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《砂仁及其混淆品的高效液相色譜指紋圖譜鑒別研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、砂仁及其混淆品的高效液相色譜指紋圖譜鑒別研究作者:王祥培,吳紅梅,趙楊,孫宜春,靳鳳云,萬德光【摘要】 目的建立砂仁及其混淆品的高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜鑒定方法。方法采用RP-HPLC(DAD)法,梯度洗脫,測定陽春砂、海南假砂仁及艷山姜的指紋圖譜,并作相似度比較分析。結(jié)果砂仁及其混淆品的HPLC指紋圖譜有明顯差異。結(jié)論HPLC指紋圖譜具有重現(xiàn)性好,特征性強(qiáng),方法簡便等特點(diǎn),可用于砂仁與其混淆品藥材的鑒別?!娟P(guān)鍵詞】砂仁混淆品高效液相色譜指紋圖譜 Abstract:ObjectiveToestablishHPLCfingerprintfortheiden
2、tification ofAmomumvillosumanditsadulterants.MethodsChromatographicfingerprintofAmomumvillosum,AmomumchinenseandAlpiniazerumbetinedbyRP-HPLC(DAD)andthegradientelutionmodeatographicseparation,datailarityEvalutionSoftilarityofsamples.ResultsThereomumvillosumanditsadulterants.ConclusionHP
3、LCfingerprintmethodisrepeatableandfeasibleandcanbesuitableforidentifyingAmomumvillosumanditsadulterants. Keyomumvillosum;Adulterants;HPLC;Fingerprint 砂仁為姜科植物陽春砂AmomumvillosumLour.綠殼砂A.villosumLour.var.xanthioidesT.L.omumvillosumLour.的干燥成熟果實(shí);海南假砂仁購于四川成都,經(jīng)筆者鑒定為姜科植物海南假砂仁AmomumchinenseCh
4、unexT.L.a公司DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm);流動(dòng)相為乙腈(A)與0.1%磷酸(B)梯度洗脫,梯度條件0→11min,A(%)0.5~5,B(%)99.5~95,11→61min,A(%)5~20,B(%)95~80,61→75min,A(%)20~25,B(%)80~75,75→80min,A(%)25~25,B(%)75~75;流速0.8ml/min;柱溫25℃;檢測波長258nm;參比波長360nm;分析時(shí)間80min;進(jìn)樣量10μl?! ?.2供試品的制備精密稱取藥材細(xì)粉2.0g,加石油醚(60~90℃)50ml,超聲15
5、min,濾過,殘?jiān)鼡]干溶劑,加甲醇50ml回流1h,濾過。殘?jiān)蛹状?0ml,繼續(xù)回流1h,濾過,合并兩次濾液。置蒸發(fā)皿水浴揮干溶劑,殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ葜?0ml。用微孔濾膜(0.45μm)濾過,取續(xù)濾液,即得?! ?.3對(duì)照品的制備精密稱取槲皮苷對(duì)照品適量,加甲醇制成24.72μg/ml的溶液,作為對(duì)照品溶液。 2.4方法學(xué)考察以購于廣東深圳的陽春砂藥材為樣品,對(duì)其穩(wěn)定性﹑儀器精密度﹑重復(fù)性作了相應(yīng)考察,結(jié)果證明穩(wěn)定性及重復(fù)性良好。 2.4.1精密度實(shí)驗(yàn)取同一份供試品溶液,重復(fù)進(jìn)樣6次,直觀觀察指紋圖譜的全貌無明顯差別,用相似度軟件計(jì)算,在同一臺(tái)儀器測得色譜
6、指紋圖譜的相似度分別為:0.986,0.992,0.991,0.981,0.982,0.972,均大于0.95。表明該儀器的精密度良好。符合指紋圖譜檢測要求[3]?! ?.4.2穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一份供試品溶液,分別在0,2,6,12,20,30h進(jìn)行檢測,直觀觀察指紋圖譜的全貌無明顯差別,用相似度軟件計(jì)算,在同一臺(tái)儀器測得色譜指紋圖譜的相似度分別為:0.976,0.991,0.980,0.971,0.993,0.985,均大于0.95。表明在30h內(nèi)供試品溶液的成分是穩(wěn)定的。符合指紋圖譜檢測要求[3]。 2.4.3重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一產(chǎn)地的供試品5份,同法檢測,直觀觀察
7、指紋圖譜的全貌無明顯差別,用相似度軟件計(jì)算,在同一臺(tái)儀器測得色譜指紋圖譜的相似度分別為:0.981,0.955,0.965,0.973,0.979,均大于0.95。表明該方法的重復(fù)性較好,符合指紋圖譜檢測要求[3]。.L.編輯?! ?.5指紋圖譜建立精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各10μl,注入高效液相色譜儀,按選定的色譜條件,進(jìn)行檢測。同一實(shí)驗(yàn)條件下,測定所有供試品HPLC色譜圖。根據(jù)不同供試品測定結(jié)果所給出的峰數(shù)、峰值(積分值)和峰位(相對(duì)保留時(shí)間)等相關(guān)參數(shù)進(jìn)行分析、比較,制定優(yōu)化的指紋圖譜見圖1~3?! ?.6.1共有指紋峰標(biāo)定比較購于貴州貴陽、四川成都及廣