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1、葡聚糖硫酸酯的超濾分級(jí)及其抗凝血活性研究論文師少飛，王兆梅，郭祀遠(yuǎn)，藍(lán)嘉【摘要】目的研究各種葡聚糖硫酸酯(GS)超濾分級(jí)的體外和對(duì)大鼠的體內(nèi)抗凝血活性。方法通過(guò)超濾分級(jí)的方法獲得截留分子量不同的GS級(jí)分，并測(cè)其特性黏度［η］；分別研究不同［η］的GS對(duì)大鼠凝血時(shí)間（CT）和全血復(fù)鈣時(shí)間（RT）的時(shí)效性和量效性。結(jié)果各種［η］的GS均能顯著延長(zhǎng)CT和RT，且呈劑量依賴性；GS給藥2h時(shí)抗凝血活性達(dá)到最大；不同［η］的GS對(duì)CT和RT的延長(zhǎng)作用不同，［η］為274.8ml/g的GS的抗凝血活性最強(qiáng)。結(jié)論不同［η］GS均具有抗凝血活性，［η］為274.
2、8ml/g的GS抗凝血活性最強(qiáng).freelg的低分子量肝素相當(dāng)?！娟P(guān)鍵詞】抗凝血；葡聚糖硫酸酯；特性黏度AnticoagulatingEffectofGlucosanSulfatesultipleultra-filtrationofglucosansulfateraaterialandtheirintrinsicviscositieseasured.Coagulationtime(CT)andrecalcificationtime(RT)easuredusingatesttubemethod.ResultsCTandRTincreasedbyth
3、eanticoagulationoffractionedglucosansulfates,andtheyshoaximumafter2hofadministration.TheCTandRTl/gl/geas175IU/mgofloolecularg。杯式超濾器由聚醚砜超濾膜(中科院膜研究所)、壓縮氮?dú)馄考奥?lián)接管道配件組成。1.2葡聚糖硫酸酯的超濾分級(jí)及表征1.2.1超濾分級(jí)采用截留分子量分別為4K，10K和50K的聚醚砜膜對(duì)GS原料進(jìn)行二級(jí)超濾分級(jí)，得到4個(gè)級(jí)分，分別用F1，F(xiàn)2，F(xiàn)3和F4表示。1.2.2［η］測(cè)定以毛細(xì)管黏度計(jì)，采用逐步稀釋
4、法［5］。1.3大鼠凝血時(shí)間（CT）和全血復(fù)鈣時(shí)間（RT）的測(cè)定1.3.1CT測(cè)定大鼠給藥一定時(shí)間后，以復(fù)方噻胺酮(10ml/kg)肌肉注射麻醉，從心臟取血1.0ml于塑料試管中,1min后每隔10s緩慢傾斜試管1次，記錄傾斜試管時(shí)液面不動(dòng)（纖維蛋白形成）時(shí)間，即為CT。1.3.2RT測(cè)定大鼠腹腔動(dòng)脈采血0.9ml，加入預(yù)先盛有0.1ml3.8%枸櫞酸鈉的試管中，并在每支試管中加入待測(cè)樣品0.01ml，37℃水浴中孵育1min，每支試管中再加入0.1ml0.01mol/L的CaCl2，混勻后開(kāi)始計(jì)時(shí)，記錄傾斜試管時(shí)液面不動(dòng)時(shí)間，即為RT［6,7］
5、。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P0.05，認(rèn)為有顯著性差異。2結(jié)果2.1GS的超濾分級(jí)GS原料經(jīng)過(guò)截留分子量為4000，10000，50000三級(jí)超濾分級(jí)，得到4個(gè)GS級(jí)分，分別用F1，F(xiàn)2，F(xiàn)3，F(xiàn)4表示，其特性黏度分別為1.1，46.3，71.2，274.8ml/g。結(jié)果見(jiàn)表1。表1GS的超濾分級(jí)結(jié)果（略）2.2GS抗凝血作用的時(shí)-效關(guān)系GS給藥1h后，凝血指標(biāo)CT值與對(duì)照組（0h）相比均明顯增大；以后，隨著給藥時(shí)間延長(zhǎng)至1.5h，CT值進(jìn)一步提高。在給藥后2.0h，CT值達(dá)到最大。給藥后2.5h，CT值開(kāi)始降低，3.
6、0h時(shí)，CT值更低。表明GS經(jīng)皮下給藥，2h后藥效達(dá)到最大，以下研究中均以給藥2h后采血測(cè)定。見(jiàn)表2。表2GS作用時(shí)間對(duì)大鼠CT值的影響(略)2.3GS抗凝血作用的量-效關(guān)系各GS級(jí)分的濃度均為0.6g/L（相當(dāng)于0.6mg/kg）時(shí)，即可顯著延長(zhǎng)大鼠的凝血時(shí)間CT和RT，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，各濃度實(shí)驗(yàn)組所對(duì)應(yīng)的CT值和RT值與空白對(duì)照組之間均存在顯著性差異，表明GS具有突出的抗凝血活性。且隨著GS級(jí)分濃度的提高，其所對(duì)應(yīng)的凝血指標(biāo)值進(jìn)一步增大，說(shuō)明GS的抗凝血活性具有顯著的劑量依賴效應(yīng)，在本實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，增加GS的濃度，可顯著提高其抗凝血作用。結(jié)果見(jiàn)
7、表3～4。表3GS劑量對(duì)大鼠CT值的影響(略)表4GS劑量對(duì)RT值的影響(略)2.4［η］對(duì)GS抗凝血活性的影響對(duì)照組（0h）時(shí)，4個(gè)［η］樣品的CT無(wú)顯著差異，給藥1h，F(xiàn)4與F1開(kāi)始有明顯差異，到2h，4個(gè)樣品CT值均達(dá)到最大，而且它們之間差異顯著，F(xiàn)4的CT值最大，說(shuō)明其抗凝血效果最好。結(jié)果見(jiàn)表2。從表3可看出，4個(gè)樣在給藥量0.6g/L時(shí)，F(xiàn)4與F1的CT值差異開(kāi)始顯著，隨著濃度的增加，這種差異越來(lái)越明顯，當(dāng)濃度為0.9g/L時(shí)，4個(gè)級(jí)分之間的CT值差異都開(kāi)始明顯，且隨著［η］增大，其凝血效果越明顯，說(shuō)明在相同濃度下，F(xiàn)4的凝血時(shí)間最大。
8、從表4可知，在給藥0.6g/L時(shí)，4個(gè)樣品之間的RT差異顯著。表明F4的在各種實(shí)驗(yàn)濃度下RT均高于其它［η］的樣品。綜合以上分析，在實(shí)驗(yàn)
