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1、縫隙連接蛋白43在缺血預處理心肌保護中的作用：劉超，王云，顧繼偉，袁亞偉，馮東，高致炳【摘要】 目的探討縫隙連接蛋白43（Connexin43,Cx43）在缺血預處理心肌保護中的作用和地位。方法將48只SD大鼠分為假手術(shù)組（S組）、缺血再灌注組（IR組）、缺血預處理組（IP組）和5-羥基癸酸+缺血預處理組（5-HD+IP組），測定各組的心律失常評分和心肌梗死面積，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應技術(shù)（RT-PCR）檢測各組心肌Cx43的表達水平。結(jié)果IR組和5-HD+IP組的心律失常發(fā)生多于IP組，評分明顯高于IP組（P＜0.01）；IR組和5-HD+IP組的IS/AAR比值明顯大于IP組（P＜0
2、.01）；與IR組和5-HD+IP組比較，IP組Cx43mRNA的表達明顯增強（P＜0.01）。IP可以減少心律失常發(fā)生，減小心肌梗死面積，增強Cx43的表達，5-羥基癸酸可以阻斷IP的心肌保護作用。結(jié)論IP通過開放線粒體ATP敏感性鉀通道保持Cx43磷酸化，進而實現(xiàn)心肌保護。【關(guān)鍵詞】縫隙連接蛋白43；缺血再灌注損傷；缺血預處理；心肌保護 Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectandstatusofconnexin43onmyocardialprotectioninischemicpreconditioning.Methods48Sprague-
3、Dalydividedintofourgroups:S,IR,IP,5-HD+IP.Themyocardialinfarctsizeandarrhythmiascoreeasured.Theexpressionofconnexin43iascoreandIS/AARicpreconditioningmightreducedarrhythmogenesisandmyocardialinfarctsize,meanightinterdictedthemyocardialprotectionofIP(P＜0.01).ConclusionIschemicpreconditioningmightpla
4、yanimportantroleinmyocardialprotectionbyactivatingmitochondrialATPsensitivepotassiumchannelandpreservingconnexin43posphorylation. Keyia-reperfusioninjury；ischemicpreconditioning；myocardialprotection 如何減輕再灌注損傷、保護缺血心肌，一直是心血管病學領(lǐng)域研究的重要內(nèi)容，缺血預處理（Ischemicpreconditioning，IP）被認為是一種最有效的心肌保護方法，缺血預處理能使心室細胞間最
5、主要的縫隙連接蛋白43（Cx43）表達量增加，分布模式改變以實現(xiàn)心肌保護，Cx43在心肌IP中的作用越來越受到重視，本研究旨在探討Cx43在缺血預處理心肌保護中的作用和地位?！ ?材料與方法 1.1對象和材料 健康雄性SD大鼠48只（寧夏醫(yī)科大學實驗動物中心提供），體重250～300g。伊文氏藍（Even’sBlue,AMERSCO公司），氯化三苯基四氮唑（TTC,AMERSCO公司），5-羥基癸酸（5-hydroxydecanoateacid,5-HD,Sigma公司），SABC免疫組化染色試劑盒及DAB顯色試劑盒（武漢博士德生物工程公司），AccesssRT-PCR系統(tǒng)A1250（P
6、romega公司），TRIzolReagent（Invitrogen公司）?！ ?.2方法 1.2.1模型構(gòu)建及實驗分組 大鼠隨機分為4組，每組12只。稱重后腹腔注射3%戊巴比妥鈉60mg·kg-1。麻醉后固定于實驗臺，氣管插管連接ALC-V8型動物呼吸機，呼吸頻率70次·min-1，潮氣量6～7mL·次-1。持續(xù)記錄心電圖，信號輸入BL-420F生物機能實驗系統(tǒng)保存。在胸骨左緣第3、4肋間開胸，于左心耳下緣與肺動脈圓錐間前降支處留置結(jié)扎線。（1）假手術(shù)組（S組）：建立動物模型后僅穿線而不結(jié)扎；（2）缺血再灌注組（IR組）：結(jié)扎左冠狀動脈前降支30min，再灌注120min；（3）缺血預
7、處理組（IP組）：結(jié)扎左冠狀動脈前降支5min，再灌注5min，重復3次后同IR組；（4）5-羥基癸酸和缺血預處理組（5-HD+IP組）：于IP前15min按5mg·kg-1iv.后同IP組?！ ?.2.2心律失常的測定 記錄各組室性期前收縮次數(shù)（VE）、室性心動過速時間（VTt）、心室顫動時間（VFt）和其他心律失常的發(fā)生情況，用心律失常評分量化心律失常的嚴重程度，根據(jù)Lambeth規(guī)則進行心律失常分析，
