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《定喘湯對哮喘大鼠肺組織和胸腺神經(jīng)生長因子表達的影響 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、定喘湯對哮喘大鼠肺組織和胸腺神經(jīng)生長因子表達的影響李杰,伍參榮,陳伶利,李繼紅,姜曉,陳北陽【摘要】目的探討定喘湯對哮喘大鼠肺組織及胸腺神經(jīng)生長因子(NGF)表達的影響。方法將,Changsha410007,ChinaAbstract：ObjectiveToexploretheeffectofDingchuantangontheexpressionofNGFinthelungandthymusofasthmaticrats.MethodsThirtytlydividedintocontrolgroup,asthmaticgroup,Dingchuantanggroupa
2、ndBeclomethasonegroup,8ratsforeachgroup.Asthmaticmodeladeexceptthecontrolgroup.ThechangeofNGFexpressioninthelungandthymuseansofimmunohistochemistry.ResultsTheexpressionofNGFinthelungandthymusofasthmaticgroupuchhigherthanthatofcontrolgroupandthatofDingchuantanggroupuchloaticgroup.Conclusi
3、onOver-expressionofNGFmightbeinvolvedinthepathogenesisofbronchialasthma,andinhibitionofNGFexpressionbyDingchuantangmaybeoneofthemechanismsinthetreatmentofasthma. Keyus；asthma；rat支氣管哮喘是一種嚴(yán)重威脅人類健康的慢性呼吸道疾病,近年來其發(fā)病率和病死率呈上升趨勢。在哮喘發(fā)病機制中,免疫細胞與神經(jīng)元之間存在著廣泛的聯(lián)系,而神經(jīng)生長因子(NGF)則可能是參與這一免疫神經(jīng)機制的重要介質(zhì)。中醫(yī)藥防治本病
4、具有較好的臨床療效,但其治療機理研究尚不深入。本研究通過觀察哮喘大鼠肺組織和胸腺NGF表達及定喘湯對NGF表達的影響,探討NGF在哮喘發(fā)病機制中的作用及定喘湯的平喘機制,為哮喘的治療提供新的依據(jù)?！ ?實驗材料 1.1動物a公司產(chǎn),北京天象人生物工程公司分裝進口；NGF免疫組化試劑盒,武漢博士德生物工程公司提供。 1.3儀器超聲霧化器為北京亞都YD-800型；多功能酶標(biāo)儀為華東電子集團公司?！ ?實驗方法 2.1分組和造模按隨機原則分為正常對照組、模型組、定喘湯組、必可酮組,每組8只。參照文獻[1]方法,腹腔注射1mL(50μg)OVA和10μg氫氧化鋁懸液,1周
5、后再注射1次,第4日后用10%OVA霧化吸入(每日1次,每次8～10min,共12次),激惹大鼠。正常對照組吸入生理鹽水,腹腔注入10μg氫氧化鋁懸液。 2.2給藥與標(biāo)本采集定喘湯組從第1次誘喘后每日用定喘湯的水煎液噴霧,每日2次。必可酮組每日用必可酮噴霧,每日2次。正常對照組用生理鹽水灌胃。從首次誘喘到治療結(jié)束共15d,將大鼠用烏拉坦(1g/kg)肌肉注射麻醉后,常規(guī)消毒。沿頸正中線剪開皮膚,切開氣管,結(jié)扎右支氣管,插管,用生理鹽水灌洗4次,每次3mL,回收全部的支氣管肺泡灌洗液(BALF)6.5mL,4℃條件下,1000r/min離心10min,去上清液,-70℃
6、保存。取胸腺和肺組織保存待用?！ ?.3觀察指標(biāo) 2.3.1支氣管肺泡灌洗液中嗜酸粒細胞計數(shù) 采用瑞氏姬姆沙染色,鏡下計數(shù)200個白細胞數(shù)中的嗜酸粒細胞(EOS),求出百分率,進行統(tǒng)計分析?！ ?.3.2肺組織和胸腺神經(jīng)生長因子的測定 用4%多聚甲醛0.1mL/molPBS灌流固定后取下肺組織和胸腺,固定24h后,移至30%的蔗糖緩沖液中,至標(biāo)本沉底,OCT包埋,恒冷箱連續(xù)切片(片厚16μm),冷風(fēng)干燥后進行免疫組化染色(SABC法)。用圖像分析系統(tǒng)對實驗結(jié)果進行分析,計算光密度值。 3統(tǒng)計學(xué)方法 用SPSS14.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析；多樣本均數(shù)比較及
7、兩兩比較分別采用F檢驗和t檢驗?！ ?結(jié)果 (見表1、表2)表1定喘湯對大鼠BALF中EOS數(shù)的影響(略)注：與模型組比較,*P＜0.05(下同)表2各組大鼠肺組織和胸腺NGF陽性反應(yīng)產(chǎn)物平均光密度值比較(略) 5討論支氣管哮喘是由肥大細胞、EOS和T細胞等多種炎性細胞及介質(zhì)作用引起的呼吸系統(tǒng)疾病,其主要特征為慢性氣道炎癥、氣道反應(yīng)性增高以及間歇性可逆行的氣道堵塞。NGF是神經(jīng)元細胞生長和分化的營養(yǎng)因子,近來發(fā)現(xiàn)NGF能影響機體的免疫系統(tǒng),與變態(tài)反應(yīng)性和炎癥性疾病的發(fā)病有關(guān)[2]。NGF的產(chǎn)生一般由神經(jīng)系統(tǒng)細胞產(chǎn)生,但在炎癥條件下,大
