用豬藍(lán)耳病弱毒疫苗治療普通型豬藍(lán)耳病效果觀察

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1、用豬藍(lán)耳病弱毒疫苗治療普通型豬藍(lán)耳病效果觀察用豬藍(lán)耳病弱毒疫苗治療普通型豬藍(lán)耳病效果觀察豬藍(lán)耳病是一種發(fā)病率和死亡率高、傳播快、主要侵害豬的繁殖和呼吸系統(tǒng)的病毒性傳染病。主要表現(xiàn)為母豬繁殖障礙、仔豬斷奶前高死亡率、育成豬的呼吸道疾病三大癥狀。多表現(xiàn)為高熱（４１℃以上）、精神沉郁、厭食、呼吸困難，耳朵、乳頭、外陰、腹部、尾部發(fā)紺，以耳尖最為常見(jiàn)。懷孕母豬流產(chǎn)或早產(chǎn)，.L.產(chǎn)木乃伊、死胎和病弱仔豬，死產(chǎn)率可達(dá)８０％～１００％。仔豬特別是乳仔豬死亡率很高，可達(dá)８０％以上。大多數(shù)新生仔豬出現(xiàn)呼吸困難（腹式呼吸）、肌肉震顫、后軀麻痹、共濟(jì)失調(diào)、

2、打噴嚏、嗜睡、精神沉郁、食欲不振等癥狀。育肥豬體溫可升高至４１℃左右，食欲明顯減少或廢絕，多數(shù)全身發(fā)紅，呼吸加快，咳嗽明顯，個(gè)別病豬流少量黏性鼻液［１］。該病大多混合感染豬瘟（ＨＣＶ）、豬流感病毒（ＳＩＶ）、偽狂犬病病毒（ＡＤＶ）、豬圓環(huán)病毒２型（ＰＣＶ－ＩＩ）和豬胸膜肺炎（ＡＰＰ）、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌（ＨＰ）、多殺性巴氏桿菌（ＰＭ）、豬支原體肺炎（ＭＨ）、弓形體、附紅細(xì)胞體、豬霍亂沙門氏菌（ＳＣ）等，無(wú)繼發(fā)感染的病豬死亡率較低?！　　　。玻埃保澳辏翟乱詠?lái)，在宜昌市先后對(duì)８起普通型豬藍(lán)耳病疫情進(jìn)行了治療，共治療１４９６頭，治愈１３

3、１９頭，取得了很好的效果?，F(xiàn)將治療情況總結(jié)如下。　?。辈牧吓c方法　?。保彼{(lán)耳病的診斷　?。玻埃保澳辏翟乱詠?lái)，先后對(duì)宜昌市出現(xiàn)有豬藍(lán)耳病臨床癥狀的８例病豬血樣進(jìn)行了ＰＣＲ診斷?！　。保保痹囼?yàn)材料　　豬全血：疑似癥狀豬全血共２４份（每例３份）。　　引物：參照方六榮［２］、李彬等［３］的方法設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物。上游引物（Ｎｓｐ２Ｆ）序列為５′－ＴＧＧＧＣＧＡＣＡＡＴＧＴＣＣＣ－３′，下游引物（Ｎｓｐ２Ｒ）序列為５′－ＧＣＴＧＡＧＴＡＴＴＴＴＧＧＧＣＧ－３′。ＰＲＲＳＶ變異株和經(jīng)典毒株預(yù)期

4、擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度分別為４１８ｂｐ和５０８ｂｐ?！　≈饕噭海遥危撂崛≡噭┖匈?gòu)自美國(guó)ＯＭＥＧＡ公司；ＲＴ－ＰＣＲ試劑盒購(gòu)自大連寶生物公司；低分子量蛋白質(zhì)Ｍａｒｋｅｒ、瓊脂糖購(gòu)自ＯＸＯＩＤ公司。　?。保保苍囼?yàn)方法　　病毒總ＲＮＡ的提?。翰杉娜蛛x后收集上清，ＲＮＡ病毒的抽提按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。　　反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)：按ＴａＫａＲａＲＮＡＰＣＲＫｉｔ（ＡＭＶ）Ｖｅｒ３．０說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物直接用于ＰＣＲ反應(yīng)模板或－２０℃保存?！　。校茫曳磻?yīng)：反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物１０μＬ，５ＰＣＲＢｕｆｆｅｒ１０．０μＬ，上下游引物各０．５μＬ（２

