萬年蒿提取物對小鼠肝損傷的保護(hù)作用

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1、萬年蒿提取物對小鼠肝損傷的保護(hù)作用【摘要】目的探討萬年蒿超臨界萃取物和水提液對小鼠肝臟損傷的保護(hù)作用。方法分別以萬年蒿超臨界萃取物和水提液灌胃小鼠,并以CCl4制成小鼠急性肝臟損傷模型,測定小鼠血清中門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)含量,觀察萬年蒿不同提取物對肝臟損傷的保護(hù)作用。結(jié)果和模型組相比,萬年蒿水提液高劑量組和超臨界萃取物高劑量組能夠明顯降低小鼠的AST,ALT含量(P<0.05或P<0.001)。結(jié)論萬年蒿提取物具有較好的保肝作用。【關(guān)鍵詞】萬年蒿;四氯化碳;肝損傷;超臨界萃取  Abstract:ObjectiveTost

2、udytheprotectiveeffectsofsupercriticalfluidextraction(SFE)extractsandisiasacrorumLedeb.onacutehepaticinjuryinmice.MethodsThemiceousemodelofacutehepaticinjurylevelsofALTandASTofthemiceeasured.ResultsThehigh-dosegroupsofparedtomodelgroup(P<0.05orP<0.001).ConclusionTheextractsofArtemi

3、siasacrorumLedeb.haveprotectiveeffectsagainsthepaticinjury.  KeyisiasacrorumLedeb;CCl4;Hepaticinjury;Supercriticalfluidextraction(SFE)  萬年蒿為菊科植物萬年蒿ArtemisiasacrorumLedeb.干燥地上部分,也可為全草。有利濕退黃、涼血止血作用[1~3]。民間常用其治療急慢性肝炎、婦女內(nèi)寒證等。東北某些地區(qū)在治療黃疸等肝炎癥狀時,更愿意選用萬年蒿替代茵陳蒿作為首選藥物。  本文通過測定小鼠血漿中門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和丙

4、氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)等的含量,研究了萬年蒿的超臨界萃取等四種提取物對CCl4所致小鼠肝損傷的影響,為進(jìn)一步研究萬年蒿的保肝作用打下了基礎(chǔ)?! ?器材  1.1藥材與試劑萬年蒿采集自吉林省延吉市溪洞,由延邊大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)教研室劉永鎮(zhèn)教授鑒定為ArtemisiasacrorumLedeb.的地上部分;四氯化碳(天津開發(fā)區(qū)海晶精細(xì)化工廠);試劑盒(ALT,AST)(北京北化康泰臨床試劑有限公司);羧甲基纖維素鈉;吐溫-80等?! ?.2儀器沈陽天誠超臨界流體萃取儀(TC-SFE-50-5-5-120S);紫外分光光度計(上海棱光技術(shù)有限公司,S22PC);R2060旋轉(zhuǎn)

5、蒸發(fā)儀(上海申生科技有限公司,R2060);離心機(jī)(德國制造,型號:IGMA95308);200μl移液器(pipetman,France),1000μl移液器(XL3000i,Denville)?! ?.3動物昆明種小鼠,60只雄性,22~25g,由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物科提供?! ?方法  2.1提取方法  2.1.1萬年蒿水提法取500g萬年蒿加入適量水中浸泡,1h后,加熱至沸,提取兩次,1h/次,合并濾液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮。參考萬年蒿的成人劑量,通過體表面積轉(zhuǎn)換,配制成灌胃小鼠的低、高兩個濃度,分別為:6.5g(相當(dāng)于生藥量)/kg,26.0g(相當(dāng)于生藥量)/kg

6、?! ?.1.2超臨界萃取法投藥800g萬年蒿于超臨界萃取儀里,分別進(jìn)行了兩次萃取。第一次沒有提攜劑,第二次以無水乙醇為提攜劑。具體實驗條件及結(jié)果如下?! ”?萬年蒿超臨界萃取條件(略)  2.2超臨界萃取物的配制取適量無水乙醇作為提攜劑的超臨界萃取物,用少量吐溫-80和配制好的0.05g/ml羧甲基纖維素鈉溶液作為溶劑配制成低、高兩種濃度:0.45,0.90g/kg(這兩個濃度均以超臨界萃取物的質(zhì)量絕對值進(jìn)行計算)?! ?.3動物實驗  2.3.1實驗方法從動物科取回小鼠后,放置于藥學(xué)院動物室,使其適應(yīng)環(huán)境數(shù)日。小鼠隨機(jī)分成6組,每組10只:第1組:正常組;第2組:急

7、性肝損傷模型組;第3組:萬年蒿的水提液低劑量組(6.5g/kg);第4組:萬年蒿的水提液高劑量組(26.0g/kg);第5組:萬年蒿超臨界萃取物低劑量組(0.45g/kg);第6組:萬年蒿超臨界萃取物高劑量組(0.90g/kg)。正常組和模型組灌胃蒸餾水,其余各組分別灌胃上述劑量的相應(yīng)藥物,連續(xù)4d。第5天上午灌胃一次,過2h正常組腹腔注射相應(yīng)的生理鹽水,其它各組小鼠腹腔注射0.1%CCl4豆油溶液0.1ml/10g。24h后由小鼠頸動脈取血(取血前12h前開始禁食),離心機(jī)3000r/min分離血清,根據(jù)試劑盒方法測定AST,ALT[4

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