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1、葉綠體中色素的提取和分離2005-3-201．實驗目的(1)初步掌握提取和分離高等植物葉綠體色素的方法。(2)了解葉綠體結構，驗證葉綠體色素的種類和各種色素的顏色。2．實驗原理葉綠體中的色素分為兩大類，一類為葉綠素，包括葉綠素a(呈藍綠色)和葉綠素b(呈黃綠色)，主要吸收太陽光中的紅光和藍紫光，另一類是類胡蘿卜素，包括胡蘿卜素(呈橙黃色)和葉黃素(呈黃色)，主要吸收藍紫光。色素吸收的光能用于光合作用。因為光合色素位于葉綠體的片層結構中，因此需要破壞葉綠體的結構，才能將色素釋放出來。需要剪碎綠葉，并用二氧化硅研磨，用丙酮將色素溶解，來提取各種色素，同時加入碳酸鈣，調節(jié)液體的pH，以防葉綠體
2、色素被破壞。葉綠體色素溶于有機溶劑形成葉綠素液，利用四種色素在層析液中溶解度不同，因而隨層析液在濾紙上擴散速度不同，使四種色素分離開來。其中，胡蘿卜素在丙酮中溶解度最高，速度最快，葉黃素和葉綠素a次之．葉綠素b溶解度最低．擴散得最慢。3．實驗步驟及方法（1）．將5g新鮮的綠色菠菜葉片剪碎，放入研缽中，并加少量二氧化硅和碳酸鈣，再加丙酮2mL，快速充分地進行研磨。(2)將研磨液倒入小玻璃漏斗中進行過濾(漏斗基部塞有少許脫脂棉)，將濾液收集到一個小試管中，用棉塞將試管口塞緊。(3)將一塊預先進行過干燥處理的定性濾紙剪成10厘米長、1厘米寬的濾紙條。將濾紙條一端剪去兩角。并在距這端1厘米處用鉛
3、筆畫一橫線。(4)用毛細吸管吸取少量濾液，沿鉛筆處小心均勻地劃出一條濾液細線(越細，效果越好)。待濾線干燥后，再重復劃2—3次。(；)將3mL層析液倒人燒杯中，將濾紙條』：畫有濾液細線的一端朝下，微斜地靠著燒杯內壁輕輕插入到層析液中，注意不要使層析液沒過濾紙上的濾液細線，然后用培養(yǎng)皿蓋上燒杯。(6)幾分鐘后，會觀察到濾紙條上從上到下依次出現(xiàn)四條色素帶：胡蘿卜素(橙黃色)；葉黃素<黃色)；葉綠素a(藍綠色)葉綠素b(黃綠色)。4．注意事項(1)層析時，濾液細線不能浸入層析液中。(2)色素見光易分解，實驗后濾紙條應避光保存。5．思維拓展(1)層析法是利用不同物質的溶解性分離物質的方法。(2)
4、利用紙層析法，將物質分離的同時。還可確定不同物質成分的比例、顏色。含量越多，層析帶越寬；物質在層析液中的溶解度越大，溶解速度越快，在濾紙上的擴散速度越快，層析帶位置越高。例1．做色素提取和分離實驗的正確裝置是圖中()答案——D例2．在圓形濾紙的中央，滴上葉綠體的色素濾液進行色素分離，可看到近似同心環(huán)狀的四個色素圈，排列在最外的一個呈<)A。藍綠色B。黃綠色C．黃色D．橙黃色答案——D例3．在做植物實驗暗室內，為了盡可能地降低植物的光合作用的強度，最好用()A。紅光燈B。綠光燈C。白熾燈D。藍光燈答案——B例4．下列關于“葉綠體色素提取和分離”的實驗描述中，不屬于實驗要求的是()A。提取高
5、等植物葉綠體中的色素B。用紙層析法分離色素C。驗證葉綠體中所含色素的種類D。了解各種色素的吸收光譜答案一一D例5?！叭~綠體中色素的提取和分離實驗”(1)在“葉綠體色素的提取和分離實驗”中，將葉綠體色素進行分離的方法名稱是：。(2)某學生在實驗過程中將劃有濾液細線的濾紙條(已重復幾下劃線)插入層析液，幾分鐘后取出觀察，發(fā)現(xiàn)在濾紙條上無色素分帶現(xiàn)象，而其他用同一濾液做實驗的同學的濾紙條上卻色素分帶明顯，其實驗失敗的原因最可能是·(3)觀察葉綠體色素的熒光現(xiàn)象，可將盛有葉綠體色素溶液的試管，讓光線照射。如果置葉綠體色素溶液于光下，則呈綠色；如置于光下，則溶液呈現(xiàn)紅色。答：．(1)紙層析法(2)
6、濾液細線浸入層析液，被層析液溶解(3)透射反射練習：D1．下列不屬于葉綠素功能的是A.吸收太陽光能B.利用光能使水分解C.利用光能合成ATPD．固定和還原二氧化碳C2．在進行葉綠素提取和分離的實驗時，不能讓層析液沒及濾液細線的原因是A.濾紙條上幾種色素會擴散不均勻而影響結果B.濾紙條上濾液細線會變粗而使色素太分散C.色素會溶解在層析液中而使結果不明顯D.濾紙條上的幾種色素會混合起來D3．下列哪組色素是葉綠體和有色體都含有的A.葉綠素和類胡蘿卜素B.葉綠素和葉黃素C．葉綠素和胡蘿卜素D．葉黃素和胡蘿卜素(D)這里考的是關于質體的知識點。質體是存在于真核細胞內的一種細胞器。質體由兩層薄膜包圍
7、，可以隨細胞的生長而增大，是植物細胞合成代謝中最主要的細胞器。根據(jù)質體內所含的色素和功能的不同，質體可分為白色體、有色體和葉綠體。白色體不含色素，分布在植物體內不見光的部位，可以貯藏淀粉、蛋白質和脂肪。有色體中含有葉黃素、胡蘿卜素和花青素，分布在果實和花瓣的細胞里，使果實和花瓣呈現(xiàn)黃色或黃橙色。葉綠體中含有葉綠素a、葉綠素b、葉黃素和胡蘿卜素。因此，有色體和葉綠體共有的是葉黃素和胡蘿卜素。）4．把下列藥物選人相應的作用項內①保護葉綠
