坐骨神經(jīng)周圍注射可樂定對cci大鼠促炎性細胞因子

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1、坐骨神經(jīng)周圍注射可樂定對CCI大鼠促炎性細胞因子【摘要】目的:觀察損傷坐骨神經(jīng)周圍注射可樂定對慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎模型(chronicconstrictioninjury,CCI)大鼠促炎性細胞因子表達的影響,探討α2-腎上腺素受體激動劑是否對已經(jīng)形成的神經(jīng)病理性疼痛產(chǎn)生作用。方法:雄性SD大鼠32只,隨機分為4組,每組8只。Sham組:只分離皮膚、肌肉,不結(jié)扎坐骨神經(jīng);Sal組:形成CCI后注射生理鹽水組;Clo組:形成CCI后注射可樂定組;Clo+Yo組:形成CCI后注射可樂定和育亨賓組。在注射藥物3d后急性處死動物,取患側(cè)脊髓L4、L5、L6背根神經(jīng)節(jié)采取全自動化學(xué)發(fā)光法檢測TNF-

2、α和IL-6濃度。結(jié)果:術(shù)后從7d開始CCI大鼠脊髓背根神經(jīng)節(jié)TNF-α和IL-6濃度有明顯增高。損傷坐骨神經(jīng)周圍注射可樂定能明顯抑制CCI引起的脊髓背根神經(jīng)節(jié)TNF-α和IL-6的表達(P<0.01)。結(jié)論:損傷的坐骨神經(jīng)周圍注射可樂定可以降低促炎性細胞因子的表達?!娟P(guān)鍵詞】可樂定;外周注射;CCI大鼠;神經(jīng)病理性疼痛;TNF-α;IL-6  Abstract Objictive:ToassesstheeffectofperineuralclonidineontheexpressionofTNF-αandIL-6intheratsaleSDratslydividedintofo

3、urgroups(18foreach):shamgroup,Salgroup(CCI+saline),Clogroup(CCI+clonidine)andClo+Yogroup(CCI+clonidine+yohimbin).TheratsedicinementionedaboveandspinalcordDRGofL4,L5,L6iningtheconcentrationofTNF-αandIL-6ofDRGintheratsaticluminescenttechnique.Results:TheratsofCCIgroupdemonstratedsteadymechanicalan

4、dheathyperaglsiafromtheseventhdayaftertheoperation.TherearkableincreaseintheconcentrationofTNF-aandIL-6inDRGfromthe7thdayaftertheoperation.PerineuralinjectionofclonidinecouldsuppresstheexpressionofTNF-αandIL-6causedbyCCIintheDRGofCCIrats(P<0.01).Conclusion:Perineuralinjectionofclonidinemodula

5、tesproinflammatorycytokinesexpressioninCCIrats.  Keya公司?! ?.2 方法  1.2.1 動物分組 隨機將32只大鼠分為4組,每組8只。Sham組:只分離皮膚、肌肉,不結(jié)扎坐骨神經(jīng);Sal組:坐骨神經(jīng)結(jié)扎后7d注射生理鹽水;Clo組:坐骨神經(jīng)結(jié)扎后7d注射可樂定組;Clo+Yo組:坐骨神經(jīng)結(jié)扎后7d注射可樂定和育亨賓組?! ?.2.2 CCI模型的建立 依照Ben方法,大鼠腹腔注射10%水合氯醛(50mg/kg)麻醉后,在一側(cè)后肢剪毛消毒,在股骨外側(cè)縱形切開皮膚,順肌紋鈍性分離肌肉,暴露坐骨神經(jīng),游離周圍組織,用3.0絲線結(jié)扎坐骨神

6、經(jīng)中段,使神經(jīng)外膜輕度凹陷,但不阻斷血供,縫合皮膚。假手術(shù)組只鈍性分離肌肉,暴露坐骨神經(jīng),游離周圍組織,不結(jié)扎坐骨神經(jīng)。術(shù)后7d以ML生理鹽水、1mL鹽酸可樂定注射液(150μg/kg)和1mL鹽酸可樂定注射液(150μg/kg)、鹽酸育亨賓注射液(220μg/kg)和生理鹽水混合液吸入1mL注射器。依照先前文獻所示實驗方法,在大鼠的大轉(zhuǎn)子和坐骨結(jié)節(jié)間皮膚進針,然后向前內(nèi)側(cè)前進,沿坐骨神經(jīng)走行扇形注射藥液。在預(yù)試驗中注射大鼠相同劑量的2%利多卡因會使95%受試大鼠產(chǎn)生短暫的單側(cè)肢體麻木,證實藥物注射在神經(jīng)周圍且發(fā)揮作用?! ?.2.4 TNF-α和IL-6的測定 32只動物在注射藥物3

7、d后,完成最后行為學(xué)測試,使用10%水合氯醛麻醉動物,斷頭宰殺。收集4組每個動物患側(cè)的L4、L5、L6的背根神經(jīng)節(jié)(dorsalrootganglion,DRG)。所有樣本都被收集到1.5mL的聚丙烯試管(無熱源、經(jīng)DNΑ酶和RNΑ酶處理),稱重后立即放入干冰,隨后所有收集的組織都以-80℃溫度保存以待分析。以每毫克組織10μL的比率加入正常細胞培養(yǎng)液和10%滅活的牛血清,在冰浴中以超聲勻漿器勻漿。然后以1300×g速度離心,持續(xù)15min,溫

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