地黃梓醇降糖作用的實(shí)驗(yàn)研究

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1、地黃梓醇降糖作用的實(shí)驗(yàn)研究趙素容盧兗偉陳金龍段海峰吳祖澤【摘要】　　目的研究地黃梓醇對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響。方法雄性KM小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶60mg/kg建立糖尿病動(dòng)物模型。梓醇以200，100，50mg/kg劑量灌胃給藥2周，觀察其對(duì)糖尿病小鼠血糖、血脂和糖耐量的影響。結(jié)果梓醇能明顯降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖水平、改善糖耐量和血脂水平，并且呈劑量依賴關(guān)系。結(jié)論地黃梓醇對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠有顯著的降血糖作用?！娟P(guān)鍵詞】梓醇；降血糖作用；糖尿病　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofcatalpolfrom

2、RehmanniaglutinosaLibosch.onbloodglucoseofalloxan-induceddiabeticmice.MethodsCatalpolinisteredfor2g/kgtoobserveitseffectsonbloodglucose,bloodlipidandglucosetoleranceinalloxan-induceddiabeticmice.ResultsCatalpolsignificantlydecreasedthebloodglucose,improvedtheoralglucosetoleranceandbloodli

3、pidlevelinalloxan-induceddiabeticmiceinadose-dependentmanner.ConclusionCatalpolhasobvioushypoglycemicactivityinalloxan-induceddiabeticmice.　　Keyicactivity;Diabetesmellitus　　中藥地黃為玄參科植物地黃RehmanniaglutinosaLibosch.的新鮮或干燥塊根，具有滋陰清熱、補(bǔ)血止血等功效，臨床應(yīng)用極為廣泛。地黃的主要化學(xué)成分為苷類，其中以環(huán)烯醚萜苷類為主，梓醇（化學(xué)結(jié)構(gòu)式如圖1）是其主要活性成分

4、之一，具有利尿、緩和瀉下、降血糖、神經(jīng)保護(hù)等生物活性〔1～4〕。但由于天然產(chǎn)物成分復(fù)雜多樣，地黃中梓醇等環(huán)烯醚萜類化合物結(jié)構(gòu)近似，極性較大，而且化學(xué)穩(wěn)定性較差，增大了梓醇分離純化的難度。因樣品來源困難，限制了對(duì)梓醇生物活性的研究。本實(shí)驗(yàn)在解決了梓醇分離純化工藝的基礎(chǔ)上，首次在實(shí)驗(yàn)性糖尿病動(dòng)物模型上觀察了其降糖作用?！　D1梓醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)式（略）　　1材料與方法　　1.1樣品梓醇樣品由本實(shí)驗(yàn)室制備，其結(jié)構(gòu)經(jīng)ESI-MS，1H-NMR，13C-NMR鑒定，HPLC法測(cè)得樣品的梓醇含量為96%?！　?.2動(dòng)物KM小鼠，♂，(20±2)g，清潔級(jí)，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供

5、。合格證號(hào)：SCXK-(軍)2002-001。　　1.3試劑鹽酸二甲雙胍購自天津中新藥業(yè)股份有限公司新新制藥廠；四氧嘧啶，Sigma產(chǎn)品；膽固醇試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒，南京建成生物工程研究所。　　1.4儀器GLUCOCARDII血糖儀，附加血糖試紙（ARKRAY，日本）；SABS-18型自動(dòng)生化分析儀（意大利）?！　?.5方法　　1.5.1四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型的制備取70只健康KM小鼠，隨機(jī)分出8只為正常組動(dòng)物。其余小鼠在禁食16h后（不禁水），尾靜脈快速注射新鮮配制的2%四氧嘧啶生理鹽水溶液，劑量為60mg/kg。正常對(duì)照組小鼠在禁食16h

6、后于尾靜脈注射相應(yīng)體積的生理鹽水。上述小鼠經(jīng)過72h的自由飲食后，于尾靜脈取血用血糖儀測(cè)定血糖值，挑選血糖值大于16.7mmol/L的小鼠作為糖尿病小鼠?！　?.5.2動(dòng)物分組與給藥取40只造模成功的糖尿病小鼠按血糖值分層隨機(jī)分為5組，每組8只：模型組，陽性藥對(duì)照組（鹽酸二甲雙胍500mg/kg），梓醇高、中、低3個(gè)劑量組（200，100，50mg/kg）。從造模第4天開始給藥，治療組小鼠分別灌胃給予梓醇及鹽酸二甲雙胍，正常組和模型組小鼠灌胃給予相應(yīng)體積的蒸餾水，1次/d，連續(xù)2周?！　?.5.3實(shí)驗(yàn)觀測(cè)指標(biāo)分別于給藥前（0d）、給藥第7天、給藥第14天于尾靜脈取血用血糖

7、儀測(cè)小鼠的血糖值。末次給藥后小鼠禁食12h，口服葡萄糖2.5g/kg，尾靜脈取血分別測(cè)定口服前（0h）、口服后0.5，1，2h的血糖值，并用梯形面積法計(jì)算糖耐量曲線下面積（AUC）。口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)后小鼠摘眼球取血，離心分離血清。用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清中甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的含量?！　?.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理定量指標(biāo)以±s的形式表示，對(duì)兩組定量資料的結(jié)果分析，采用Student'st檢驗(yàn)進(jìn)行兩組間均數(shù)的差異顯著性檢驗(yàn)。對(duì)單因素k（k＞2）水平設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件