杜仲不同提取部位對腎陽虛小鼠抗氧化和抗抑郁作用的影響

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1、杜仲不同提取部位對腎陽虛小鼠抗氧化和抗抑郁作用的影響：呂圭源陳素紅蘇潔顏美秋范景張益勛方哲張偉【摘要】目的］觀察杜仲三個部位對腎陽虛小鼠的抗氧化和抗抑郁作用，為認識杜仲“甘溫，入肝、腎經(jīng)”藥性的現(xiàn)代科學內(nèi)涵提供藥效學基礎(chǔ)。［方法］ICR雄性小鼠，隨機分為正常對照組，模型對照組，桂附地黃丸組，杜仲水部位組、正丁醇部位組、乙酸乙酯部位組。采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成小鼠腎陽虛模型。對小鼠抗氧化指標（SOD、GSHPx、CAT活性及MDA含量）、抗抑郁指標（懸尾、MAO活性）、疲勞指標等進行測定。［結(jié)果］抗氧化指標：杜仲三個部位都能降低MDA含量、提高SO

2、D活性，杜仲水部位和正丁醇部位能提高CAT活性，杜仲水部位和乙酸乙酯部位能提高GSHPx活性?？挂钟糁笜耍憾胖僖宜嵋阴ゲ课荒芴岣咝∈髴椅不顒訒r間，杜仲三個部位均能抑制MAO活性。杜仲三個部位都能提高小鼠奔跑時間和距離。［結(jié)論］杜仲可改善腎陽虛衰引起的衰老和抑郁，其抗氧化和抗抑郁作用可認為是其“甘，溫，歸肝、腎經(jīng)”主要藥效群的組成部分。杜仲水部位和正丁醇部位的藥效較類似，可能是其主要的藥效群物質(zhì)基礎(chǔ)?！娟P(guān)鍵詞】杜仲；腎陽虛；甘溫；肝經(jīng)；腎經(jīng)　　杜仲味甘，性溫，歸肝腎經(jīng)，功能補肝腎、強筋骨、安胎［1］。我們前期藥理研究發(fā)現(xiàn)，杜仲可通過提高腎陽虛小鼠抓力、

3、肛溫、游泳時間、自主活動、睪丸和精囊腺指數(shù)，降低血清肌酐、尿素，改善血液學指標，從而改善腎陽虛證之腰膝酸軟、性欲減退、畏寒肢冷、精神萎靡、陽虛水泛，以及腎精虧虛、肝氣虛弱所致的血液虧虛［2］?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》曰杜仲“主腰脊痛，補中益精氣，堅筋骨，強志……久服輕身耐老”。因其能為“強志”和“輕身耐老”，故觀察其在抗氧化和抗抑郁方面的作用，并進一步探討其性、味、歸經(jīng)在功能方面的現(xiàn)代科學內(nèi)涵?！　?材料和儀器　　1.1藥物鹽杜仲，批號080110，購自浙江中醫(yī)藥大學中藥飲片廠，經(jīng)鑒定為杜仲科植部位杜仲EumiaulmoidesOliv.樹皮的炮制品。取藥材用1

4、0倍體積95%乙醇2次，分別制成乙酸乙酯部位、正丁醇部位，再用10倍體積水提取2次制成水部位。水、正丁醇、乙酸乙酯部位分別加吐溫-80稀釋至0.125g生藥/ml。　　1.2試劑超氧化物歧化酶、谷胱胺肽過氧化酶、過氧化氫酶、單胺氧化酶、丙二醛試劑盒（SOD、GSHPX、CAT、MAO、MDA，南京建成生物工程研究所，批號20081009）。苯甲酸雌二醇（上海通用藥業(yè)股份有限公司，批號070905）。桂附地黃丸（蘭州太寶制藥有限公司，批號80080542）?！　?.3動物ICR小鼠，雄性，體重18～22g，由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，合格證號

5、:SCXK(滬)2007-0005?！　?.4儀器YLS18A小鼠懸尾測試儀（山東省醫(yī)學科學院設(shè)備供應維修站）；YLS10A小鼠轉(zhuǎn)輪式疲勞儀（山東省醫(yī)學科學院設(shè)備供應維修站）；酶標儀（美國BioTEK公司，Pog/ml的苯甲酸雌二醇大豆油稀釋液，每日1次，連續(xù)13d，造成腎陽虛模型［2］，體積為0.1ml/10g體重。各受試藥組給予相應的藥物0.125g生藥/ml，桂附地黃丸組給予0.15g生藥/ml桂附地黃丸混懸液，對照組和模型組給予0.4%吐溫-80，灌胃給藥，每日1次，連續(xù)30d，體積為0.1ml/10g體重?！　?.2指標檢測期間觀察以下

6、指標：抗氧化指標：SOD活性、GSHPX活性、CAT活性、MDA含量的測定：方法參照試劑盒說明書?？挂钟糁笜耍浩叫袦y試各小鼠懸尾6min內(nèi)的總活動時間和活動時間比；MAO測定：方法參照試劑盒說明書。平行測試各小鼠在轉(zhuǎn)棒式疲勞儀（參數(shù)：20轉(zhuǎn)/min、電擊電流量為0.25mA、電擊持續(xù)時間為2.5s）上的奔跑時間及奔跑距離。　　2.3統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)以x±s表示，組間比較采用ttest檢驗。　　3結(jié)果　　3.1杜仲不同部位對雌二醇致腎陽虛小鼠的抗氧化作用　　3.1.1對雌二醇致腎陽虛小鼠肝臟抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性的影響與對照組比較，模型

7、組肝臟抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性均明顯降低（P<0.01）；與模型組比較，杜仲水部位組能顯著提高腎陽虛小鼠肝臟SOD、GSHPX和CAT的活性，正丁醇部位組能明顯提高SOD和CAT的活性，而乙酸乙酯部位組能顯著提高SOD和GSHPX的活性（P<0.05～0.01）。結(jié)果說明杜仲能改善腎陽虛小鼠抗氧化酶的水平，見表1?！　”?對腎陽虛小鼠肝臟抗氧化酶SOD、GSHPX和CAT活性的影響（略）　　與正常對照組比較,△P<0.05，△△P<0.01；與模型對照組比較*P<0.05，**P<0.01　　3

8、.1.2對雌二醇致腎陽虛小鼠肝臟脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的影響與對照組比較，模型組肝臟脂質(zhì)過氧化產(chǎn)