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《津田蕪菁泛素化相關(guān)蛋白基因brrub1的克隆及表達分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、作物學報ACTAAGRONOMICASINICA2015,41(1):66?71http://zwxb.chinacrops.org/ISSN0496-3490;CODENTSHPA9E-mail:xbzw@chinajournal.net.cnDOI:10.3724/SP.J.1006.2015.00066津田蕪菁泛素化相關(guān)蛋白基因BrRUB1的克隆及表達分析*閆海芳王斐李橋李鴻昌楊虎城東北林業(yè)大學生命科學學院,黑龍江哈爾濱150040摘要:RUB1(relatedtoubiquitin1)是植物和酵母中一種泛素類似蛋白質(zhì),是Cullin家族的
2、一個成員。為闡釋津田蕪菁BrRUB1基因的表達特性,本研究克隆了津田蕪菁RUB1基因的全長cDNA序列,命名為BrRUB1,GenBank登錄號為KF501173。其ORF全長471bp,編碼156個氨基酸;亞細胞定位結(jié)果顯示,BrRUB1-GFP定位于細胞核,表明BrRUB1蛋白可能在細胞核中發(fā)揮其功能。qRT-PCR檢測BrRUB1的表達表明,該基因表達量在花蕾中最高,花瓣中次之,具有組織特異性。而且BrRUB1在蕪菁根皮中的表達受長波紫外線(UV-A)誘導。關(guān)鍵詞:津田蕪菁;RUB1;基因克隆;表達分析CloningandExpressio
3、nAnalysisofUbiquitin-RelatedProteinGeneBrRUB1inBrassicarapaL.cv.Tsuda*YANHai-Fang,WANGFei,LIQiao,LIHong-Chang,andYANGHu-ChengCollegeofLifeScience,NortheastForestryUniversity,Harbin150040,ChinaAbstract:RUB1(relatedtoubiquitin1)isaubiquitin-likeproteininplantandyeast,belongtoCu
4、llinfamily.ToelucidatetheexpressionfeatureofRUB1inTsuda,weisolatedcDNAofRUB1genefromthisplantandnamedBrRUB1(GenBankaccessionNo.KF501173).ThecDNAofBrRUBIwas670bpinfulllengthanditsopenreadingframe(ORF)was471bpinfulllength,encoding157aminoacids.BrRUB1-GFPwaslocalizedtonucleus,in
5、dicatingthatBrRUB1mayplayanimportantroleinthenucleus.qRT-PCRanalysisshowedthatBrRUB1expressedhighlyinbudandlessinpetal,showingtissuespecificity.Furthermore,theexpressionofBrRUB1wasinducedbyUV-Alightintheswollenhypocotyls.Keywords:Brassicarapa;RUB1;Genecloning;Expressionanalys
6、isRUB1(relatedtoubiquitin1)是植物和酵母中一生長發(fā)育和形態(tài)建成外,還在包括植物膜受體的內(nèi)種類似泛素分子的蛋白質(zhì),在哺乳動物中又稱為在化、染色質(zhì)異構(gòu)、轉(zhuǎn)錄激活以及DNA修復、植物[4-7]NEDD8蛋白(neuralprecursorcell-expressed,deve-應(yīng)對干旱和冷害等非生物脅迫反應(yīng)中發(fā)揮功能。lopmentallydown-regulatedprotein)。RUB1是泛素化津田蕪菁(BrassicarapaL.cv.Tsuda)膨大的肉質(zhì)根不E3連接酶家族Cullin家族的一個成員,它可以對蛋見光部
7、分呈白色,無花青素的合成;而見光部分呈紫白質(zhì)肽鏈進行修飾,也可以被參與調(diào)控植物體感受色,有花青素的合成。單色光中只有在UV-A誘導下[8]激素信號的蛋白AXR1(auxinresistant1)和ECR1可合成花青素。本文根據(jù)已經(jīng)報道的擬南芥序列,(erythrocytecomplementreceptortype1)以異源二聚通過RT-PCR結(jié)合RACE技術(shù)克隆了蕪菁BrRUB1基體的形式構(gòu)成RUB激活酶,與Cullin蛋白內(nèi)保守的因,并對該基因的定位和表達進行研究,以期為深入賴氨酸殘基結(jié)合,正調(diào)控Cullin蛋白組成的E3復合探討RUB1在蕪
8、菁中的功能提供參考依據(jù)。體,加強E3復合體和Ub-E2復合體的穩(wěn)定性,影響1材料與方法生物體內(nèi)多種調(diào)節(jié)蛋白的功能,從而調(diào)控植物體生長發(fā)育
