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《氮源和碳源對冬凌草愈傷組織生長及迷迭香酸的積累的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、氮源和碳源對冬凌草愈傷組織生長及迷迭香酸的積累的影響：李漢偉，蘇秀紅，董誠明，王偉麗【摘要】目的研究碳源、氮源對冬凌草愈傷組織生長及其內(nèi)迷迭香酸積累的影響。方法改變培養(yǎng)基中蔗糖濃度和碳源種類，考察不同碳源及其濃度對愈傷組織生長和迷迭香酸積累的影響。在總氮源不變的情況下改變NO3-/NH4+的比例，考察不同NO3-/NH4+比例對愈傷組織生長和迷迭香酸積累的影響。結(jié)果蔗糖是冬凌草愈傷組織培養(yǎng)中的最佳的碳源，其濃度為3%時，有利于冬凌草愈傷組織的生長和迷迭香酸的積累;NO3-/NH4+比例為1∶1時
2、，愈傷增值倍數(shù)最高；NO3-/NH4+比例2∶1時，迷迭香酸的積累量最大。結(jié)論實驗確定了冬凌草愈傷組織培養(yǎng)的最佳碳源種類、濃度及氮源比例,表明不同碳源、氮源對冬凌草愈傷組織生長和次生代謝物合成有顯著影響。【關(guān)鍵詞】冬凌草；愈傷組織；碳源；氮源；迷迭香酸 Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofcarbon,nitrogenongroarinicacidaccumulationofRabdosiarubescens(Henmsl.)Haracallus.Meth
3、odsThecallusgroarinicacidaccumulationanipulationofconcentrationsucrose,carbonandnitrogen.ResultsSucrosearinicacidaccumulation.30g/Lsucroseultiplicationandrosmarinicacidaccumulated.Themaximumcallusmultiplication,contentofaccumulatedrosmarinicacideleve
4、l.ConclusionVariouscarbon,nitrogenhavesignificanteffectsongroarinicacidaccumulationofRabdosiarubescens(Henmsl.)Haracallus.Thebestcarbonsourceanditsconcentration,nitrogensourcesforthegrosl.)Haracallusandthesynthesisofsecondarymetaboliteed. Keysl.)Har
5、a;callus;Carbon;Nitrogen;Rosmarinicacid 冬凌草Rabdosiarubescens(Henmsl.)Hara為唇形科香茶菜屬多年生植物,其入藥部位是地上部分。近年來許多學(xué)者對冬凌草化學(xué)成分、藥理作用及臨床療效進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其中的主要抗癌、抗菌活性成分為二萜類化合物（冬凌草甲素、冬凌草乙素）和多酚類化合物迷迭香酸，并對其作了較深入的研究［1,2］。國內(nèi)學(xué)者在冬凌草組織培養(yǎng)方面也開展了相關(guān)工作［3～5］，但均不夠系統(tǒng)和完善，且未對影響其愈傷培養(yǎng)物生長及其內(nèi)次
6、生代謝產(chǎn)物積累的因素進(jìn)行研究。迷迭香酸作為冬凌草水溶性部分中主要的有效成分，具有較好的抗菌、消炎、止痛的功效,為此，筆者在本實驗室對冬凌草離體培養(yǎng)研究的基礎(chǔ)上［6,7］，對影響其愈傷組織生長和代謝產(chǎn)物積累的碳、氮源種類及蔗糖濃度進(jìn)行了研究，并考察了這些因素對其內(nèi)主要次生代謝產(chǎn)物－迷迭香酸和冬凌草甲素的影響(因在整個愈傷組織培養(yǎng)過程中未檢測到冬凌草甲素,故其積累規(guī)律在文中未進(jìn)行探討)，為進(jìn)一步提高冬凌草培養(yǎng)物內(nèi)有效成分產(chǎn)量、優(yōu)化培養(yǎng)條件提供依據(jù)?！ ?材料與方法 1.1愈傷組織的獲得 以冬凌草
7、葉片作為外植體，在MS附加6-BA2.0mg/L，NAA1.0mg/L的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織，將誘導(dǎo)出的愈傷組織在上述培養(yǎng)基上，經(jīng)過3～4代的培養(yǎng)，形成質(zhì)地較為均勻的愈傷組織?！ ?.2蔗糖濃度處理 將繼代培養(yǎng)獲得的愈傷組織接種到蔗糖濃度為1%，2%，3%，4%，5%的愈傷生長培養(yǎng)基上，每瓶4～6塊愈傷組織，每個處理重復(fù)8次，并稱取接種時的接種量，培養(yǎng)25d后，統(tǒng)計不同蔗糖濃度下愈傷組織的收獲量，培養(yǎng)過程中觀察愈傷組織的的生長情況?！ ?.3碳源處理 分別以蔗糖、葡萄糖、果糖為碳源，濃度為3
8、％。將繼代培養(yǎng)獲得的愈傷組織接種于附加6-BA2.0mg/L，NAA1.0mg/L的MS培養(yǎng)基，每瓶4～6塊愈傷組織，每個處理重復(fù)8次，并稱取接種時的接種量，培養(yǎng)25d后，稱重不同碳源下愈傷組織的收獲量，計算愈傷組織的增殖倍數(shù)，培養(yǎng)過程中觀察愈傷組織在不同碳源上的生長情況。 1.4氮源處理 在總氮量不變的情況下，將繼代培養(yǎng)獲得的愈傷組織接種到改變NO3-/NH4+比例的MS培養(yǎng)基上。每瓶接種4～6塊愈傷組織，每個處理重復(fù)8次，并稱取接種時的接種量，培養(yǎng)25d后，統(tǒng)計不同氮源下愈傷組織的收獲量
