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1、萬(wàn)年蒿提取物對(duì)小鼠肝損傷的保護(hù)作用【摘要】目的探討萬(wàn)年蒿超臨界萃取物和水提液對(duì)小鼠肝臟損傷的保護(hù)作用。方法分別以萬(wàn)年蒿超臨界萃取物和水提液灌胃小鼠,并以CCl4制成小鼠急性肝臟損傷模型，測(cè)定小鼠血清中門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST）和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT）含量，觀察萬(wàn)年蒿不同提取物對(duì)肝臟損傷的保護(hù)作用。結(jié)果和模型組相比，萬(wàn)年蒿水提液高劑量組和超臨界萃取物高劑量組能夠明顯降低小鼠的AST，ALT含量(P<0.05或P<0.001)。結(jié)論萬(wàn)年蒿提取物具有較好的保肝作用。【關(guān)鍵詞】萬(wàn)年蒿；四氯化碳；肝損傷；超臨界萃取 Abstract：ObjectiveTost
2、udytheprotectiveeffectsofsupercriticalfluidextraction(SFE)extractsandisiasacrorumLedeb.onacutehepaticinjuryinmice.MethodsThemiceousemodelofacutehepaticinjurylevelsofALTandASTofthemiceeasured.ResultsThehigh-dosegroupsofparedtomodelgroup(P<0.05orP<0.001).ConclusionTheextractsofArtemi
3、siasacrorumLedeb.haveprotectiveeffectsagainsthepaticinjury. KeyisiasacrorumLedeb;CCl4;Hepaticinjury;Supercriticalfluidextraction(SFE) 萬(wàn)年蒿為菊科植物萬(wàn)年蒿ArtemisiasacrorumLedeb.干燥地上部分，也可為全草。有利濕退黃、涼血止血作用［1～3］。民間常用其治療急慢性肝炎、婦女內(nèi)寒證等。東北某些地區(qū)在治療黃疸等肝炎癥狀時(shí)，更愿意選用萬(wàn)年蒿替代茵陳蒿作為首選藥物。 本文通過(guò)測(cè)定小鼠血漿中門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST）和丙
4、氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT）等的含量，研究了萬(wàn)年蒿的超臨界萃取等四種提取物對(duì)CCl4所致小鼠肝損傷的影響，為進(jìn)一步研究萬(wàn)年蒿的保肝作用打下了基礎(chǔ)。 1器材 1.1藥材與試劑萬(wàn)年蒿采集自吉林省延吉市溪洞，由延邊大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)教研室劉永鎮(zhèn)教授鑒定為ArtemisiasacrorumLedeb.的地上部分；四氯化碳（天津開發(fā)區(qū)海晶精細(xì)化工廠）；試劑盒（ALT，AST）（北京北化康泰臨床試劑有限公司）；羧甲基纖維素鈉；吐溫-80等?！ ?.2儀器沈陽(yáng)天誠(chéng)超臨界流體萃取儀（TC-SFE-50-5-5-120S）；紫外分光光度計(jì)（上海棱光技術(shù)有限公司，S22PC）；R2060旋轉(zhuǎn)
5、蒸發(fā)儀（上海申生科技有限公司，R2060）；離心機(jī)（德國(guó)制造，型號(hào)：IGMA95308）；200μl移液器（pipetman,France）,1000μl移液器（XL3000i,Denville）?！ ?.3動(dòng)物昆明種小鼠,60只雄性，22～25g，由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物科提供?！ ?方法 2.1提取方法 2.1.1萬(wàn)年蒿水提法取500g萬(wàn)年蒿加入適量水中浸泡，1h后，加熱至沸，提取兩次，1h/次，合并濾液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮。參考萬(wàn)年蒿的成人劑量，通過(guò)體表面積轉(zhuǎn)換，配制成灌胃小鼠的低、高兩個(gè)濃度，分別為：6.5g(相當(dāng)于生藥量)/kg，26.0g(相當(dāng)于生藥量)/kg
6、。 2.1.2超臨界萃取法投藥800g萬(wàn)年蒿于超臨界萃取儀里，分別進(jìn)行了兩次萃取。第一次沒(méi)有提攜劑，第二次以無(wú)水乙醇為提攜劑。具體實(shí)驗(yàn)條件及結(jié)果如下?！ ”?萬(wàn)年蒿超臨界萃取條件（略） 2.2超臨界萃取物的配制取適量無(wú)水乙醇作為提攜劑的超臨界萃取物，用少量吐溫-80和配制好的0.05g/ml羧甲基纖維素鈉溶液作為溶劑配制成低、高兩種濃度：0.45，0.90g/kg（這兩個(gè)濃度均以超臨界萃取物的質(zhì)量絕對(duì)值進(jìn)行計(jì)算）?！ ?.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 2.3.1實(shí)驗(yàn)方法從動(dòng)物科取回小鼠后，放置于藥學(xué)院動(dòng)物室，使其適應(yīng)環(huán)境數(shù)日。小鼠隨機(jī)分成6組，每組10只：第1組：正常組;第2組：急
7、性肝損傷模型組;第3組：萬(wàn)年蒿的水提液低劑量組（6.5g/kg）;第4組：萬(wàn)年蒿的水提液高劑量組（26.0g/kg）;第5組：萬(wàn)年蒿超臨界萃取物低劑量組(0.45g/kg);第6組：萬(wàn)年蒿超臨界萃取物高劑量組(0.90g/kg)。正常組和模型組灌胃蒸餾水，其余各組分別灌胃上述劑量的相應(yīng)藥物，連續(xù)4d。第5天上午灌胃一次，過(guò)2h正常組腹腔注射相應(yīng)的生理鹽水，其它各組小鼠腹腔注射0.1%CCl4豆油溶液0.1ml/10g。24h后由小鼠頸動(dòng)脈取血（取血前12h前開始禁食）,離心機(jī)3000r/min分離血清,根據(jù)試劑盒方法測(cè)定AST，ALT［4
