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1、萬方數(shù)據(jù)中圖分類號UDCR743610碩士學位論文學校代碼!Q墨墨墨Apelin．13對大鼠局灶性腦缺血．再灌注損傷的保護作用及其機制ProtectiveeffectofApelin一13ontheisehemia-reperfusedinjuryandthemechanismpossibleinthefocalcerebralisehemia-reperfusedinjuryrats作者姓名：學科專業(yè)：研究方向：學院(系、所)：指導(dǎo)教師：李亮臨床醫(yī)學外科學湘雅三醫(yī)院王知非教授論文答辯日期趁竺』：b答辯委員
2、會主席中南大學2014年5月萬方數(shù)據(jù)學位論文原創(chuàng)性聲明測本人鄭重聲明，所呈交的學位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關(guān)責任。作者簽名：業(yè)日期：業(yè)年j／月三日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者和指導(dǎo)教師完全了解中南大學有關(guān)保
3、留、使用學位論文的規(guī)定：即學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交學位論文的復(fù)印件和電子版；本人允許本學位論文被查閱和借閱；學?？梢詫⒈緦W位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存和匯編本學位論文。保密論文待解密后適應(yīng)本聲明。作者簽名：名衫導(dǎo)師簽名萬方數(shù)據(jù)Apelin一13對大鼠局灶性腦缺血一再灌注損傷的保護作用及其機制摘要目的：觀察Apelin．13對大鼠局灶性腦缺血一再灌注損傷的保護作用并探討其可能的機制方法：采用線栓法建立S—D雄性大鼠局灶性缺血．再灌注損傷模型，缺血
4、2小時再灌注72小時。進行側(cè)腦室埋管，Apelin一13(0．1、1．0和10．0I．tg／kg)再灌注前15分鐘進行側(cè)腦室注射。術(shù)后在不同時間點進行神經(jīng)功能缺損評分。測量并計算大鼠腦組織含水量。采用2，3，5．氯化三苯基四氮唑(2，3，5一threephenyltetrazoliumchloride，1vrC)染色觀察并計算腦梗死的體積和比例。H—E染色觀察大鼠腦組織切片的病理學改變。取缺血周邊腦組織，制備腦組織勻漿上清液，采用分光光度法檢測腦組織勻漿上清液中活性氧(reactiveoxygenspeci
5、es，ROS)、丙二醛(malonaldehyde，MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)的活性；采用雙抗體夾心法測定腦組織勻漿上清液中總抗氧化力(totalantioxidantcapacity，T．AOC)的水平；采用ELISA法測定腦組織勻漿上清液中還原型谷胱甘肽(reducedglutathionehormon，GSH)的水平。采用實時定量PCR和Westernblot檢測缺血周邊腦組織中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brainderivedneurotrophicfa
6、ctor,BDNF)和酪氨酸激酶B(tyrosinekinaseB，TrkB)mRNA和蛋白的表達。結(jié)果：(1)與缺血．再灌注損傷模型組比較，Apelin．13(1．0和10．0lag／kg)組大鼠神經(jīng)功能缺損明顯改善，肌力明顯增強，神經(jīng)功能評分顯著性降低(均P<0．05)。(2)與缺血．再灌注損傷模型組比較，Apelin-13(1．0和10．0p．g／kg)處理顯著降低了腦組織的含水量、腦梗死體積和比例，呈現(xiàn)劑量依賴性(均P<0．05)。(3)假手術(shù)組大鼠腦組織結(jié)構(gòu)正常，神經(jīng)元的細胞核居中，沒有神經(jīng)細胞的
7、變性和壞死。而與假手術(shù)組比較，模型組大鼠腦組織中神經(jīng)細胞的數(shù)目明顯減少，可見明顯的組織水腫、神經(jīng)細胞變性和壞死，神經(jīng)元的細胞核出現(xiàn)不同程度的核固縮和溶解。與模型組相比，Apelin．13(1．0和10．0pg／kg)處理均可明顯改善缺血一再灌注后大鼠腦組織中神經(jīng)細胞的形態(tài)，減輕核固縮和胞體腫脹程度，抑制神經(jīng)細胞的變性和壞死。(4)與缺血萬方數(shù)據(jù)一再灌注損傷模型組比較，Apelin一13(1．0和10．0pg／kg)處理顯著降低了缺血周邊腦組織勻漿上清液中ROS水平和MDA含量(均P<0．05)，顯著增加了缺
8、血周邊腦組織勻漿上清液中T-AOC水平、SOD的活性和GSH水平，呈現(xiàn)劑量依賴性(均P<0．05)。(5)與缺血．再灌注損傷模型組比較，Apelin-13(1．0和10．0gg／kg)處理顯著增加了缺血周邊腦組織中BDNF和TrkBmRNA和蛋白的表達，呈現(xiàn)劑量依賴性(P<0．05)。結(jié)論：Apelin．13對大鼠局灶性腦缺血一再灌注損傷有保護作用，其機制可能與Apelin一13抑制氧化應(yīng)激、上調(diào)BDNF及受體T
