資源描述：
《嗜水氣單胞菌的分離與16srdna鑒定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，JournalofAnhuiAgri．Sci．2014，42(13):3907－3910責(zé)任編輯陳玉敏責(zé)任校對(duì)李巖嗜水氣單胞菌的分離與16SrDNA鑒定1111112*柳桐，王生奎，孫亭亭，馬志亮，秦波，張以芳，信愛(ài)國(guó)(1．云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南昆明650201;2．云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明650224)摘要［目的］分離并鑒定魚(yú)嗜水氣單胞菌，并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育分析。［方法］從云南某魚(yú)場(chǎng)采集發(fā)病魚(yú)的病變組織進(jìn)行細(xì)菌分離與培養(yǎng)，并對(duì)分離菌株進(jìn)行初步鑒定、16SrDNA鑒定和系統(tǒng)發(fā)育分析。［結(jié)果］分離培養(yǎng)到1
2、株細(xì)菌，命名為Ah1305。經(jīng)表型鑒定、生化試驗(yàn)及16SrDNA系統(tǒng)發(fā)育分析，鑒定為嗜水氣單胞菌。［結(jié)論］該研究可為快捷、準(zhǔn)確檢測(cè)魚(yú)嗜水氣單胞引起的疾病提供參考。關(guān)鍵詞嗜水氣單胞菌;分離鑒定;16SrDNA中圖分類(lèi)號(hào)S182;Q93－331文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517－6611(2014)13－03907－04Isolationand16SrDNAIdentificationofAeromonashydrophilaLIUTong，XINAi-guoetal(CollegeofAnimalScienceandTechnology，
3、YunnanAgriculturalUniversity，Kunming，Yunnan650201;YunnanAcademyofAnimalHusbandryandVeterinarySciences，Kunming，Yunnan650224)Abstract［Objective］TheaimwastoisolateandidentifyAeromonashydrophilaandestablishthephylogeny．［Method］Lesiontissueoffishwascollectedfromacertainfar
4、minYunnanProvince，andthentheisolatedstrainwasidentifiedbypreliminaryidentification，16SrDNAiden-tificationandphylogeneticanalysis．［Ｒesult］ThebacteriawereisolatedandnamedasAh1305．Throughthemorphologicalidentification，bio-chemicaltestand16SrDNAphylogenyanalysis，itwasiden
5、tifiedasAeromonashydrophila．［Conclusion］ThestudycanprovidereferenceforquickandaccuratelytestthediseasecausedbyAeromonashydrophila．KeywordsAeromonashydrophila;Isolationandidentification;16SrDNA致病性嗜水氣單胞菌(Aeromonashydrophila)屬于氣單(DP2001)、多功能DNA純化回收試劑盒(DP1501)，購(gòu)自胞菌科(Aermo
6、nadaceae)氣單胞菌屬(Aeromonas)，是革蘭氏BIOTEKE公司。TaKaＲarTaqDNA酶、DL2000Marker，購(gòu)自陰性短桿菌，兩端鈍圓，直或略彎，單個(gè)或成雙排列，有極端寶生物工程(大連)有限公司。凝膠成像儀、PCＲ擴(kuò)增儀，購(gòu)單鞭毛，固體培養(yǎng)基上有周鞭毛，無(wú)莢膜，不形成芽孢，最適自BIO－ＲAD公司，電泳儀購(gòu)自北京六一儀器廠。生長(zhǎng)溫度為28℃。嗜水氣單胞菌普遍存在于淡水、海水、污1．2方法泥、淤泥以及土壤中，是一種人畜共患病的病原?；疾◆~(yú)出1．2．1分離培養(yǎng)。將病魚(yú)體表消毒，無(wú)菌取病變組織，剪碎現(xiàn)爛尾、鰭充
7、血，導(dǎo)致出血性敗血癥和流行性潰瘍綜合癥研磨。用無(wú)菌生理鹽水對(duì)病料進(jìn)行10倍稀釋?zhuān)謩e接種于［1－2］(EUS)等癥狀，近些年來(lái)有大量的報(bào)道表明嗜水氣單胞TSA培養(yǎng)基和血液瓊脂培養(yǎng)基，置于28℃培養(yǎng)24h。觀察菌還可以引發(fā)人類(lèi)的腹瀉、中毒病、外傷性感染以及敗血癥菌落形態(tài)，挑取灰白色發(fā)生溶血的可疑單菌落進(jìn)行革蘭氏染［3］等病癥，其致病作用已引起公眾的關(guān)注，該菌在國(guó)外被作色。將染色中有陰性短桿菌的菌落在TSA培養(yǎng)基和血液瓊［4－5］為腹瀉病原菌進(jìn)行檢測(cè)。致病菌株除感染魚(yú)及人類(lèi)以脂培養(yǎng)基上分離與純化。［6］外，還可以感染多種動(dòng)物(如兩棲類(lèi)
8、、爬行類(lèi)、鳥(niǎo)類(lèi)等)，給1．2．2形態(tài)觀察。將分離純化后的細(xì)菌按照常規(guī)方法進(jìn)行養(yǎng)殖業(yè)和公共衛(wèi)生帶來(lái)了巨大損失。革蘭氏染色并鏡檢。筆者從云南某發(fā)病魚(yú)場(chǎng)送檢病料中分離到1株細(xì)菌，并1．2．3生理生化試驗(yàn)。將純培養(yǎng)的分離菌接種于生化培養(yǎng)對(duì)其進(jìn)行表型鑒定及1
