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1、VEGF在胰腺缺血再灌注損傷中的作用:湯禮貴,宋勝江,安慧敏,蔡小芳,朱華【摘要】目的:探討血管內皮生長因子(VEGF)在缺血再灌注損傷(IRI)胰腺組織中的表達及其意義。方法:將雄性SD大鼠32只隨機分為4組(n=8)。A組為對照組;B組、C組和D組分別通過鉗閉大鼠腹腔干和腸系膜上動脈15、30和60min造成胰腺缺血,然后再灌注6h建立缺血再灌注損傷模型。對各組胰腺組織進行濕干質量比(ethods:ThirtytaleSDratslydividedintofourgroups(n=8).Gro
2、upAservedascontrolgroup,GroupsB,CandDins,30minsand60minsofischemiarespectivelybyclampingofceliacarteryandsuperiormesentericartery,thenreleasedfor6hourstoproduceischemiareperfusioninjurymodel.Ratsovedforhistologicalinjuryevaluationanddetectionofmunohis
3、tochemicalstainingofVEGF.Results:TheexpressionofVEGFinpancreasincreasedafterischemiareperfusioninjury.Thereongtheisletcells,stromalvascularepithelialcells,acinarandductepithelialcellsofpancreas(P<0.01).Pathologicalscoreandmunohistochemicalstainingo
4、fVEGFintheisletcells(P<0.01)andshoalvascularepithelialcells(P<0.01).Conclusion:TheedemaofthepancreascausedbyischemiareperfusioninjurymayberelatedtotheincreasedexpressionofVEGF. Keyia/reperfusioninjury;pancreas 缺血再灌注損傷(ischemiareperfusioninjury
5、,IRI)是引起胰腺移植后早期功能喪失的主要原因之一。研究發(fā)現血管內皮生長因子(vascularendothelialgrog/kg腹腔注射麻醉。其中B組、C組和D組分別用血管夾阻斷大鼠腹腔干及腸系膜上動脈15、30和60min,然后再灌注6h,脊椎脫臼法處死大鼠,取胰腺組織標本;A組為對照組,僅解剖顯露大鼠腹腔干及腸系膜上動脈,6h后取胰腺組織標本?! ?.3觀察指標和檢測方法①胰腺組織標本分成兩份,其中一份用電子分析天平稱濕重,置90℃電熱干燥箱內烘烤72h后再稱干重,并計算胰腺濕/干質量比(
6、W/D)。另一份用10%中性福爾馬林磷酸緩沖液4℃固定24h,石蠟包埋切片。②胰腺切片常規(guī)行蘇木素-伊紅染色。采用雙盲法由病理科醫(yī)師在光鏡下觀察胰腺病理變化,根據胰腺病理評分標準[2]對胰腺組織損傷程度進行評分。③采用免疫組織化學方法檢測胰腺組織VEGF蛋白表達情況。每張切片隨機檢查10個高倍視野,按陽性細胞計數分值和染色強度分值的乘積記分[3]。其中,陽性細胞數計分為:0(≤5%);1(5%~25%);2(25%~50%);3(50%~75%);4(≥75%)。染色強度計分為:1(弱陽性);2(
7、中度陽性);3(強陽性)。 1.4統(tǒng)計學處理方法胰腺組織的病理評分、VEGF染色評分及濕干質量比(W/D)比較用方差分析,組間均數的兩兩比較方差齊用LSD檢驗,方差不齊用Dunt’sT3檢驗。VEGF染色評分與病理評分、濕干質量比(W/D)的相關性檢驗采用Pearson法?! ?結果 2.1光鏡下病理變化A組:胰腺細胞形態(tài)結構正常,未見炎性細胞浸潤。B組:見胰腺細胞輕度腫脹,間質輕度水腫,無明顯細胞結構破壞及炎性細胞浸潤。C組:見胰腺細胞腫脹明顯,空泡變性,胰腺間質、被膜下明顯水腫,血管充血、
8、紅細胞溢出,可見炎性細胞浸潤,未見壞死細胞。D組:見胰腺組織局灶性壞死,間質出血明顯,大量炎性細胞浸潤,見圖1。胰腺組織病理評分各組間兩兩比較差異均有顯著性(均P<0.01),見表1?! ?.2胰腺組織W/D比值IRI胰腺組織的W/D比值隨著缺血時間延長而增大,除B組與A組相比較差異無顯著性(P>0.05)外,各組間相互兩兩比較差異均有顯著性(均P<0.01),見表1。 2.3VEGF免疫組化VEGF表達陽性細胞胞漿被染成黃色或棕黃色,呈點狀或團塊狀分布。對照組