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《松萎蔫病病原的研究 畢業(yè)論文樣式》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、小五號宋體×××××專業(yè)畢業(yè)論文小二號黑體，居中排列松萎蔫病病原的研究四號宋體，1.5倍行距學生姓名：專業(yè)班級：座號：指導教師：完稿日期：松萎蔫病病原的研究小二號黑體，居中四號宋體，1.5倍行距寫作提綱一、緒論自從20世紀初松萎蔫病被發(fā)現以來，該病已經從北美洲擴散到日本，后來又傳入中國、韓國等亞洲國家和歐洲的葡萄牙。該病的致病機理尚未研究清楚，松材線蟲卻長期以來被認為是PWN的唯一病原。然而，有研究報道松材線蟲相關的細菌能產生毒素。有實驗表明，無菌的松材線蟲雖然能侵入松樹木質部，但在不攜帶細菌的情況下對松樹沒有致病力。這些林間試驗的數據說明只有當松材線蟲又感染細菌情
2、況下，才能使被接種的黑松患病死亡，但這些試驗結果并不能有力地證明復合侵染假說，雖然試驗結果中仍有試樹死亡，其死亡的原因可能是接種后無菌線蟲從接種處或因機械或昆蟲取食、產卵造成的傷口處獲得了細菌。用實驗證明此假說的主要困難是創(chuàng)造一個在實驗室或野外接種成年松樹的無菌環(huán)境條件，且幼苗較成年松樹(3年或以上)的生理和病理有很大差別，因此應選用成年的松樹進行接種試驗。筆者從研究松材線蟲的行為與環(huán)境關系的預實驗中發(fā)現，松材線蟲的運動與環(huán)境溫度有密切關系。在7℃的環(huán)境中，松材線蟲就完全失去了運動能力。同時，據研究報道健康黑松體內沒有細菌，據此設計了一種稱之為“冷閘”的接種試驗裝置
3、，使用該裝置將松材線蟲與其攜帶的細菌隔離在滅菌的接種枝內，對大樹接種時，可以不用對整株樹滅菌，僅對接種枝滅菌就能保證試驗的進行，以此來確定松萎蔫病的病因。二、本論（一）材料與方法1、供試染菌和無菌松材線蟲的獲得2、黑松愈傷組織的誘導和繼代培養(yǎng)3、松材線蟲攜帶細菌菌株的獲得與鑒定4、接種無菌線蟲、細菌的再分離及鑒定（二）結果與分析1、不同接種處理后松樹的病狀2、不同接種處理后的再分離、鑒定結果三、討論實驗結果進一步驗證了松材線蟲攜帶的致病細菌能產生毒素，并且是這些毒素導致了松樹的萎蔫和死亡。筆者的這些實驗結果證明松材線蟲與其攜帶的互惠共生致病細菌復合體誘導了松萎蔫病。
4、因此，松萎蔫病是用實驗驗證的首例由線蟲一細菌共生復合體誘導的植物病害。起首空二格，四號楷體加粗小二號黑體，居中排列松萎蔫病病原的研究小四號宋體，居中排列趙博光小四號楷體，1.5倍行距，詞間空一格起首空二格，四號楷體加粗小四號楷體，1.5倍行距【內容摘要】為了探討松萎蔫病與松材線蟲的關系，筆者研制了一種簡單試驗裝置“冷閘”，使接種的線蟲被隔離在松樹接種枝內而不能遷移。用該裝置進行接種試驗的結果表明:在松材線蟲被局限于接種枝內而不能移動到寄生其他部位的情況下，接種無菌松材線蟲與致病熒光假單胞菌,以及該致病細菌體外培養(yǎng)的無細胞濾液，同樣能誘發(fā)該病。該致病細菌又從接種無菌線
5、蟲和致病細菌后病死寄主中分離到并被鑒定，證明符合柯赫法則。致病熒光假單胞菌體外培養(yǎng)的無細胞濾液接種試驗結果說明，該致病菌株培養(yǎng)物中的內吸性毒紊導致了寄主的萎蔫和死亡。由此，松萎蔫病經實驗證實為首例由細菌和線蟲互惠共生復合體引起的植物病害。【關鍵詞】松萎蔫病松材線蟲線蟲-細菌復合體熒光假單胞細菌小四號宋體，1.5倍行距自從20世紀初松萎蔫病(PineWiltDisease，簡稱PWN)被發(fā)現以來，該病已經從北美洲擴散到日本，后來又傳入中國、韓國等亞洲國家和歐洲的葡萄牙。該病的致病機理尚未研究清楚，松材線蟲卻長期以來被認為是PWN的唯一病原。然而，有研究報道松材線蟲相關
6、的細菌能產生毒素。有實驗表明，無菌的松材線蟲雖然能侵入松樹木質部，但在不攜帶細菌的情況下對松樹沒有致病力。這些林間試驗的數據說明只有當松材線蟲又感染細菌情況下，才能使被接種的黑松患病死亡，但這些試驗結果并不能有力地證明復合侵染假說，雖然試驗結果中仍有試樹死亡，其死亡的原因可能是接種后無菌線蟲從接種處或因機械或昆蟲取食、產卵造成的傷口處獲得了細菌。用實驗證明此假說的主要困難是創(chuàng)造一個在實驗室或野外接種成年松樹的無菌環(huán)境條件，且幼苗較成年松樹(3年或以上)的生理和病理有很大差別，因此應選用成年的松樹進行接種試驗。筆者從研究松材線蟲的行為與環(huán)境關系的預實驗中發(fā)現，松材線蟲
7、的運動與環(huán)境溫度有密切關系。在7℃的環(huán)境中，松材線蟲就完全失去了運動能力。同時，據研究報道健康黑松體內沒有細菌，據此設計了一種稱之為“冷閘”的接種試驗裝置，使用該裝置將松材線蟲與其攜帶的細菌隔離在滅菌的接種枝內，對大樹接種時，可以不用對整株樹滅菌，僅對接種枝滅菌就能保證試驗的進行，以此來確定松萎蔫病的病因。一級標題，四號黑體加粗，左對齊，獨占行，末尾不加標點1材料與方法二級標題，小四號黑體加粗，左對齊，獨占行，末尾不加標點1.1供試染菌和無菌松材線蟲的獲得從采集于野外自然感病枯死的黑松木段上取樣，分離方法參見文獻。將分離并鑒定的染菌線蟲培養(yǎng)在長滿灰葡萄孢的PDA
