細(xì)胞膜滲透性反應(yīng)

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1、細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告題目：細(xì)胞膜滲透性反應(yīng)姓名：余振洋學(xué)號：200900140156系年級：09級生科3班時(shí)間：2011/3/17一、【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、了解細(xì)胞膜的滲透性及各類物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度。二、【實(shí)驗(yàn)材料】1、器材顯微鏡，離心機(jī)，離心管，試管，滴管，載玻片，蓋玻片2、試劑0.85％NaCl溶液、0.0085％NaCl溶液、0.8mol/L甲醇、0.8mol/L丙三醇、6％葡萄糖溶液、2％TritonX-100三、【實(shí)驗(yàn)原理】將紅細(xì)胞放入數(shù)種等滲溶液中，由于紅細(xì)胞對各種溶質(zhì)的透性不同，有的溶質(zhì)可以滲入，有的溶質(zhì)不能滲入，滲入的溶質(zhì)能夠提高紅細(xì)胞的滲透壓，所以促使水分進(jìn)入細(xì)胞，

2、引起溶血。由于溶質(zhì)透入速度互不相同，因此溶血時(shí)間也不同。四、【操作步驟】1、取雞血2-3ml，加0.85％NaCl溶液4ml，在1000r/min條件下離心5分鐘，重復(fù)2~3次（RBC壓積量應(yīng)不少于0.3ml，否則應(yīng)補(bǔ)加雞血）2、將上述離心的紅細(xì)胞按沉淀量配成50％濃度。（總體積量應(yīng)不少于0.6ml）3、每組取6支試管，分別加入如下溶液各3ml○10.85％NaCl溶液○20.0085％NaCl溶液○30.32mol/L甲醇○40.32mol/L丙三醇○56％葡萄糖溶液○61.5％TritonX-1004、向上述6支試管中分別加入50％紅細(xì)胞懸液1滴，輕輕混勻，觀察各試管是否

3、有溶血現(xiàn)象發(fā)生（觀察時(shí)間1小時(shí)）。記錄溶血時(shí)間并于顯微鏡下觀察各溶液中細(xì)胞。五、【試驗(yàn)結(jié)果及繪圖】結(jié)果：表1不同低滲溶液下的溶血現(xiàn)象試管編號是否溶血時(shí)間結(jié)果分析該溶液濃度與雞紅細(xì)○10.85％NaCl溶液否胞內(nèi)細(xì)胞液濃度相+1滴紅細(xì)胞懸液當(dāng)，為等滲溶液，不發(fā)生溶血該濃度溶液為低滲溶○20.0085％NaCl溶液是5min液，使細(xì)胞吸水脹裂+1滴紅細(xì)胞懸液小分子、親脂性的非○30.32mol/L甲醇極性分子甲醇為低滲+1滴紅細(xì)胞懸液是46s溶液，容易溶解于脂雙層，并迅速透過，提高紅細(xì)胞的滲透壓，促使水分進(jìn)入細(xì)胞，引起溶血不帶電荷、極性分子○40.32mol/L丙三醇的丙三醇溶液

4、為低滲+1滴紅細(xì)胞懸液是31min溶液，但分子體積不夠小，雖然能透過脂雙層引起溶血，但時(shí)間較長葡萄糖雖然不帶電○56％葡萄糖溶液荷，為極性分子，但+1滴紅細(xì)胞懸液不完全溶血分子體積較大，可以跨膜擴(kuò)散運(yùn)輸，但比較困難該試劑是一種表面活○61.5％TritonX-100性劑，可抽取膜質(zhì)蛋+1滴紅細(xì)胞懸液是50s白質(zhì)，使細(xì)胞通透性增強(qiáng)，快速溶血，并使溶液變渾濁繪圖：○1○2○3○4○5○6血細(xì)胞液和各試劑混合后外觀變化（從左到右依次為1-6號試管）0.85％NaCl溶液內(nèi)的血細(xì)胞（10x10）0.0085％NaCl溶液內(nèi)血細(xì)胞（10x40）0.32mol/L甲醇溶液內(nèi)血細(xì)胞（10x

5、40）0.32mol/L丙三醇溶液內(nèi)血細(xì)胞（10x40）6％葡萄糖溶液內(nèi)血細(xì)胞（10x40）由于技術(shù)原因，1.5％TritonX-100溶液內(nèi)的血細(xì)胞無法觀察到六、【結(jié)果分析與討論】1、從1、2兩個(gè)試管，即0.85％NaCl溶液和0.0085％NaCl溶液的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得，血細(xì)胞在低滲溶液中容易發(fā)生溶血。同時(shí)，因?yàn)閮山M實(shí)驗(yàn)所得時(shí)間差距極大，也可得出：細(xì)胞膜內(nèi)外溶液濃度差越大，溶血越容易發(fā)生。2、在3號試管，即0.32mol/L甲醇溶液中，溶血時(shí)間極快，但在顯微鏡下并未觀察到明顯細(xì)胞體積變小且邊緣出現(xiàn)褶皺的現(xiàn)象，經(jīng)分析得：紅細(xì)胞在甲醇溶液中溶血速度極快，必須在滴血立刻制片，否則血

6、細(xì)胞便會破碎，無法觀察。同時(shí)也可以得出：親脂性的、小分子的非極性分子極易穿過細(xì)胞膜。3、在5號試管，即6mol/L葡萄糖溶液中，幾乎不發(fā)生溶血，得出：分子體積大的極性分子不易進(jìn)入細(xì)胞。4、在6號試管，即TritionX-100溶液，為一種表面活性劑，可抽取膜質(zhì)蛋白質(zhì)，使細(xì)胞通透性增強(qiáng)，快速溶血，產(chǎn)生絮狀沉淀，使溶液變渾濁。該反應(yīng)也極快發(fā)生，必須在滴血立刻制片，否則血細(xì)胞便會破碎，無法觀察。附：溶血結(jié)果的判斷（1）不溶血：液體分2層，上層淺黃色透明，下層紅色不透明，鏡檢紅細(xì)胞完好。（2）不完全溶血：溶液混濁，上層變紅色，鏡檢有部分紅細(xì)胞破裂。（3）完全溶血：液體變紅而且透明，鏡

7、檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全成碎片。