黃瓜擴張素蛋白基因csexpb1的克隆及表達分析

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1、園藝學報,2015,42(4):679–688.ActaHorticulturaeSinicadoi:10.16420/j.issn.0513-353x.2014-0958;http://www.ahs.ac.cn679黃瓜擴張素蛋白基因CsEXPb1的克隆及表達分析**孟永嬌,李季,徐建,張開京,婁群峰,陳勁楓(作物遺傳與種質創(chuàng)新國家重點實驗室,南京農業(yè)大學園藝學院,南京210095)摘要:基于黃瓜果實轉錄組學研究,篩選并克隆了一個擴張素蛋白(β-expansin)基因CsEXPb1。蛋白序列同源比對發(fā)現CsEXPb1蛋白是一類鈣調素類似蛋白(C

2、almodulin-likeProtein,CML),與甜瓜、草莓及番茄擴張素蛋白基因具有較高的相似性;ExPasy分析發(fā)現CsEXPb1為親水性蛋白,亞細胞定位分析證明該蛋白廣泛分布在細胞質以及細胞核結構中;qRT-PCR分析發(fā)現CsEXPb1無論是在授粉坐果還是單性結實坐果過程中皆上調表達,而在不授粉敗育的果實中下調表達;qRT-PCR也表明CsEXPb1的表達受到生長素、細胞分裂素和赤霉素等單性結實誘導激素的正向調控,推測CsEXPb1與黃瓜坐果有關,可能參與了激素誘導的單性結實過程。關鍵詞:黃瓜;擴張素蛋白;CsEXPb1基因;表達分析;坐

3、果;單性結實中圖分類號:S642.2文獻標志碼:A文章編號:0513-353X(2015)04-0679-10CloningandExpressionAnalysisoftheExpansinGeneCsEXPb1inCucumber**MENGYong-jiao,LIJi,XUJian,ZHANGKai-jing,LOUQun-feng,andCHENJin-feng(StateKeyLaboratoryofCropGeneticsandGermplasmEnhancement,CollegeofHorticulture,NanjingAgric

4、ulturalUniversity,Nanjing210095,China)Abstract:Basedontranscriptomestudyofcucumberfruitset,aβ-expansingene:CsEXPb1wasclonedandinvestigatedinpresentstudy.HomologBLASTshowedthatCsEXPb1isbelongedtoCalmodulin-likeProteinfamily,andhashighsimilaritieswiththeexpansingenesofCucumismel

5、o,Fragariavescasubsp.vescaandSolanumlycopersicum.TheExPasyanalysisshowedthatCsEXPb1isahydrophilicprotein;ThesubcellularlocalizationanalysisindicatedthatCsEXPb1localizedinplasmamembrane,cytoplasmandnucleus;qRT-PCRanalysisfoundthatCsEXPb1wasup-regulateexpressedduringpollinationa

6、ndparthenocarpyfruitsetincucumber,whiledown-regulatedduringfruitabortion;qRT-PCRalsoshowedthatthetranscriptionofCsEXPb1couldbecis-regulatedbyfruit-setinducinghormonesi.e.auxin,cytokininandgibberellin.Therefore,itwasspeculatedthatCsEXPb1maybecloserelatedtohormoneinducedpartheno

7、carpicfruitsetofcucumber.Keywords:cucumber;expansin;CsEXPb1gene;expressionanalysis;fruitset;parthenocarpy收稿日期:2014–12–15;修回日期:2015–03–19基金項目:國家自然科學基金重點項目(31430075);國家重點基礎研究發(fā)展計劃(‘973’)項目(2012CB113904);國家‘863’項目(2012AA100202);農業(yè)部行業(yè)專項(201403032);國家自然基金青年基金項目(31301781);江蘇省青年基金項目(B

8、K20130674)*通信作者Authorforcorrespondence(E-mail:liji1981@njau.e

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