5、０μｍｏｌ／Ｌ），ＴａＫａＲａＥｘＴａｑＨＳ０．２５μＬ（５Ｕ／μＬ），用滅菌雙蒸水補(bǔ)充總體積至５０μＬ。ＰＣＲ反應(yīng)條件為：９４℃變性５ｍｉｎ；進(jìn)入ＰＣＲ循環(huán)，９４℃１ｍｉｎ，５７℃１ｍｉｎ，７２℃１ｍｉｎ，３５次循環(huán)后，７２℃延伸１０ｍｉｎ，４℃保存。　?。校茫耶a(chǎn)物電泳檢測(cè)：ＰＣＲ產(chǎn)物在１％瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳，當(dāng)溴酚藍(lán)電泳至適當(dāng)位置，在長(zhǎng)波紫外燈／凝膠成像系統(tǒng)下觀察或拍照。１．２分組治療　?。保玻币呙缲i藍(lán)耳病弱毒疫苗為武漢中博生物股份有限公司生產(chǎn)的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗（ＪＸＡ１－Ｒ株）。　　

6、１．２．２治療方法對(duì)確認(rèn)發(fā)生普通型豬藍(lán)耳病的豬每頭.L.注射豬藍(lán)耳病弱毒疫苗1次（１０頭份）。同時(shí)每天注射林可霉素防止繼發(fā)感染，飲水中添加口服補(bǔ)液鹽，以提供能量。　?。保玻撤纸M治療對(duì)４例（８９７頭）５０ｋｇ以上確診為普通型豬藍(lán)耳病病豬按以上方法治療，１０ｄ后觀察結(jié)果；對(duì)３例（５３５頭）３０～５０ｋｇ確診為普通型豬藍(lán)耳病病豬按以上方法治療，１０ｄ后觀察結(jié)果；對(duì)１例（６４頭）３０ｋｇ以下確診為普通型豬藍(lán)耳病病豬按以上方法治療，１０ｄ后觀察結(jié)果；對(duì)照組１６頭（每病例２頭）只注射林可霉素和飲水中添加口服補(bǔ)液鹽，1周后觀察結(jié)果?！　。保称?/p>

7、他防控措施　?。保常睙o(wú)害化處理病死豬尸體嚴(yán)格要求各養(yǎng)殖場(chǎng)及時(shí)采用深埋、焚燒等無(wú)害化方法處理死胎、死豬，嚴(yán)格控制病豬的流動(dòng)，防止疫情擴(kuò)散蔓延?！　。保常矅?yán)格消毒加強(qiáng)環(huán)境消毒，實(shí)行帶體消毒，保持飼養(yǎng)用具的清潔，對(duì)污染的所有地方進(jìn)行嚴(yán)格消毒。隔離病豬，封鎖疫區(qū)，確保疫情不外傳?！　。保常臣訌?qiáng)飼養(yǎng)管理加強(qiáng)飼養(yǎng)環(huán)境管理，降低飼養(yǎng)密度，加強(qiáng)通風(fēng)、防暑降溫，改善豬舍環(huán)境。調(diào)整日糧，對(duì)病豬飼喂高能量飼料及青綠飼料，提高飼料中維生素及礦物質(zhì)含量。　?。保常醇訌?qiáng)對(duì)其他病的診治藍(lán)耳疫情中?；煊胸i瘟等其他疫病，因此必須加強(qiáng)對(duì)其他疫病的免疫工作

8、，減少混合感染，減少死亡?！　。步Y(jié)果與分析　?。玻保校茫曳磻?yīng)結(jié)果　　提取總ＲＮＡ、ＲＴ－ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)１％瓊脂糖凝膠電泳，陽(yáng)性對(duì)照變異毒株獲得大小為４１８ｂｐ左右的片段，經(jīng)典毒株獲得大小為５０８ｂｐ左右的片段，與預(yù)期