dǎo)教師職稱教授姓名年級06級學(xué)號一、立題依據(jù)(國內(nèi)外研究進(jìn)展或選題背景、研究意義等)漆酶(Laccase,EC1.10.3.2)是一種含銅離子的多酚氧化酶,最早發(fā)現(xiàn)于日本紫膠漆樹Rhusvernicifera的浸出液中,現(xiàn)已證實一些高等真菌(主要是白腐真菌)也能分泌漆酶。白腐真菌是生物圈中木質(zhì)素、纖維素和半纖維素的重要降解者,其分泌的漆酶在木質(zhì)素降解過程中起著重要作用。本研究所用粗毛栓菌Trametesgallica是一種能夠分

2、泌漆酶的白腐真菌,可降解麥草木質(zhì)纖維素。要研究漆酶降解底物的機(jī)理,必須首先對漆酶進(jìn)行分離純化。目前,離子交換、凝膠過濾、電泳(包括雙向電泳)和生物質(zhì)譜技術(shù)等現(xiàn)代分離分析方法的發(fā)展,把生物大分子物質(zhì)的分離和純化工作提高到新的階段。二、研究的主要內(nèi)容及預(yù)期目標(biāo)1、本文主要測定了粗毛栓菌在一種以麥草粉為誘導(dǎo)物的培養(yǎng)液中的產(chǎn)漆酶情況,并對酶的一些基本性質(zhì)進(jìn)行了研究,以便為其在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。2、對粗毛栓菌產(chǎn)漆酶的分離純化及其部分性質(zhì)進(jìn)行初步研究。3、對粗毛栓菌漆酶進(jìn)行純化,并對性質(zhì)進(jìn)行探討,以便為木質(zhì)素的降解的研究提供一定的科學(xué)依據(jù),同時為在造紙工業(yè)

3、和環(huán)保工業(yè)上的應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。三、研究方案(思路)鹽析→離心→透析→濃縮→離子交換柱層析→酶活力及蛋白含量的測定四、論文進(jìn)度安排1、3月30日,硫酸銨鹽析。2、4月2日,酶液離心。3、4月5日,透析,除去小分子物質(zhì)。4、4月10日,測粗酶液的比活力和蛋白含量。5、4月20日,用聚乙二醇濃縮酶液。6、4月25日,離子交換柱對漆酶的柱層析。7、5月3日,收集酶液,測定的酶活力和蛋白含量8、5月17日,計算酶液回收率和純化五、主要參考文獻(xiàn)[1]ChistropherF.T.1994.TheStrutureandFunctionofFungalLacc

4、ase.Mi-crobiology.140;19-26.[2]BourbonnaisR.,PaiceM.G.,etal.1990.OxidationofNonphenicSubstra-tes.FEMSlett.267;99-103.[3]CallP.MuckeI.1997.History,OverviewandApplicationofMediatedLig-nolyticSystem.JBiotech.53:153-202.[4]BollagJ.M,ShuttleworthK.L.,etal.1988.Laccase-mediatedDetoxif

5、icationofPhenolicCompounds.ApplEnvironMiceobiol.54:3086-3091.[5]朱陶,趙永芳.2002.粗毛栓菌漆酶的分離純化及部分性質(zhì)研究.武漢大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版).209-212.[6]謝君,,任路,等.2001.漆酶高產(chǎn)菌株的誘變育種及其產(chǎn)酶條件.生物工程學(xué)報,17(5):575-578.[7]林俊芳,劉志明,陳曉陽,郭麗瓊,王 杰.2009.04.真菌漆酶的酶活測定方法評價.[8]朱陶,趙永芳.2002.粗毛栓菌漆酶的分離純化及部分性質(zhì)研究.武漢大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版).209-212.[9]Minuss

6、iR.C.,PastoreG.M.,DuranN.2002.Potentialapplicationsoflac-caseinthefoodindustry.TrendsFoodSciTech.13(6/7):205-216.[10].2005.粗毛栓菌的木質(zhì)纖維素降解酶及其及其基因克隆.博士論文(四川大學(xué))25-27.[11]汪家政,范明,2000.蛋白質(zhì)技術(shù)手冊.北京:科學(xué)出版社.[12]周易勇.1993.中國生漆.11(1):11-13.[13]王志新,施曉燕,蔡宇杰,廖祥儒.2009.白腐真菌SYBC-L2漆酶的分離純化及其在毛紡染料脫色中的應(yīng)

7、用.生物技術(shù)通報.156-161.六、指導(dǎo)教師意見可以實施。指導(dǎo)教師簽名:年月日七、院(系)審核意見負(fù)責(zé)人簽名(院系公章):年月日學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(論文)中期檢查調(diào)查表姓名學(xué)號年級、專業(yè)06級生物工程指導(dǎo)教師論文題目離子交換層析分離純化漆酶以下內(nèi)容由學(xué)生在相應(yīng)“(括號)”內(nèi)打“√”或填寫數(shù)字1、論文題目是否變動:無(√)有較小變動()完全更換()2、對課題任務(wù)要求是否明確:明確(√)較明確()不明確()3、查閱文獻(xiàn)資料:中文(7本)外文(5本)4、已調(diào)研(實習(xí))單位:(1個);調(diào)研(實習(xí))筆記:有()無(√)5、按任務(wù)要求應(yīng)做的測試與實驗:計劃做(個)已做

8、(個)6、畢業(yè)設(shè)計(論文)指導(dǎo)書:有(√)無()7、畢業(yè)設(shè)計(論文)參考書:有(√)無()8、

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