根系活力測定方法

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1、植物根系活力的測定（甲烯藍法）植物根系是活躍的吸收器官和合成器官，根的生長情況和活力水平直接影響地上部的營養(yǎng)狀況及產(chǎn)量水平。本實驗學(xué)習(xí)測定根系活力的甲烯藍法?！驹怼扛鶕?jù)沙比寧等的理論，植物對溶質(zhì)的吸收具有表面吸附的特性，并假定被吸附物質(zhì)在根系表面形成一層均勻的單分子層；當根系對溶質(zhì)的吸附達到飽和后，根系的活躍部分能將吸附著的物質(zhì)進一步轉(zhuǎn)移到細胞中去，并繼續(xù)產(chǎn)生吸附作用。在測定根系活力時常用甲烯藍作為吸附物質(zhì)，其被吸附量可以根據(jù)吸附前后甲烯藍濃度的改變算出，甲烯藍濃度可用比色法測定。已知1mg甲烯藍形成單分子層時覆蓋的面積為1.1m

2、2，據(jù)此可算出根系的總吸收面積。從吸附飽和后再吸附的甲烯藍的量，可算出根系的活躍吸收表面積，作為根系吸收活力的指標?！静牧稀x器與試劑】1.材料：植物根系。2.儀器及用具：分光光度計；移液管；燒杯；比色管。3.試劑：0.01mg?mL-1甲烯藍溶液；0.0002mol?L-1（0.075mg?mL-1）甲烯藍溶液?！痉椒ㄅc步驟】1.甲烯藍標準曲線的制作按表2－1用0.01mg?mL-1甲烯藍溶液配制系列標準溶液，于660nm處測定吸光度，以甲烯藍濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。表2－1???甲烯藍系列標準溶液的配制???

3、?????試劑/mL管號01234570.01mg?mL-1甲烯藍/mL0123456蒸餾水/mL10987654甲烯藍濃度/μg?mL-101234562.將待測的植物根系洗凈瀝干，浸在裝有一定量水的量筒中，用排水法測定根系的體積（或用體積計測定）。3.將0.0002mol?L-1的甲烯藍溶液（每毫升溶液中應(yīng)含0.075mg甲烯藍，為消除溶液配制和比色誤差，其含量需要重新進行比色，查標準曲線確定）分別倒入3個小燒杯中，編號，每個燒杯中溶液體積約10倍于根系的體積。準確記下每個燒杯中的溶液量。4.將洗凈的待測根系，用吸水紙小心吸干，

4、然后依次浸入盛有甲烯藍溶液的燒杯中，每杯中浸1.5min，注意每次取出時，都要使根上的甲烯藍溶液流回到原杯中去。5.從3個小燒杯中各吸取甲烯藍溶液1mL，用去離子水稀釋10倍后，于660nm處測定吸光度，根據(jù)標準曲線，查得各杯浸根后甲烯藍的濃度?！窘Y(jié)果與計算】（1）總吸收面積（m2）=[（c1—c1’）×v1+（c2—c2’）×v2]×1.1（2）活躍吸收面積（m2）=[（c3—c3’）×v3]×1.1（3）活躍吸收面積%=根系活躍吸收面積（m2）/根系總吸收面積（m2）×100%（4）比表面積（cm2·cm-3）=根系總吸收面積（

5、cm2）/根體積（cm3）式中　c：各杯未浸泡根系前的甲烯藍濃度（mg?mL-1）；c’：各杯浸泡根系后的甲烯藍濃度（mg?mL-1）；v：各杯中的溶液量（mL）。TTC法植物根系是活躍的吸收器官和合成器官，根的生長情況和活力水平直接影響地上部的生長和營養(yǎng)狀況及產(chǎn)量水平。本實驗練習(xí)測定根系活力的方法，為植物營養(yǎng)研究提供依據(jù)。一、原理?氯化三苯基四氮唑（TTC）是標準氧化電位為80mV的氧化還原色素，溶于水中成為無色溶液，但還原后即生成紅色而不溶于水的三苯甲腙，生成的三苯甲腙比較穩(wěn)定，不會被空氣中的氧自動氧化，所以TTC被廣泛地用作酶

6、試驗的氫受體，植物根系中脫氫酶所引起的TTC還原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，蘋果酸得到增強，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC還原量能表示脫氫酶活性并作為根系活力的指標。二、材料、設(shè)備儀器及試劑???（一）材料：水培或砂培小麥、玉米等植物根系。???（二）儀器設(shè)備：1）分光光度計；2）分析天平（感量0.1mg）；3）電子頂載天平（感量0.1g）；4）溫箱；5）研缽；6）三角瓶50ml；7）漏斗；8）量筒100ml；9）吸量管10ml；10）刻度試管10ml；11）試管架；12）容量瓶10ml；13）藥勺；14）石英砂適量?15）燒

7、杯10ml、1000ml。???（三）試劑：1）乙酸乙酯（分析純）；2）次硫酸鈉（Na2S2O4），分析純，粉末；3）1%TTC溶液：準確稱取TTC1.0g，溶于少量水中，定容到100ml，用時稀釋至各需要的濃度；4）磷酸緩沖液（1/15mol·L-1，pH7）。5）1mol·L-1硫酸：用量筒取比重1.84的濃硫酸55ml，邊攪拌邊加入盛有500ml蒸餾水的燒杯中，冷卻后稀釋至1000ml；6）0.4mol·L-1琥珀酸：稱取琥珀酸4.72g，溶于水中，定容至100ml即成。三、實驗步驟????1）TTC標準曲線的制作：取0.4%

8、TTC溶液0.2ml放入10ml量瓶中，加少許Na2S2O4粉搖勻后立即產(chǎn)生紅色的甲月替。再用乙酸乙酯定容至刻度，搖勻。然后分別取此液0.25ml、0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml置10ml容量瓶中，用乙酸乙酯定