固相萃取的原理方法等

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1、固相萃取技術(shù)■　?????????????在過去的二十多年中，固相萃取作為化學(xué)分離和純化的一個強有力工具出現(xiàn)了。從痕量樣品的前處理到工業(yè)規(guī)模的化學(xué)分離，吸附劑萃取在制藥、精細化工、生物醫(yī)學(xué)、食品分析、有機合成、環(huán)境和其他領(lǐng)域起著越來越重要的作用?！龉滔噍腿〉脑怼　??????在過去的二十多年中，固相萃取作為化學(xué)分離和純化的一個強有力工具出現(xiàn)了。從痕量樣品的前處理到工業(yè)規(guī)模的化學(xué)分離，吸附劑萃取在制藥、精細化工、生物醫(yī)學(xué)、食品分析、有機合成、環(huán)境和其他領(lǐng)域起著越來越重要的作用。???????固相萃取是一個包括液相和固相的物理萃取過程。在固相萃取中，固相對分離物的吸附力比溶解分離物的溶

2、劑更大。當樣品溶液通過吸附劑床時，分離物濃縮在其表面，其他樣品成分通過吸附劑床；通過只吸附分離物而不吸附其他樣品成分的吸附劑，可以得到高純度和濃縮的分離物。保留和洗脫???????在固相萃取中最通常的方法是將固體吸附劑裝在一個針筒狀柱子里，使樣品溶液通過吸附劑床，樣品中的化合物或通過吸附劑或保留在吸附劑上（依靠吸附劑對溶劑的相對吸附）。“保留”是一種存在于吸附劑和分離物分子間吸引的現(xiàn)象，造成當樣品溶液通過吸附劑床時，分離物在吸附劑上不移動。保留是三個因素的作用：分離物、溶劑和吸附劑。所以，一個給定的分離物的保留行為在不同溶劑和吸附劑存在下是變化的?！跋疵摗笔且环N保留在吸附劑上的分離物

3、從吸附劑上去除的過程，這通過加入一種對分離物的吸引比吸附劑更強的溶劑來完成。容量和選擇性??????吸附劑的容量是在最優(yōu)條件下，單位吸附劑的量能夠保留一個強保留分離物的總量。不同鍵合硅膠吸附劑的容量變化范圍很大。選擇性是吸附劑區(qū)別分離物和其他樣品基質(zhì)化合物的能力，也就是說，保留分離物去除其他樣品化合物。一個高選擇性吸附劑是從樣品基質(zhì)中僅保留分離物的吸附劑。吸附劑選擇性是三個參數(shù)的作用：分離物的化學(xué)結(jié)構(gòu)、吸附劑的性質(zhì)和樣品基質(zhì)的組成?！」滔噍腿〉暮喴^程????1.一個樣品包括分離物和干擾物通過吸附劑；????2.吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物，其他干擾物通過吸附劑；????3.

4、用適當?shù)娜軇┝芟次絼?，使先前保留的干擾物選擇性的淋洗掉，分離物保留在吸附劑床上；????4.純化、濃縮的分離物從吸附劑上淋洗下來?！鯯PE的方法建立?????1.　選擇SPE小柱或濾膜　首先應(yīng)根據(jù)待測物的理化性質(zhì)和樣品基質(zhì),選擇對待測物有較強保留能力的固定相。若待測物帶負電荷,可用陰離子交換填料,反之則用陽離子交換填料。若為中性待測物,可用反相填料萃取。SPE小柱或濾膜的大小與規(guī)格應(yīng)視樣品中待測物的濃度大小而定。對于濃度較低的體內(nèi)樣品,一般應(yīng)選用盡量少的固定相填料萃取較大體積的樣品。??????2.　活化　萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5～10ml溶劑沖洗濾膜。一般可先用甲醇

5、等水溶性有機溶劑沖洗填料,因為甲醇能潤濕吸附劑表面,并滲透到非極性的硅膠鍵合相中,使硅膠更容易被水潤濕,之后再加入水或緩沖液沖洗。加樣前,應(yīng)使SPE填料保持濕潤,如果填料干燥會降低樣品保留值;而各小柱的干燥程度不一,則會影響回收率的重現(xiàn)性。?????3.加樣　一般可采取以下措施:(1)用0.1mol/L酸或堿調(diào)節(jié),使pH<3或pH>9,離心取上層液萃取;(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質(zhì)后取上清液,以水或緩沖液稀釋后萃取;(3)用酸或無機鹽沉淀蛋白質(zhì)后取上清液,調(diào)節(jié)pH值后萃取;(4)超聲15min后加入水、緩沖液,取上清液萃取。尿液樣品中的藥物濃度較高,加樣前先用水或緩沖液稀釋,必要時

6、可用酸、堿水解反應(yīng)破壞藥物與蛋白質(zhì)的結(jié)合,然后萃取。流速應(yīng)控制為2～4ml?min,流速快不利于待測物與固定相結(jié)合。??????4.　清洗填料　反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液,可在清洗液中加入少量有機溶劑、無機鹽或調(diào)節(jié)pH值。加入小柱的清洗液應(yīng)不超過一個小柱的容積,而SPE濾膜為5～10ml。??????5.???洗脫待測物　應(yīng)選用5～10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度,則可先將洗脫液揮干后,再用流動相重組殘留物后進樣。體內(nèi)樣品洗脫后多含有水,可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE填料可用小體積、較弱的洗脫液洗下待測物,再用極性較強的HPLC分析柱如C1

7、8柱分析洗脫物。若待測物可電離,可調(diào)節(jié)pH值,抑制樣品離子化,以增強待測物在反相SPE填料中的保留,洗脫時調(diào)節(jié)pH值使其離子化并用較弱的溶劑洗脫,收集洗脫液后再調(diào)節(jié)pH值使其在HPLC分析中達到最佳分離效果。在洗脫過程中應(yīng)減慢流速,用兩次小體積洗脫代替一次大體積洗脫,回收率更高。■固相萃取技術(shù)在環(huán)境分析上的應(yīng)用???????在環(huán)境污染中農(nóng)藥分析的應(yīng)用????國內(nèi)外分析工作者就固相萃取技術(shù)在農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用方面進行了廣泛的嘗試和探索,取得了許多成功的經(jīng)驗