種子dna 提取方法

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1、種子DNA提取方法種子DNA的制備　　和葉片相比，大多數(shù)種子更適用于堿裂解法，然而對于富含多糖和多酚的種子，仍需要使用CTAB來抽提。這些方法對小麥和大豆種子非常有效?！　》N子的堿性裂解1.在搖床上用2％漂白液清洗種子10分鐘后，再用水清洗3次，每次5分鐘。2.用滅菌的刀片將種子剖成兩半，并放入2毫升管中。3.根據(jù)種子大?。ù蠖狗N子400μl，小麥種子100μl）加入適量的裂解溶液（100mMTris-HCl,pH9.5,1MKCl,10mMEDTA）。4.95°C孵浴10分鐘。5.吸取上清，并取適量用于擴增反應(yīng)。種子的CTAB抽提法1.在搖床上用2％漂白液清洗種子10分鐘后，再

2、用水清洗3次，每次5分鐘。2.在液氮中用無菌研杵研磨種子。用500-800μl的CTAB抽提緩沖液（2%CTAB,100mMTris-HCl,1.4MNaCl,20mMEDTA）轉(zhuǎn)移至40ml錐底管中。輕輕混勻后55°C孵浴20分鐘。3.1500g離心5分鐘。4.轉(zhuǎn)移上清至一個干凈管中，加入等體積的氯仿：異戊醇（24:1），輕輕混合2分鐘。5.15000g離心20秒。6.將上層液相轉(zhuǎn)移至已預(yù)先加入1/10體積7.5M的乙酸銨和2倍體積的冰冷乙醇的管中。7.輕輕混勻后-20°C放置1小時。8.15000g離心1分鐘，棄上清。9.用70％的乙醇清洗沉淀兩次，每次清洗混勻后15000g

3、離心30秒。10.晾干沉淀后重懸于50μl的1xTE緩沖液中11.吸取適量用于擴增反應(yīng)。試劑盒FastDNA?-96Plant/SeedDNAKit天根DP320新型植物基因組DNA提取試劑盒（可用于提取植物組織的DNA）