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《幾種抗腫瘤藥物誘導(dǎo)jurkat細(xì)胞凋亡的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、幾種抗腫瘤藥物誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡的研究【摘要】 本研究評(píng)價(jià)幾種臨床常用的抗腫瘤藥物順鉑（CDDP）、羥基喜樹堿(HCPT)、高三尖杉酯堿(HHT)和米托蒽醌(MIT)在白血病治療中的作用，并分析其在誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡的作用，為白血病的臨床治療提供新的理論依據(jù)和思路。用AnnexinV/PI雙參數(shù)流式分析方法，檢測(cè)這幾種抗腫瘤藥物誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡和死亡的效應(yīng)。結(jié)果表明：MIT和HCPT在加藥處理早期4小時(shí)(P<0.05)和后期第8小時(shí)(P<0.05)都有明顯的誘導(dǎo)
2、Jurkat細(xì)胞凋亡的效應(yīng)。HHT有明顯誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡的效果，但各劑量組之間無顯著差異。CDDP在高濃度和長(zhǎng)時(shí)間作用時(shí)才顯示較弱的細(xì)胞凋亡效應(yīng)，明顯弱于前3者。各種藥物作用后均未觀察到明顯的細(xì)胞死亡效應(yīng)。結(jié)論：MIT誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡的作用最顯著，AnnexinV流式分析方法可作為一種可靠的臨床藥物篩選的方法?！娟P(guān)鍵詞】抗癌藥物；細(xì)胞凋亡；Jurkat細(xì)胞系；AnnexinV EffectofSeveralAnti-tumorDrugsonApoptosisInductioni
3、nJurkatCellLine AbstractCisplatin(CDDP)，homoharringtonine(HHT)，mitoxantrone(MIT)andhydroxycamptothecin(HCPT)arehighlyeffectiveanti-tumordrugs.ToevaluatethEireffectsinthetherapyofleukemiaandestablishavaluablemethodtoestimateanti-tumordrugs，AnnexinV/P
4、Idoubleparameterfloetryloe.DeatheffectsonJurkatcelllinecannotbeobservedineveryexperimentalgroup.Itisconcludedthatloeterfloetrycanbeusedasareliablemethodforclinicalscreeninganti-tumordrugs. Keyordrug;apoptosis;Jurkatcellline;AnnexinV化療是腫瘤治療的一種重要方法，新的
5、抗腫瘤藥物也不斷地涌現(xiàn)。國(guó)內(nèi)在上個(gè)世紀(jì)90年代上市的抗癌藥物中化學(xué)合成藥米托蒽醌(MIT)、羥基脲和順鉑(CDDP)等少數(shù)幾種抗癌藥物，通過與DNA分子結(jié)合抑制核酸合成引起細(xì)胞死亡，這類藥物稱之為細(xì)胞周期非特異性藥物。本研究選用米托蒽醌(MIT)、順鉑(CDDP)、羥基喜樹堿(HCPT)、高三尖杉酯堿(HHT)誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡，并通過AnnexinV/PI法檢測(cè)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞死亡比例，分析不同作用時(shí)間以及不同藥物濃度對(duì)Jurkat細(xì)胞凋亡的影響。材料和方法 材料 Jurkat細(xì)胞系由
6、本實(shí)驗(yàn)室保存。順鉑（CDDP）為齊魯制藥有限公司產(chǎn)品、羥基喜樹堿（HCPT）為黃石飛云制藥廠產(chǎn)品、高三尖杉酯堿（HHT）為杭州民生藥業(yè)公司產(chǎn)品、米托蒽醌（MIT）為浙江瑞新藥業(yè)公司產(chǎn)品；RPMI1640為Invitrgen產(chǎn)品；AnnexinVFITC/PI試劑盒購(gòu)自晶美生物公司；貝克曼流式細(xì)胞分析儀EliteEXP。 誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡 Jurkat細(xì)胞在5%CO2孵箱培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，鏡下計(jì)數(shù)為1×106/ml，加入24孔板，每孔1ml細(xì)胞懸液。用無血清細(xì)胞懸液將順鉑、羥基喜樹堿、
7、高三尖杉酯堿和米托蒽醌藥物配制成1mg/ml溶液；每組藥物分別設(shè)4個(gè)濃度：12.5、25、50、100μg/ml；分別加入24孔培養(yǎng)板，作3個(gè)復(fù)孔。置于5％CO2孵箱培養(yǎng)?！ nnexinV/PI流式雙參數(shù)分析［1-3］ 分別于加入藥物作用2、4和8小時(shí)，吸取培養(yǎng)細(xì)胞懸液，用4℃預(yù)冷的PBS洗細(xì)胞2次，用250μl結(jié)合緩沖液重懸細(xì)胞，使其濃度為1×106/ml；取100μl細(xì)胞懸液，加5μlAnnexinV/FITC和10μl(20μg/ml)的碘化丙錠；混勻后室溫避光孵育15分鐘；用PBS
8、洗滌2次，進(jìn)行流式細(xì)胞儀（FACS）分析。AnnexinV-FITC/PI雙參數(shù)進(jìn)行調(diào)試，以此條件進(jìn)行細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死率檢測(cè)。圖1-5橫坐標(biāo)表示熒光強(qiáng)度，縱坐標(biāo)表示細(xì)胞數(shù)，圖中兩個(gè)峰中的左邊峰表示陰性峰，右峰表示凋亡峰，右峰曲線下面積越大凋亡就越多。根據(jù)所測(cè)數(shù)據(jù)計(jì)算細(xì)胞凋亡率和繼發(fā)性壞死率?！ 〗y(tǒng)計(jì)學(xué)分析 各組細(xì)胞凋亡率均取3個(gè)樣本的均值，以X±SD表示，多個(gè)均數(shù)的兩兩比較采用《中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書·醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)》統(tǒng)計(jì)軟件包(第三版)PEMS3.1軟件進(jìn)行檢驗(yàn)?！ 〗Y(jié)果 CDDP對(duì)Jurkat細(xì)
